人脐带间充质干细胞来源外泌体对高糖损伤作用下人视网膜色素上皮细胞ICAM-1及VEGF表达影响的研究

发布时间：2021-06-23 11:42

　　目的:观察人脐带间充质干细胞（human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCMSCs）来源的外泌体对高糖作用下的视网膜色素上皮细胞（retina pigment epithelial,RPE）的细胞间粘附分子-1（Intercellular adhesion molecule,ICAM-1）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响。方法:1.hUCMSCs来源的外泌体的提取和鉴定。应用低温梯度超速离心法分离hUCMSCs培养液,获得上清液中的外泌体,通过应用蛋白免疫印记法（Western blot,WB）来检测泌体表面蛋白CD63、hUCMSCs表面蛋白CD90的表达以鉴定外泌体来源。2.ARPE-19细胞高糖损伤模型的建立。取生长良好的ARPE-19细胞,以不同浓度葡萄糖培养,随机分为五组,1组对照组:5.5 mmol/L,2组:20.0mmol/L;3组:35.0 mmol/L:4组:50.0mmol/L;5组高渗组:5.5mmol/L+甘露醇24.4m... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

电镜下观察到hUCMSCs外泌体透射电镜下可见：hUCMSCs来源外泌体为直径在30～100nm之间圆形或椭圆形具有明显膜结构的小囊泡，囊泡腔内可见低电子密度成分

体的形态学观察透射电镜下可见hUCMSCs来源外泌体有明显膜结构的小囊泡，囊泡腔内可UCMSCs 外泌体 透射电镜下可见：hUCM椭圆形具有明显膜结构的小囊泡，囊泡腔内t 检测 hUCMSCs 外泌体的表面特异性蛋 Western-blot 检测 hUCMSCs 外泌体SCs 特异性表面蛋白 CD90（图 1.4），SCs 来源。

糖浓度培养下的 ARPE-19 细胞形态组：葡萄糖浓度 5.5 mmol／L； B:2 组：葡萄糖浓度：2：35.0 mmol／L：D:4 组：葡萄糖浓度：50.0mmol／L；.5mmol／L+甘露醇 24.4mmol／L。测不同浓度葡萄糖下 ARPE-19 细胞增殖能力葡萄糖对 ARPE-19 细胞增殖率的影响。1 组对照着葡萄糖浓度的增加，各组增值率均有下降。5 增殖率差异无统计学意义。表 2.1 不同浓度葡萄糖对 ARPE-19 细胞增殖的影响较，P<0.05，差异具有统计学意义照组 2 组 3 组 4 组 1.68 13.7±1.43* 11.8±1.54* 6.9±0

【参考文献】：
期刊论文
[1]Mesenchymal stem cells-derived exosomes ameliorate blue light stimulation in retinal pigment epithelium cells and retinal laser injury by VEGF-dependent mechanism[J]. Guang-Hui He,Wei Zhang,Ying-Xue Ma,Jing Yang,Li Chen,Jian Song,Song Chen.  International Journal of Ophthalmology. 2018(04)
[2]间充质干细胞对糖尿病视网膜病变炎症反应调节作用的研究进展[J]. 张惟,陈松.  中华眼底病杂志. 2016 (02)
[3]Mesenchymal stem cells: Emerging mechanisms of immunomodulation and therapy[J]. Justin D Glenn,Katharine A Whartenby.  World Journal of Stem Cells. 2014(05)
[4]糖尿病鼠视网膜细胞间黏附分子-1的表达与血视网膜屏障破坏的关系及曲安奈德的治疗作用[J]. 王树林,金学民.  中华眼底病杂志. 2006(01)



本文编号：3244872