siRNA沉默S100A8与S100A9基因对鼻咽癌细胞CNE1迁移功能的影响

发布时间：2021-05-10 10:42

　　本论文包括两个部分：（一）siRNA对鼻咽癌细胞CNE1中S100A8、S100A9基因表达的影响及有效片段的筛选；（二）S100A8 siRNA与S100A9siRNA对鼻咽癌细胞CNE1迁移功能的影响。第一部分：siRNA对鼻咽癌细胞CNEl中S100A8、S100A9基因表达的影响及有效片段的筛选目的：通过将S100A8 siRNA、S100A9 siR NA分别转染鼻咽癌细胞CNE1后,观察S100A8、S100A9基因的表达水平变化以分别筛选有效片段。方法：1.分别合成三对S100A8 siRNA、S100A9 siRNA,分别标记为：S100A8-Homo-286, S100A8-Homo-324, S100A8-Homo-374； S100A9-Homo-61, S100A9-Homo-100, S100A9-Homo-267,利用脂质体Lipofectamine 2000瞬时转染鼻咽癌细胞CNE1。采用标记有荧光的阴性对照FAM-siRNA在荧光显微镜下检测转染效率；2.转染24 h后,通过荧光定量PCR分别检测S100A8、S100A9的相对表达水平,分别筛选出干扰效... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 siRNA对鼻咽癌细胞CNE1中S100A8、S100A9基因表达的影响及有效片段的筛选
    1 实验材料
        1.1 细胞系
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
    2 实验方法
        2.1 细胞的培养
        2.2 siRNA干扰片段的设计与合成
        2.3 实验设计
        2.4 鼻咽癌细胞的转染及转染条件的优化
        2.5 检测siRNA对鼻咽癌细胞CNE1中S100A8、S100A9基因表达的影响
        2.6 统计学处理
    3 实验结果
        3.1 鼻咽癌细胞siRNA的转染及转染条件的优化
        3.2 S100A8、S100A9基因的相对表达情况
    4 讨论
    5 小结
第二部分 S100A8 siRNA与S100A9 siRNA对鼻咽癌细胞CNE1迁移功能的影响
    1 实验材料
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器
    2 实验方法
        2.1 实验设计
        2.2 划痕愈合实验检测细胞迁移功能
        2.3 荧光定量PCR法检测MMP7基因的表达情况
    3 结果
        3.1 S100A8 siRNA与S100A9 siRNA对细胞迁移功能的作用
        3.2 S100A8 siRNA与S100A9 siRNA对MMP7表达的影响
    4 讨论
    5 小结
全文总结
参考文献
第三部分 课题综述S100A8与S100A9蛋白在恶性肿瘤中的作用
    参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白浓度测定及临床意义[J]. 韩冉冉,黄元姣,陈铃,肖晓兰,易翔,蔡红武,吴勇浒.  临床检验杂志. 2014(04)
[2]鼻咽癌伴区域淋巴结转移的转移规律及治疗现状[J]. 马岩,孙磊,王立莹,于雷,邱玲,贾晓晶.  现代肿瘤医学. 2013(09)
[3]鼻咽癌转移相关分子标志物的研究进展[J]. 邓彦君,朱建思,张志伟,唐微,卢小敏.  现代生物医学进展. 2013(08)
[4]Loss of myeloid-related proteins 8 and myeloid-related proteins 14 expression in human esophageal squamous cell carcinoma correlates with poor differentiation[J]. Jian-Ping Kong Fang Ding Chuan-Nong Zhou Xiu-Qin Wang Xiao-Ping Miao Min Wu Zhi-Hua Liu National Laboratory of Molecular Oncology,Cancer Institute,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100021,ChinaDepartment of Etiology and Carcinogenesis,Cancer Institute,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100021,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(08)



本文编号：3179226