蒿属花粉过敏性鼻炎患者外周血有核细胞DNA甲基化相关位点的筛选
【学位单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:R765.21
【部分图文】:
测序深度是指原始数据经过滤后生成的高质量序列总量与基因组大小的比值,它可以用作评估测序质量的指标,测序深度越深,测序错误率及假阳性出现概率越小。1.2.6.2 比对到基因组(Mapping)参照基因组:GRCh38ftp://ftp.ensembl.org/pub/release-89/fasta/homo_sapiens/dna/参照基因组注释:Ensembl89ftp://ftp.ensembl.org/pub/release-89/genbank/homo_sapiens/分析软件:Bismark0.19.0http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/bismark/Bowtie22.2.3http://bowtie-bio.sourceforge.net/bowtie2/index.shtmlBismark【10】通过 Bowtie2【11-12】将 reads 比对到基因组,并识别碱基颠换事件,最后分类、统计,原理如图 1 所示:
山西医科大学硕士学位论文1.2.6.3 基因区域甲基化分布统计参照基因组注释:Ensembl89ftp://ftp.ensembl.org/pub/release-89/genbank/homo_sapiens/分析软件: RSeQC 2.5 http://rseqc.sourceforge.net 通过 RSeQC【13】统计甲基化分布在基因不同区域的情况1.2.6.4 甲基化事件检测及测序覆盖度、深度统计Bismark 检测识别甲基化事件的原理如图 2 所示:
11图 3.测序数据单碱基质量分布图Figure3.Single base mass distribution map of sequencing data注:X 轴是 reads 中碱基的位置(5’>3’),Y 轴是该位点的碱基 Q 值统计。红色的线为中位数,蓝色的线为平均数,黄色的长方形为 25%-75%区间,触须为 10%-90%区间。通常来说,reads 两端的碱基质量较低,中间部分的碱基质量较高。本次测序大部分序列的 Q值> 20 ,说明测序质量较好。2.1.2 Base content 分布检验测序数据是否存在 GC、 AT 分离的情况,可用 Base content 分布来判断。一般这种现象在建库和测序过程中引入,对之后的生物信息分析结果产生干扰。本次测序的 Base
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