α-MSH经lncRNA TSIX/NCOA5拮抗Ⅱ型糖尿病视网膜损伤的机制研究
发布时间：2021-07-26 20:00
目的本实验通过体内及体外模型共同探究α-黑素细胞刺激素（α-MSH）对Ⅱ型糖尿病所导致的视网膜血管渗漏、血-视网膜屏障（BRB）破坏的拮抗作用及其分子机制。方法将8周龄II型糖尿病模型小鼠（BKS db/db）随机分为糖尿病组（db/db）,糖尿病+α-MSH组（db/db+α-MSH）;同时以野生型小鼠（BKS+/+）作为正常对照组,每组10只动物。连续4周监测各组小鼠的代谢指标。在小鼠10、12周龄时,db/db+α-MSH组小鼠经右眼玻璃体腔注射α-MSH（1?l,3.3?g/?l）,db/db组及野生型BKS+/+小鼠组注射等体积的无菌生理盐水。3周后,各组小鼠进行视网膜电图（ERG）检测、苏木精-伊红（H&E）染色、视网膜血管外白蛋白染色、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色、二氢溴化乙锭（DHE）染色及末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）染色,检测α-MSH对II型糖尿病视网膜损伤的拮抗作用。体外实验中,将经高糖高脂联合刺激的恒河猴视网膜血管内皮细胞（RF/6A）进行CM-H2DCFDA染色,检测0.1μM、0.5μM、1μ...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
II型糖尿病db/db小鼠的各项生理指标在实验期间，db/db小鼠与相同遗传背景的正常对照BKS+/+小鼠相比，体重（A）、进食量（B）和饮水量（C）均显著增加
12图 2 小鼠在 0.01 cd*s/m2、30.0 cd*s/m2闪光刺激下的视网膜电生理分析暗适应下光强刺激为 0.01 cd*s/m2时，玻璃体腔注射 α-MSH 显著缩短了 db/d小鼠 a 波（A）及 b（C）波的潜时，对 a 波振幅无显著影响（B），显著提高 波振幅（D）。当闪光刺激为 30.0 cd*s/m2时，玻璃体腔注射 α-MSH 显著提高波振幅（E），对 b 波振幅无显著影响（F）。* P < 0.05, ** P < 0.01
图 3 玻璃体腔注射 α-MSH 可显著改善 db/db 小鼠视网膜形态在 10 和 12 周龄时，db/db 小鼠经玻璃体腔注射 α-MSH，并以同龄 BKS+/+小鼠作为正常对照组。各组小鼠 15 周龄时，眼球行石蜡切片 H&E 染色后，（A-C）分别为正常对照组、db/db 小鼠、经 α-MSH 干预的 db/db 小鼠的视网膜代表性图片。（D）为视网膜各核层厚度的定量分析。可见 db/db 小鼠视网膜整体、光感受器外层、外丛状层、内核层及内丛状层的厚度与正常对照组相比显著降低，α-MSH 的干预使其恢复正常厚度。标尺代表 20 μm。光感受器外层（OS），外核层（ONL），外丛状层（OPL），内核层（INL），内丛状层（IPL），视网膜神经节细胞层（RGC），全层厚度（total layer，TL）。* P < 0.05, ** P < 0.011.3.4 α-MSH 正常化视网膜血管渗漏血管渗漏是糖尿病视网膜病变的重要病理特征，可导致视网膜水肿、视网膜脱离等，影响视力甚至致盲[48]。本实验取各组 15 周龄小鼠视网膜冰冻切片后经 Isolectin B4 和抗白蛋白抗体免疫荧光双染，以分别定位视网膜血管结构及观察视网膜血管外的白蛋白渗漏程度。结果显示，db/db 小鼠生理盐水注射组的视
【参考文献】：
期刊论文
[1]A hypothesis for treating inflammation and oxidative stress with hydrogen sulfide during age-related macular degeneration[J]. Akash K George,Mahavir Singh,Rubens Petit Homme,Avisek Majumder,Harpal S SANDhu,Suresh C Tyagi. International Journal of Ophthalmology. 2018(05)
[2]α-黑素细胞刺激素抑制氧诱导视网膜病变小鼠视网膜新生血管的生成[J]. 杨千惠,张琰,薄其玉,曹云山,杨伟,王飞,李筱荣. 中华实验眼科杂志. 2016 (12)
[3]α-黑素细胞刺激素对早期糖尿病大鼠视网膜血管渗漏的保护作用[J]. 韩倩,张琰,薄其玉,茹玉莎,杨伟,李筱荣. 中华实验眼科杂志. 2015 (04)
[4]视网膜Müller细胞在视网膜病变中的作用和研究现状[J]. 苟琳. 眼科研究. 2003(02)
本文编号：3304265
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
II型糖尿病db/db小鼠的各项生理指标在实验期间，db/db小鼠与相同遗传背景的正常对照BKS+/+小鼠相比，体重（A）、进食量（B）和饮水量（C）均显著增加
12图 2 小鼠在 0.01 cd*s/m2、30.0 cd*s/m2闪光刺激下的视网膜电生理分析暗适应下光强刺激为 0.01 cd*s/m2时，玻璃体腔注射 α-MSH 显著缩短了 db/d小鼠 a 波（A）及 b（C）波的潜时，对 a 波振幅无显著影响（B），显著提高 波振幅（D）。当闪光刺激为 30.0 cd*s/m2时，玻璃体腔注射 α-MSH 显著提高波振幅（E），对 b 波振幅无显著影响（F）。* P < 0.05, ** P < 0.01
图 3 玻璃体腔注射 α-MSH 可显著改善 db/db 小鼠视网膜形态在 10 和 12 周龄时，db/db 小鼠经玻璃体腔注射 α-MSH，并以同龄 BKS+/+小鼠作为正常对照组。各组小鼠 15 周龄时，眼球行石蜡切片 H&E 染色后，（A-C）分别为正常对照组、db/db 小鼠、经 α-MSH 干预的 db/db 小鼠的视网膜代表性图片。（D）为视网膜各核层厚度的定量分析。可见 db/db 小鼠视网膜整体、光感受器外层、外丛状层、内核层及内丛状层的厚度与正常对照组相比显著降低，α-MSH 的干预使其恢复正常厚度。标尺代表 20 μm。光感受器外层（OS），外核层（ONL），外丛状层（OPL），内核层（INL），内丛状层（IPL），视网膜神经节细胞层（RGC），全层厚度（total layer，TL）。* P < 0.05, ** P < 0.011.3.4 α-MSH 正常化视网膜血管渗漏血管渗漏是糖尿病视网膜病变的重要病理特征，可导致视网膜水肿、视网膜脱离等，影响视力甚至致盲[48]。本实验取各组 15 周龄小鼠视网膜冰冻切片后经 Isolectin B4 和抗白蛋白抗体免疫荧光双染，以分别定位视网膜血管结构及观察视网膜血管外的白蛋白渗漏程度。结果显示，db/db 小鼠生理盐水注射组的视
【参考文献】：
期刊论文
[1]A hypothesis for treating inflammation and oxidative stress with hydrogen sulfide during age-related macular degeneration[J]. Akash K George,Mahavir Singh,Rubens Petit Homme,Avisek Majumder,Harpal S SANDhu,Suresh C Tyagi. International Journal of Ophthalmology. 2018(05)
[2]α-黑素细胞刺激素抑制氧诱导视网膜病变小鼠视网膜新生血管的生成[J]. 杨千惠,张琰,薄其玉,曹云山,杨伟,王飞,李筱荣. 中华实验眼科杂志. 2016 (12)
[3]α-黑素细胞刺激素对早期糖尿病大鼠视网膜血管渗漏的保护作用[J]. 韩倩,张琰,薄其玉,茹玉莎,杨伟,李筱荣. 中华实验眼科杂志. 2015 (04)
[4]视网膜Müller细胞在视网膜病变中的作用和研究现状[J]. 苟琳. 眼科研究. 2003(02)
本文编号：3304265
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/wuguanyixuelunwen/3304265.html
最近更新
教材专著
