非诺贝特对碘酸钠诱导的视网膜变性的保护作用

发布时间：2017-04-19 12:03

  本文关键词：非诺贝特对碘酸钠诱导的视网膜变性的保护作用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究非诺贝特在碘酸钠诱导的视网膜变性的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:(1)细胞实验:选取人视网膜色素上皮细胞稳定细胞系(ARPE-19),采用不同浓度碘酸钠刺激细胞,确定本实验碘酸钠刺激浓度。采取不同浓度非诺贝特预处理细胞2小时,使用确定浓度的碘酸钠处理细胞24小时后收集细胞,检测凋亡相关指标的变化。(2)动物实验:雄性C57BL/6小鼠尾静脉注射碘酸钠溶液(50mg/kg)诱导视网膜变性。对小鼠饲予含0.1%非诺贝特饲料预处理3天,经碘酸钠尾静脉注射3天后处死小鼠,取眼球组织检测视网膜细胞变性凋亡相关蛋白表达,Müller细胞反应性胶质化及炎症细胞变化。结果:(1)细胞实验:在ARPE-19细胞中,非诺贝特预处理组与单纯碘酸钠处理组相比,TUNEL阳性细胞数具有显著性差异(P0.01),蛋白印迹与免疫荧光结果显示,caspase3的表达显著降低,MTT结果显示非诺贝特显著提高细胞活性。(2)动物实验:碘酸钠(50mg/kg)静脉注射后,TUNEL染色发现视网膜细胞凋亡明显增加,呈时间依赖性,第三天达到细胞凋亡高峰。Muller细胞反应性胶质化与细胞凋亡结果相一致。非诺贝特干预组与单纯碘酸钠注射组比较,TUNEL阳性细胞数具有显著性差异(P0.01)。免疫荧光显示,非诺贝特处理组与碘酸钠注射组比较,活化的半胱天冬酶蛋白caspase3表达量显著降低,下调胶质纤维酸性蛋白GFAP表达量,炎症反应相关蛋白CD11b表达水平显著降低。结论:非诺贝特对碘酸钠诱导视网膜变性有保护性作用,作用机制可能与部分性抑制视网膜细胞凋亡通路的活化有关。非诺贝特可以减轻碘酸钠刺激引起的Müller细胞反应性胶质化及炎症反应。
【关键词】：非诺贝特 视网膜变性 凋亡 caspase3蛋白 炎症 Müller细胞 细胞 动物 实验
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R774.1
【目录】：

• 摘要3-4
• abstract4-8
• 中英文缩略词表8-9
• 前言9-12
• 第一部分 非诺贝特对碘酸钠诱导的人视网膜色素上皮细胞损伤的作用12-23
• 1.1 材料12-15
• 1.1.1 细胞系12
• 1.1.2 主要试剂材料12-13
• 1.1.3 主要仪器13
• 1.1.4 主要试剂配制13-15
• 1.2 方法15-18
• 1.2.1 细胞培养15
• 1.2.2 免疫荧光15-16
• 1.2.3 TUNEL检测16
• 1.2.4 蛋白印迹16-18
• 1.2.5 MTT检测细胞活性18
• 1.2.6 统计学分析18
• 1.3 结果18-21
• 1.3.1 碘酸钠诱导ARPE-19细胞凋亡18-19
• 1.3.2 不同浓度的非诺贝特减少碘酸钠诱导的细胞凋亡19-21
• 1.3.3 MTT检测非诺贝特对细胞活性的影响21
• 1.4 讨论21-23
• 第二部分非诺贝特对碘酸钠诱导小鼠视网膜变性的作用23-32
• 2.1 材料23-25
• 2.1.1 实验动物23
• 2.1.2 主要试剂材料23-24
• 2.1.3 主要仪器24
• 2.1.4 主要试剂配制24-25
• 2.2 方法25-26
• 2.2.1 实验动物模型建立及分组25
• 2.2.2 组织样本制备25-26
• 2.2.3 冰冻切片26
• 2.2.4 免疫荧光（组织切片）26
• 2.2.5TUNEL检测（组织切片）26
• 2.3 结果26-30
• 2.3.1 碘酸钠诱导视网膜细胞损伤时间曲线研究26-28
• 2.3.2 非诺贝特抑制视网膜细胞凋亡情况28-29
• 2.3.3 非诺贝特对视网膜Müller细胞反应性胶质化影响29
• 2.3.4 非诺贝特对视网膜细胞损伤炎症反应的影响29-30
• 2.4 讨论30-32
• 结论32-33
• 致谢33-34
• 参考文献34-40
• 综述40-46
• 参考文献44-46

【参考文献】

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1 沈轶;庄沛;林宝琴;张婉玉;George C Y Chiou;;Tetramethylpyrazine在视网膜色素上皮细胞变性及脉络膜血流和RPE细胞氧化应激中的作用(英文)[J];国际眼科杂志;2010年10期

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本文编号：316214