bFGF及TGF-β1对鼻-鼻窦炎伴鼻息肉黏膜中成纤维细胞生长的调控作用

发布时间：2017-05-04 12:15

  本文关键词：bFGF及TGF-β1对鼻-鼻窦炎伴鼻息肉黏膜中成纤维细胞生长的调控作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本课题拟观察体外碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)及转化生长因子β1(transforming growth factor betel,TGF-β1)单独及联合应用对人鼻息肉成纤维细胞(human nasal polyps fibroblasts,NPFs)增殖及III型胶原合成的影响。方法:采用组织块原代细胞培养技术,将取自慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者的鼻息肉摘除标本作为来源进行人鼻息肉成纤维细胞的体外培养,使用免疫组化技术鉴定培养细胞的来源。将不同浓度的b FGF(l00ngml,50ng/ml,l0ng/ml,lng/ml四个浓度)、TGF-β1(l00ngml,50ng/ml,l0ng/ml,lng/ml四个浓度)分别作用于体外培养的NPFs,并将浓度均为l0ng/ml的b FGF及TGF-β1联合作用于体外培养的NPFs,于第24、72、120小时采用比色法检测活性细胞增殖情况(四唑化合物([3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt;MTS(a)])比色法),并收集上清液采用ELISA法测定细胞培养上清液中III型胶原的含量。结果:(1)组织块贴壁3天可见细胞向周围伸出,12天左右爬满,免疫组化鉴定波形蛋白表达阳性,细胞培养稳定。(2)24小时后实验组各浓度组的细胞形态和细胞增殖的情况与对照组相比变化不明显,统计学无显著性差异(P0.05)。在72小时及120小时时,TGF-β1在1~100 ng/ml范围内随浓度增加对NPFs细胞的抑制作用明显增强,具有显著的统计学意义(P0.01);b FGF在1~100 ng/ml浓度范围内表现为明显的促进NPF细胞增殖作用,具有明显的统计学意义(P0.05);浓度为10 ng/ml的TGF-β1和10ng/ml的b FGF联合作用于人NPF,产生较明显的拮抗作用,与单独作用时比较,具有显著性统计学差异(P0.05)。(3)当b FGF、TGF-β1单独及联合左右,诱导NPFs增殖发生变化时,NPFs分泌的III型胶原的含量产生明显的浓度差异,差异有统计学意义(P0.05)。结论:TGF-β1具有抑制人鼻息肉成纤维细胞增殖及III型胶原的分泌的作用,b FGF具有促进人鼻息肉成纤维细胞增殖及III型胶原的分泌作用,两者联合应用对鼻息肉成纤维细胞增殖具有拮抗作用,可能在鼻息肉的发生,鼻-鼻窦炎组织重塑中发挥重要作用。
【关键词】：慢性鼻鼻-窦炎 成纤维细胞 碱性成纤维细胞生长因子 转化生长因子β1
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R765.41;R765.25
【目录】：

• 缩略语表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-20
• 1. 材料12-13
• 1.1 研究对象12
• 1.2 主要仪器设备与材料12
• 1.3 主要实验试剂12-13
• 2. 方法13-19
• 2.1 NPF原代细胞培养13
• 2.2 NPF细胞传代培养13-14
• 2.3 细胞冻存与复苏14-15
• 2.4 NPF细胞鉴定15-16
• 2.5 实验组对NPF细胞增殖的影响16-17
• 2.6 联合使用时影响NPF细胞的时间剂量效应17-18
• 2.7 ELISA检测细胞培养上清液中Ⅲ型胶原含量18-19
• 3．统计学处理19-20
• 结果20-24
• 1. 鼻息肉成纤维细胞鉴定20-21
• 2. 实验组对NPF细胞增殖的影响21-22
• 3. 联合使用时影响NPF细胞的时间剂量效应22-23
• 4. ELISA检测细胞培养上清液Ⅲ型胶原含量23-24
• 讨论24-26
• 小结26-27
• 参考文献27-29
• 综述29-39
• 参考文献35-39
• 致谢39

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本文编号：345064