三嵌段聚合物搭载藻蓝蛋白对人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用

发布时间：2021-09-19 12:51

　　【目的】观察三嵌段聚合物搭载藻蓝蛋白PPP-PC对2,2-偶氮（2-甲基丙基咪）二盐酸盐（AAPH）诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤后细胞形态及活力的影响,探索三嵌段聚合物搭载藻蓝蛋白对人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用并初步探讨其机制。【方法】构建并纯化三嵌段聚合物搭载藻蓝蛋白,并建立AAPH诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤模型;实验分为正常对照组、AAPH损伤组、PPP-PC+AAPH处理组,分别进行相应处理后,通过荧光倒置显微镜观察各组细胞形态及活力;应用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测各组细胞凋亡比例;蛋白免疫印迹法检测各组细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3凋亡相关蛋白的表达水平。【结果】荧光显微镜下显示PPP-PC+AAPH处理组细胞形态与正常对照组细胞相似,细胞活力较AAPH损伤组有所提高;PPP-PC+AAPH处理组凋亡细胞比例为11.70%（10.63%,12.17%）,比AAPH损伤组细胞凋亡比例32.35%（30.17%,33.42%）明显下降（P <0.05）;与AAPH损伤组相比,PPP-PC+AAPH处理组Bcl-2表达增加而Ba... 

【文章来源】：中山大学学报(医学科学版). 2020,41(03)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

PPP-PC减轻SRA01/04细胞氧化损伤后细胞活性及形态改变

MTT法检测各组SRA01/04细胞氧化损伤后存活率，结果显示，0.625和1.25μg/mL的PPP-PC对SRA01/04细胞存活率与阴性对照组相比无统计学意义（P>0.05；表2);PPP-PC浓度为2.5和5μg/mL时SRA01/04细胞存活率明显提高（P<0.05；表2）；而2.5与5μg/mL两组间的细胞存活率无明显统计学意义（P>0.05；表2）。因此，本实验选取的PPP-PC最佳作用浓度为2.5μg/mL。2.4 PPP-PC减轻AAPH对SRA01/04细胞氧化损伤后形态及活性改变

流式细胞仪检测Annexin V-FITC/PI荧光染色，分析结果显示，AAPH损伤组凋亡细胞比例为32.35%(30.17%～33.42%），与空白对照组3.58%(2.90%～3.81%）相比明显增高，组间差异有统计学意义（P<0.05；图3）。而PPP-PC+AAPH处理组细胞凋亡比例降至11.70%(10.63%～12.17%），与AAPH损伤组相比明显降低，组间差异有统计学意义（P<0.05；图3）。所以，PPP-PC可显著抑制AAPH所诱导的SRA01/04细胞凋亡。2.6 PPP-PC影响AAPH诱导SRA01/04细胞损氧化伤后凋亡相关蛋白表达


本文编号：3401647