慢病毒介导RNA干扰沉默CCR3对小鼠过敏性鼻炎肥大细胞的功能作用研究

发布时间：2020-12-28 14:04

　　目的:应用体外合成的重组慢病毒干扰载体,特异性抑制肥大细胞细胞上CCR3表达,体内观察过敏性鼻炎小鼠鼻粘膜病理形态改变和肥大细胞浸润数目变化,并比较骨髓、外周血、鼻黏膜中肥大细胞CCR3及释放介质的差异情况,以期了解沉默CCR3基因对肥大细胞功能的作用及影响程度,为过敏性鼻炎的基因治疗奠定基础。方法:将Balb/c小鼠随机分为4组:正常对照组、过敏性鼻炎组、controlshRNA处理组和CCR3shRNA处理组。以卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立小鼠过敏性鼻炎模型,采用局部滴鼻给药的方式,将体外合成的针对CCR3基因的重组慢病毒载体应用于小鼠过敏性鼻炎模型。末次鼻腔激发之后的30分钟内对各组小鼠进行症状学评估,并收集各组小鼠的骨髓、外周血、鼻粘膜标本。应用western blot和qPCR检测各组小鼠骨髓、外周血及鼻粘膜中肥大细胞CCR3mRNA和CCR3蛋白的水平变化。采用HE染色、甲苯胺蓝染色检测鼻粘膜的组织病理形态及鼻黏膜中肥大细胞的浸润情况,同时利用电镜观察鼻粘膜纤毛形态。应用Elisa方法测定小鼠骨髓、外周血、鼻粘膜中组胺(Histamine)、类胰蛋白酶(Tryptase... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

鼻腔激发后小鼠抓鼻行为

与 Normal 组比较，**P＜0.01，与R3 抑制动物标本中 CCR3 蛋白的组、过敏性鼻炎组、慢病毒 controlshR中获取小鼠的骨髓、外周血和鼻粘膜标白水平，结果如图 3.3 所示。

3.2 鼻腔激发后小鼠症状评分，与 Normal 组比较，**P＜0.01，与 AR 组比较，#P＜2 干扰基因 CCR3 抑制动物标本中 CCR3 蛋白的表达分别从正常对照组、过敏性鼻炎组、慢病毒 controlshRNA 处理组、慢病R3shRNA 处理组中获取小鼠的骨髓、外周血和鼻粘膜标本，检测四组小鼠本中 CCR3 的蛋白水平，结果如图 3.3 所示。

【参考文献】：
硕士论文
[1]RNAi抑制CCR3基因对小鼠肥大细胞的影响[D]. 彭海森.南昌大学 2018



本文编号：2943884