ATAD3A调控线粒体分裂与融合在OSAS大鼠认知障碍中的作用研究
发布时间：2020-12-26 19:02
目的:通过双侧海马立体定位注射慢病毒干预ATAD3A表达,观察线粒体分裂与融合在OSAS后认知障碍中的作用。方法:60只SD大鼠随机分为正常组（CON）、OSAS模型组（OSAS）、ATAD3A基因慢病毒敲低（ATAD3A-KD）及空病毒对照组（OSAS-LV）（每组15只）。ATAD3A-KD组及OSAS-LV组提前2周注射慢病毒;分别用免疫荧光、免疫印迹技术检测慢病毒感染海马效率;慢病毒转染成功后构建OSAS大鼠模型。检测大鼠缺氧及复氧的鼠尾动脉血氧饱和度;采用Morris水迷宫评估大鼠行为学变化;FJC染色观察大鼠海马神经元的凋亡情况;通过WB检测各组大鼠海马p-Drp1、t-Drp1、MFN1/2的变化情况;免疫荧光检测Drp1、MFN1/2在神经细胞的定位。结果:1、双侧海马注射ATAD3A转染2周后,免疫荧光结果显示海马区均有阳性表达。WB检测大鼠海马组织ATAD3A表达水平较对照组降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。2、CIH模型建造过程中,OSAS大鼠有烦躁不安、呼吸加深加快、抬头呼吸、白天嗜睡、胸腹反常呼吸等症状;缺氧期间大鼠鼠尾动脉血压饱和度为（62.6...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
慢病毒转染后大鼠海马组织ATAD3A表达情况
遵义医科大学硕士学位论文黄琴17表3OSAS大鼠缺氧及复氧期鼠尾血氧饱和度的变化（x±s，n=40）Tab.3ChangesinbloodoxygensaturationduringhypoxiaandreoxygenationphasesintheCIHmodelrats(x±s,n=40)ExperimentalphrasesAnimalnumberSpo2(%)Hypoxiainterval4096.85±1.21Reoxygenationinterval4062.63±3.03*Note：comparisonbetweenreoxygenationintervalandhypoxiainterval，*P＜0.05.2.2大鼠行为学变化（Morris水迷宫）2.2.1定位航行实验在本实验中，采用Morris水迷宫观察大鼠空间记忆和学习能力的变化情况，随着大鼠探索时间的增加，逃避潜伏期的时间也越来越短，所行的轨迹的路程也越来越少。与正常组相比，OSAS组大鼠寻找平台的时间较长（P＜0.05），ATAD3A-KD组大鼠寻找的平台时间稍长（P＜0.05）。OSAS与OSAS-LV组大鼠寻找平台的时间无明显变化（P＞0.05）。与OSAS-LV组相比，海马注射ATAD3A-KD组的大鼠寻找的时间降低，有统计学意义（P＜0.05）。（见表4、5，图2、3、4）图2OSAS认知功能障碍大鼠在逃避潜伏期的代表性轨迹Fig.2TherepresentativetrackofescapelatencyinOSASratswithcognitiveimpairmentNote:Thepictureshowstypicalmovementtrackofratsinescapelatency.A.CONgroup;B.OSASgroup；C.OSAS-LV；DATAD3A-KD
遵义医科大学硕士学位论文黄琴18表4OSAS认知功能障碍大鼠学习和记忆的变化情况（x±s,n=9）Tab.4AlteredlearningandmemoryinOSASratswithcognitiveimpairment(x±s,n=9)GroupFirstday(s)Secondday(s)Thirdday(s)Forthday(s)Fifthday（s）CON56.48±10.9339.56±39.3416.83±4.8413.09±2.0910.18±4.64OSAS75.46±26.3357.62±24.2654.43±13.0147.15±18.7929.21±8.05OSAS-LV75.04±2.0457.85±31.4455.91±34.4444.8±18.7926.35±15.74ATAD3A-KD64.19±1.7351.44±27.9538.31±6.4519.40±7.7713.23±5.01图3OSAS认知功能障碍大鼠学习和记忆的变化情况Figure3AlteredlearningandmemoryinOSASratswithcognitiveimpairmentNote：Escapelatencysignificanteffortsforgroups(F(4,100)=36.58,P＜0.0001)andfordays(F(3,100)=23.61,P＜0.0001),butnotforinteraction(F(12,100)=0.891,P＜0.5556)表5OSAS认知功能障碍大鼠找到平台的距离（x±s,n=9）Tab5.ThedistanceoffindingplatforminOSASratswithcognitiveimpairmentGroupFirstday(s)Secondday(s)Thirdday(s)Forthday(s)Fifthday（s）CON11.48±3.159.93±1.404.36±0.4613.09±2.093.16±0.43OSAS18.8±0.9213.18±0.9811.91±1.018.85±0.738.26±0.71OSAS-LV19.10±0.7714.49±2.2812.47±0.808.01±0.637.97±1.06ATAD3A-KD14.19±0.8510.74±0.614.77±0.803.70±0.913.30±0.42
【参考文献】：
期刊论文
[1]阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征动物模型大鼠小脑和海马组织中谷氨酸水平的变化[J]. 徐轶,李向阳,单琳. 中国医学前沿杂志(电子版). 2018(12)
[2]儿童OSAHS血浆腺苷水平及认知障碍的研究[J]. 严杨艳,凡启军,刘国钧,林发明,黄赛瑜,蔡晓红,倪丽艳. 医学研究杂志. 2013(03)
硕士论文
[1]JAK2/STAT3调控M1mAChR对OSAS大鼠学习、记忆能力的作用研究[D]. 胡词.遵义医科大学 2019
[2]OSAS大鼠海马组织中α7nAChR的表达变化[D]. 战静.遵义医科大学 2019
[3]多奈哌齐对OSAS大鼠学习记忆的影响及其机制研究[D]. 李宓.遵义医学院 2018
本文编号：2940290
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
慢病毒转染后大鼠海马组织ATAD3A表达情况
遵义医科大学硕士学位论文黄琴17表3OSAS大鼠缺氧及复氧期鼠尾血氧饱和度的变化（x±s，n=40）Tab.3ChangesinbloodoxygensaturationduringhypoxiaandreoxygenationphasesintheCIHmodelrats(x±s,n=40)ExperimentalphrasesAnimalnumberSpo2(%)Hypoxiainterval4096.85±1.21Reoxygenationinterval4062.63±3.03*Note：comparisonbetweenreoxygenationintervalandhypoxiainterval，*P＜0.05.2.2大鼠行为学变化（Morris水迷宫）2.2.1定位航行实验在本实验中，采用Morris水迷宫观察大鼠空间记忆和学习能力的变化情况，随着大鼠探索时间的增加，逃避潜伏期的时间也越来越短，所行的轨迹的路程也越来越少。与正常组相比，OSAS组大鼠寻找平台的时间较长（P＜0.05），ATAD3A-KD组大鼠寻找的平台时间稍长（P＜0.05）。OSAS与OSAS-LV组大鼠寻找平台的时间无明显变化（P＞0.05）。与OSAS-LV组相比，海马注射ATAD3A-KD组的大鼠寻找的时间降低，有统计学意义（P＜0.05）。（见表4、5，图2、3、4）图2OSAS认知功能障碍大鼠在逃避潜伏期的代表性轨迹Fig.2TherepresentativetrackofescapelatencyinOSASratswithcognitiveimpairmentNote:Thepictureshowstypicalmovementtrackofratsinescapelatency.A.CONgroup;B.OSASgroup；C.OSAS-LV；DATAD3A-KD
遵义医科大学硕士学位论文黄琴18表4OSAS认知功能障碍大鼠学习和记忆的变化情况（x±s,n=9）Tab.4AlteredlearningandmemoryinOSASratswithcognitiveimpairment(x±s,n=9)GroupFirstday(s)Secondday(s)Thirdday(s)Forthday(s)Fifthday（s）CON56.48±10.9339.56±39.3416.83±4.8413.09±2.0910.18±4.64OSAS75.46±26.3357.62±24.2654.43±13.0147.15±18.7929.21±8.05OSAS-LV75.04±2.0457.85±31.4455.91±34.4444.8±18.7926.35±15.74ATAD3A-KD64.19±1.7351.44±27.9538.31±6.4519.40±7.7713.23±5.01图3OSAS认知功能障碍大鼠学习和记忆的变化情况Figure3AlteredlearningandmemoryinOSASratswithcognitiveimpairmentNote：Escapelatencysignificanteffortsforgroups(F(4,100)=36.58,P＜0.0001)andfordays(F(3,100)=23.61,P＜0.0001),butnotforinteraction(F(12,100)=0.891,P＜0.5556)表5OSAS认知功能障碍大鼠找到平台的距离（x±s,n=9）Tab5.ThedistanceoffindingplatforminOSASratswithcognitiveimpairmentGroupFirstday(s)Secondday(s)Thirdday(s)Forthday(s)Fifthday（s）CON11.48±3.159.93±1.404.36±0.4613.09±2.093.16±0.43OSAS18.8±0.9213.18±0.9811.91±1.018.85±0.738.26±0.71OSAS-LV19.10±0.7714.49±2.2812.47±0.808.01±0.637.97±1.06ATAD3A-KD14.19±0.8510.74±0.614.77±0.803.70±0.913.30±0.42
【参考文献】：
期刊论文
[1]阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征动物模型大鼠小脑和海马组织中谷氨酸水平的变化[J]. 徐轶,李向阳,单琳. 中国医学前沿杂志(电子版). 2018(12)
[2]儿童OSAHS血浆腺苷水平及认知障碍的研究[J]. 严杨艳,凡启军,刘国钧,林发明,黄赛瑜,蔡晓红,倪丽艳. 医学研究杂志. 2013(03)
硕士论文
[1]JAK2/STAT3调控M1mAChR对OSAS大鼠学习、记忆能力的作用研究[D]. 胡词.遵义医科大学 2019
[2]OSAS大鼠海马组织中α7nAChR的表达变化[D]. 战静.遵义医科大学 2019
[3]多奈哌齐对OSAS大鼠学习记忆的影响及其机制研究[D]. 李宓.遵义医学院 2018
本文编号：2940290
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