糖尿病大鼠角膜上皮损伤修复延迟及其机制的初步探讨

发布时间：2021-01-31 14:09

　　目的探讨STZ诱导产生的Ⅰ型糖尿病大鼠角膜上皮损伤修复延迟及其机制，并以此进一步了解糖尿病角膜炎的病理机制。方法通过腹腔注射STZ损伤胰腺复制I型糖尿病大鼠模型。造模8周后，与同龄正常SD大鼠同时测量体重、血糖、体长以及角膜大小。用共焦显微镜检测大鼠角膜形态，用棉线测眼泪分泌度，用触觉测量器测量角膜敏感性，采用Western blot和免疫荧光的方法分析大鼠角膜相关蛋白表达与分布。用角膜损伤模型来探讨角膜损伤修复进程，并检测损伤0hr、8hr、24hr、48hr、72hr后的角膜通透性的变化；间接免疫荧光分析损伤修复过程中角膜上皮细胞紧密连接蛋白occludin与ZO-1的重塑。结果STZ诱导产生的Ⅰ型糖尿病大鼠体重，体长都比正常要明显减少（p<0.05），但角膜大小却稍小于正常，眼角膜表面无明显改变。与正常组相比，糖尿病大鼠角膜有明显虎红染色阳性（p<0.05），眼泪分泌减少（p<0.05）、角膜敏感性稍降低（p<0.05）、角膜神经分布减少（p<0.05），角膜损伤修复延迟，并且角膜上皮细胞pEGFR明显降低，紧密连接蛋白occludin and ZO... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

糖尿病大鼠高血糖以及生长抑制A．高糖与正常组血糖每周测量变化B.高糖组与正常组每周测量变化C.高糖组与正常组体长（除去尾巴）测量注射STZ后4周以及8周

3.1.2 泪膜保护的减弱以及泪液分泌的减少用虎红染色（一种用来染角膜缘同时也用来提示泪膜缺陷的染色方法）染正常组和糖尿病组的角膜，糖尿病组较正常大鼠比较明显出现阳性（图2A），糖尿组染色定量分值为7.5±0.28，而正常组仅仅1.75±0.08，提示糖尿病组有明显泪膜保护缺陷（图2B）。泪液分泌用浸润酚红的棉线来测量（图2D），与虎红染色阳性相对照，糖尿病组（9.86±1.04mm）与正常组（18.82±2.12mm）相比有明显泪液分泌降低（图2C）。

15图3 糖尿病大鼠的神经分布减少A. 角膜敏感性经触觉测量器测量，**P < 0.05, n = 12. B. 经共焦显微镜测量角膜神经基质纤维丛，代表图如示. C. 神经纤维长度经imageJ 定量，**P < 0.05.Figure 3. Impaired innervation in DM rats.(A) Corneal sensitivity was measured with an esthesiometer, **P < 0.05, n = 12. (B) Subbasal plexuswas visualized with confocal microscopy (ConfoScan; Nidek Technologies) and representativeimages are shown. (C) Nerve fiber length was quantitated, **P < 0.05.3.1.4 糖尿病大鼠角膜损伤修复延迟直径为5mm的标记环(MARK )置角膜正中压痕，用眼科手术刀刮出标记内部角膜上皮，保留角膜缘区完整未损。用荧光染色观察角膜损伤修复过程并且拍照（图4A）。修复愈合率如图4B计算。正常老鼠在24，32，40和48小时时分别愈合了66%

【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠角膜损伤修复过程中上皮细胞通透性的改变与紧密连接的重塑有关[J]. 汪枫,廖荣丰,左莉,周青,汪渊.  安徽医科大学学报. 2010(06)
[2]准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术对兔角膜基质细胞凋亡的影响[J]. 朱洁,廖荣丰,刘贺婷,王道斌,胡向阳.  安徽医科大学学报. 2009(01)



本文编号：3011020