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PEDF基因修饰人脐带间充质干细胞对早期糖尿病大鼠视网膜PEDF及VEGF表达的影响

发布时间:2021-01-09 07:04
  目的:观察色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(pigment epithelial-derived factor gene-modified human umbilical cord mesenchymal stem cells,PEDF-MSCs)对早期糖尿病大鼠视网膜中PEDF、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响及对视网膜的保护作用。方法:胰蛋白酶消化法获取人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)并进行体外扩增,采用流式细胞学方法进行鉴定其免疫表型。采用基因重组方法构建慢病毒(lentivirus,LV)-PEDF载体并对其进行基因测序。LV-PEDF以感染复数(multiplicity of infection,MOI)值为10、30、50体外转染h UCMSCs,采用实时定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,real time-PCR... 

【文章来源】:天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】:117 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

PEDF基因修饰人脐带间充质干细胞对早期糖尿病大鼠视网膜PEDF及VEGF表达的影响


光学显微镜下hUCMSCs形态hUCMSCs呈长梭形,漩涡状生长,A-C分别为×40,×100,×200ABC

人脐带,干细胞,来源,脐带


图 3 获取人脐带来源干细胞的不同方法,我们采取了类似方法(i)和(iii)结合的方带血管时,会存在大量 hWJSCs,并不需要会混杂有脐带不同位置的干细胞,这样的

转染,表达强度,细胞,强度


组表达 GFP 细胞数目及强度明显增加(图 4F)。转染后 96 小时,10MOI 组 GFP表达较之前明显增加(图 4G),30MOI 组见 GFP 表达强度也增加(图 4H),而 50MOI 组细胞密集,GFP 表达未见明显增强(图 4I)。10MOI 10MOI 10MOI

【参考文献】:
期刊论文
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[4]慢病毒介导的RNA干扰技术构建人胚椎间盘髓核上皮膜蛋白-1基因低表达细胞模型[J]. 胡明,马远征,李大伟,黄凤山,杨达宇,杨同磊,刘玉川.  中国骨伤. 2012(10)
[5]缺氧诱导因子-1α小干扰RNA对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子mRNA抑制作用的动态观察[J]. 孟丽珠,陈松,刘艳,王玉川,林锦镛,韩梅.  中华眼底病杂志. 2011 (03)
[6]玻璃体腔重复注射抗血管内皮生长因子单克隆抗体bevacizumab对糖尿病大鼠视网膜的毒性观察[J]. 许艳,陈松.  中华眼底病杂志. 2011 (03)
[7]Risk factors associated with retinal neovascularization of diabetic retinopathy in type 2 diabetes mellitus[J]. Ze-Long Zhong,Mei Han,Song Chen Clinical College of Ophthalmology,Tianjin Medical University,Tianjin Eye Hospital,Tianjin 300020,China.  International Journal of Ophthalmology(English Edition). 2011(02)
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[10]Diabetic retinopathy:Role of inflammation and potential therapies for anti-inflammation[J]. Gregory I Liou.  World Journal of Diabetes. 2010(01)

硕士论文
[1]LMP-1基因慢病毒重组体对大鼠骨髓间充质干细胞的增殖影响及其表达[D]. 梁长生.山西医科大学 2013



本文编号:2966190

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