6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶3对人脐静脉内皮细胞管腔形成的影响

发布时间：2021-03-07 01:43

　　背景:糖尿病性视网膜病变中关于新生血管的研究多局限于血管内皮生长因子,而6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶（phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase,PFKFB3）也有一定的作用。目的:探讨PFKFB3小干扰RNA（siRNA）对高糖环境下人脐静脉内皮细胞的作用及机制。方法:将人脐静脉内皮细胞分为4组:正常糖组（5.5mmol/L葡萄糖）、正常糖+PFKFB3-siRNA组、高糖组（30mmol/L葡萄糖）、高糖+PFKFB3-siRNA组。正常糖+PFKFB3-siRNA组和高糖+PFKFB3-siRNA组以PFKFB3-siRNA转染人脐静脉内皮细胞。采用Westernblot检测PFKFB3的沉默表达效果,并选取沉默效果最佳者进行后续实验。体外管腔形成实验检测细胞成管能力,实时荧光定量PCR检测PFKFB3的m RNA表达,Western blot检测PFKFB3及磷酸化AKT/AKT的蛋白表达。结果与结论:①PFKFB3-siRNA能明显抑制PFKFB3的蛋白表达（P <0.01）;②与正常糖组相比,正常... 

【文章来源】：中国组织工程研究. 2020,24(14)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

PFKFB3 siRNA对人脐静脉内皮细胞PFKFB3蛋白表达的影响(Western blot)

图2 PFKFB3 siRNA对人脐静脉内皮细胞PFKFB3蛋白表达的影响(Western blot)图4 PFKFB3 siRNA对高糖培养的人脐静脉内皮细胞中细胞管腔形成能力的影响

图3 PFKFB3 siRNA对高糖培养的人脐静脉内皮细胞中PFKFB3(A)和AKT(B)表达的影响内皮细胞拥有高度的无氧糖酵解活性，促新生血管因子可以明显上调内皮细胞中PFKFB3的表达[26]，而敲除内皮细胞中的PFKFB3可以明显减少无氧糖酵解，表明PFKFB3在内皮细胞中扮演着重要的作用，内皮细胞中的PFKFB3同时参与病理性血管生成[12]。作者通过观察PFKFB3-siRNA对高糖环境下人脐静脉内皮细胞管腔形成的影响，发现高糖环境下人脐静脉内皮细胞的PFKFB3蛋白及其mRNA表达均明显升高，这与作者所在课题组前期研究结果一致[15]，说明高糖可以刺激人脐静脉内皮细胞的PFKFB3增加。血管内皮细胞包括大血管内皮细胞和微血管内皮，在高糖环境下细胞功能存在一定的差异[27]，此次实验使用脐静脉血管内皮细胞不能完全说明PFKFB3在糖尿病性视网膜病变中的作用，作者将在后续的实验中将进一步采用微血管血管内皮细胞进行相关实验，以排除这一可能差异。

【参考文献】：
期刊论文
[1]玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子药物相关并发症概述[J]. 曾子善,翁文庆.  浙江中西医结合杂志. 2019(07)
[2]6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶（PFKFB3）抑制剂3PO对高糖环境下人脐静脉血管内皮细胞新生血管形成的影响[J]. 胡萍,韦芳,顾青,曹阳,田敏,吕红彬.  眼科新进展. 2019(05)
[3]糖尿病视网膜病变玻璃体切割术后继发新生血管性青光眼的原因分析[J]. 张勤,刘君,陈连英.  中国实用医刊. 2019 (05)
[4]PFKFB3、S1P2在2型糖尿病大鼠视网膜中的表达及tBHQ的干预作用[J]. 田敏,余曦,吕红彬.  眼科新进展. 2018(02)
[5]视网膜激光光凝与复合式小梁切除术治疗新生血管性青光眼的临床疗效对比[J]. 武海玲,马晓梅,才让当周,余莲桂,王发旺,王玲.  现代生物医学进展. 2017(17)

硕士论文
[1]PFKFB3在PDR患者玻璃体和血清中的表达及其相关性分析[D]. 唐敏.西南医科大学 2017



本文编号：3068181