骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对大鼠青光眼模型视神经的保护作用

发布时间：2021-06-28 07:01

　　目的:探讨骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对大鼠青光眼模型的神经保护作用。方法:提取大鼠原代骨髓间充质干细胞并进行鉴定;Lewis大鼠分别随机分为3组:对照组、青光眼模型组和骨髓间充质干细胞组,并制作青光眼大鼠模型:左眼为实验眼（青光眼）,右眼为对照眼,并进行鉴定;然后进行骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植;HE染色观察视网膜组织形态;免疫荧光法检测视网膜神经节细胞数量;TUNEL染色观察视网膜神经节细胞凋亡情况;Western blot检测视网膜组织中IGF1和BDNF蛋白表达情况。结果:大鼠实验眼的眼内压均明显高于对照眼（P<0.01）,表明青光眼大鼠模型均建造成功;青光眼模型组大鼠视网膜神经纤维排列不整齐,视网膜神经节细胞数量和视网膜厚度显著低于对照组（P<0.01）,视网膜神经节细胞凋亡数量显著高于对照组（P<0.001）;骨髓间充质干细胞组大鼠视网膜神经纤维细胞排列较整齐,视网膜神经节细胞数量和视网膜厚度明显高于青光眼模型组（P<0.05）,视网膜神经节细胞凋亡数量明显低于青光眼模型组（P<0.05）;青光眼模型组大鼠视网膜中IGF1和BDNF蛋白表达量明... 

【文章来源】：国际眼科杂志. 2020,20(11)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

Western blot检测各组大鼠视网膜中IGF1和BDNF蛋白变化

视网膜组织经固定、OCT包埋,并制作成6μm厚的冰冻切片。切片滴加蛋白酶K工作液(20μg/mL),37℃温育10～30min,PBS清洗3次。接着切片在4%的多聚甲醛溶液中室温固定5min,PBS清洗3次。然后切片上滴加DNse I反应液,37℃温育30min,PBS清洗3次。用吸水纸小心吸去样本区域周围的多余液体,滴加TdT酶反应液于样本区域上,于37℃湿盒中孵育60min(避光),PBS清洗3次。用吸水纸小心吸去样本周围的液体,每个样本上滴加Streptavidin-Fluorescein标记液,放入温盒中,37℃反应30min(避光),PBS清洗3次。最后DAPI染色液复染细胞核,室温避光反应10min,PBS洗涤,加适量封片剂,荧光显微镜观察并拍照。图2 骨髓间充质干细胞的体外分化

骨髓间充质干细胞的体外分化

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3253855