hESC-RPE衍生的外泌体参与视网膜变性疾病炎症微环境调控及其机制研究
发布时间：2021-01-25 12:38
背景:视网膜色素上皮细胞（Retinal pigment epithelium cells,RPE）通过发挥营养、支持及屏障等关键作用来维持视网膜功能和代谢的稳态。视网膜变性疾病（Retinal Degenerative diseases,RD）的发生,伴随视网膜色素上皮细胞的凋亡和功能障碍[1]。视网膜下腔移植人胚胎干细胞衍生的视网膜色素上皮细胞（Human Embryonic Stem Cells derived RPE,hESC-RPE）是目前治疗此类疾病的最佳临床策略之一[2,3]。大量动物和临床实验证实,hESC-RPE的移植对于视网膜变性疾病有明确的短期疗效,是良好的种子细胞[4],既往研究报道,超过百分之95的治疗细胞移植后主要是通过细胞间物质交换,自分泌、旁分泌机制发挥免疫调节作用[5]。外泌体作为一种几乎所有活细胞都可产生的纳米级囊泡,分泌出胞后可在全身循环中传递,其内部搭载有蛋白质、核酸及脂质等物质[6],通过将上述生物活性分子传递给靶细胞从而改变靶细胞的行为和状态[7,8]。作为移植后细胞间物质交换和信息传递的重要载体,现阶段对hESC-RPE衍生的外泌体在变性视...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１?ｈＥＳＣ－ＲＰＥ光镜下形态学观察??图Ａ为ｈＥＳＣ－ＲＰＥ完全融合后细胞形态（１００ｘ）；图Ｂ为ｈＥＳＣ－ＲＰＥ完全融合后细胞形态（２００ｘ）
移植延缓ＲＣＳ大鼠视功能的丧失??为了明确Ｎｏｒ－ＥＸＯ是否具有保护ＲＣＳ大鼠变性视网膜的功能，本实验于变性??早期（ｄ２１）向ＲＣＳ大鼠视网膜下腔移植Ｎｏｒ－ＥＸＯ，并在移植当天术前（Ｐｒｅ－ｓｕｒｇｅｒｙ，??ＰＲＥ）及移植后每周通过ｆ－ＥＲＧ及光栅行为学评估Ｎｏｒ－ＥＸＯ对ＲＣＳ大鼠视功能的??影响，直到Ｎｏｒ－ＥＸ？移植组与ＰＢＳ移植组的ｆ－ＥＲＧ幅值与视敏度的差异在统计学??上没有意义为止。??①Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植延缓ＲＣＳ大鼠视网膜电生理反应丢失??相较于ＰＢＳ移植组（图３－５，?Ａ），Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植组的ＲＣＳ大鼠在移植后ｌｗ??（Ｐｌｗ），２ｗ?（Ｐ２ｗ）和３ｗ?（Ｐ３ｗ）三个时间点均显示出更高的ａ波幅值（图３－５，??Ｂ），尽管这种差异在统计学上并没有显著性意义；而ｂ波对于这种趋势的差异则??体现得更为显著（图３－５，?Ｃ），结果显示，Ｎｏｒ－ＥＸ？移植组的ＲＣＳ大鼠在上述三个??时间节点ｂ波幅值都显著髙于ＰＢＳ移植组（ｐ＜０．０５）。??Ａ???Ｂ??ＰＢＳ?＾ｏｒ?ＥＸＯ?￣｜?？?１５〇ｌ?—ｘ。??［：??ｐｉｗ?ｓ?＿，＿＿．＿＿，＿＿???—????ｃ?＾?＾?＾?＾?＾??：Ｉ：ｌ］???％?，??／ｖ，??ｉ?２ＱＱ－?．??Ｐ３ｗ?ｔ??Ｚ?ｉ??Ｐ４ｗ?一＾＼＿?＿，＿，＿，＿＿＿?????＾?＾?／?／??图３－５外泌体移植对ＲＣＳ大鼠视网膜电生理功能的影响??图Ａ采用ｆ－ＥＲＧ记录暗适应后ＲＣＳ大鼠接受外泌体或ＰＢＳ移植后不同时间点ｆ－ＥＲＧ波形图；图Ｂ为ｌ．Ｏｄｂ??光强下ａ波幅值统计；图
４±１５．７１?２１３．１８±１４．３６?１６１．１２±２４．２７?１２２．６２±１４．００??Ｐ?值?１．００?０．０４?０．０１?０．０４?０．６６??②Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植保护变性早期ＲＣＳ大鼠的视敏度??视觉行为学反应相较于闪光视网膜电图能够相对更灵敏的反应局部视功能的??变化，在进一步评估Ｎｏｒ－ＥＸＯ对视功能的维持情况时，本实验选择了光栅行为学??作为检测手段。相较于ＰＢＳ移植组，Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植组的ＲＣＳ大鼠在移植后三周??内平均视敏度显著更高（ｐ＜０．０５；图３－６，Ａ－Ｂ），但到移植后４ｗ?（Ｐ４ｗ）时，这??种差异没有统计学意义。??以上结果提示：Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植使ＲＣＳ大鼠保有更高的ｆ－ＥＲＧ波幅和视敏??度，延缓了?ＲＣＳ大鼠视功能丧失。??＿＿??图３－６外泌体移植对ＲＣＳ大鼠视敏度的影响??图Ａ光栅行为学检测大鼠视敏度示意图；图Ｂ?ＲＣＳ大鼠接受外泌体或ＰＢＳ移植后光栅行为学视敏度统计值??（ｎ＝５）。ＰＲＥ代表ｄ２１移植术前，Ｐｌｗ、Ｐ２ｗ、Ｐ３ｗ、Ｐ４ｗ分别代表接受外泌体或ＰＢＳ移植后ｌｗ、２ｗ、３ｗ、??２３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]RCS大鼠视网膜色素变性过程中视网膜免疫微环境的改变[J]. 唐环宇,卢紫阳,何军材,郜原,阴正勤. 中华实验眼科杂志. 2018 (11)
[2]Mesenchymal stem cells-derived exosomes ameliorate blue light stimulation in retinal pigment epithelium cells and retinal laser injury by VEGF-dependent mechanism[J]. Guang-Hui He,Wei Zhang,Ying-Xue Ma,Jing Yang,Li Chen,Jian Song,Song Chen. International Journal of Ophthalmology. 2018(04)
[3]干细胞移植治疗视网膜变性疾病面临的挑战和前景[J]. 阴正勤. 第三军医大学学报. 2013(15)
本文编号：2999236
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１?ｈＥＳＣ－ＲＰＥ光镜下形态学观察??图Ａ为ｈＥＳＣ－ＲＰＥ完全融合后细胞形态（１００ｘ）；图Ｂ为ｈＥＳＣ－ＲＰＥ完全融合后细胞形态（２００ｘ）
移植延缓ＲＣＳ大鼠视功能的丧失??为了明确Ｎｏｒ－ＥＸＯ是否具有保护ＲＣＳ大鼠变性视网膜的功能，本实验于变性??早期（ｄ２１）向ＲＣＳ大鼠视网膜下腔移植Ｎｏｒ－ＥＸＯ，并在移植当天术前（Ｐｒｅ－ｓｕｒｇｅｒｙ，??ＰＲＥ）及移植后每周通过ｆ－ＥＲＧ及光栅行为学评估Ｎｏｒ－ＥＸＯ对ＲＣＳ大鼠视功能的??影响，直到Ｎｏｒ－ＥＸ？移植组与ＰＢＳ移植组的ｆ－ＥＲＧ幅值与视敏度的差异在统计学??上没有意义为止。??①Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植延缓ＲＣＳ大鼠视网膜电生理反应丢失??相较于ＰＢＳ移植组（图３－５，?Ａ），Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植组的ＲＣＳ大鼠在移植后ｌｗ??（Ｐｌｗ），２ｗ?（Ｐ２ｗ）和３ｗ?（Ｐ３ｗ）三个时间点均显示出更高的ａ波幅值（图３－５，??Ｂ），尽管这种差异在统计学上并没有显著性意义；而ｂ波对于这种趋势的差异则??体现得更为显著（图３－５，?Ｃ），结果显示，Ｎｏｒ－ＥＸ？移植组的ＲＣＳ大鼠在上述三个??时间节点ｂ波幅值都显著髙于ＰＢＳ移植组（ｐ＜０．０５）。??Ａ???Ｂ??ＰＢＳ?＾ｏｒ?ＥＸＯ?￣｜?？?１５〇ｌ?—ｘ。??［：??ｐｉｗ?ｓ?＿，＿＿．＿＿，＿＿???—????ｃ?＾?＾?＾?＾?＾??：Ｉ：ｌ］???％?，??／ｖ，??ｉ?２ＱＱ－?．??Ｐ３ｗ?ｔ??Ｚ?ｉ??Ｐ４ｗ?一＾＼＿?＿，＿，＿，＿＿＿?????＾?＾?／?／??图３－５外泌体移植对ＲＣＳ大鼠视网膜电生理功能的影响??图Ａ采用ｆ－ＥＲＧ记录暗适应后ＲＣＳ大鼠接受外泌体或ＰＢＳ移植后不同时间点ｆ－ＥＲＧ波形图；图Ｂ为ｌ．Ｏｄｂ??光强下ａ波幅值统计；图
４±１５．７１?２１３．１８±１４．３６?１６１．１２±２４．２７?１２２．６２±１４．００??Ｐ?值?１．００?０．０４?０．０１?０．０４?０．６６??②Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植保护变性早期ＲＣＳ大鼠的视敏度??视觉行为学反应相较于闪光视网膜电图能够相对更灵敏的反应局部视功能的??变化，在进一步评估Ｎｏｒ－ＥＸＯ对视功能的维持情况时，本实验选择了光栅行为学??作为检测手段。相较于ＰＢＳ移植组，Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植组的ＲＣＳ大鼠在移植后三周??内平均视敏度显著更高（ｐ＜０．０５；图３－６，Ａ－Ｂ），但到移植后４ｗ?（Ｐ４ｗ）时，这??种差异没有统计学意义。??以上结果提示：Ｎｏｒ－ＥＸＯ移植使ＲＣＳ大鼠保有更高的ｆ－ＥＲＧ波幅和视敏??度，延缓了?ＲＣＳ大鼠视功能丧失。??＿＿??图３－６外泌体移植对ＲＣＳ大鼠视敏度的影响??图Ａ光栅行为学检测大鼠视敏度示意图；图Ｂ?ＲＣＳ大鼠接受外泌体或ＰＢＳ移植后光栅行为学视敏度统计值??（ｎ＝５）。ＰＲＥ代表ｄ２１移植术前，Ｐｌｗ、Ｐ２ｗ、Ｐ３ｗ、Ｐ４ｗ分别代表接受外泌体或ＰＢＳ移植后ｌｗ、２ｗ、３ｗ、??２３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]RCS大鼠视网膜色素变性过程中视网膜免疫微环境的改变[J]. 唐环宇,卢紫阳,何军材,郜原,阴正勤. 中华实验眼科杂志. 2018 (11)
[2]Mesenchymal stem cells-derived exosomes ameliorate blue light stimulation in retinal pigment epithelium cells and retinal laser injury by VEGF-dependent mechanism[J]. Guang-Hui He,Wei Zhang,Ying-Xue Ma,Jing Yang,Li Chen,Jian Song,Song Chen. International Journal of Ophthalmology. 2018(04)
[3]干细胞移植治疗视网膜变性疾病面临的挑战和前景[J]. 阴正勤. 第三军医大学学报. 2013(15)
本文编号：2999236
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