miR-124-3p靶向调控KLF6基因表达对H 2 O 2 诱导的人晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响
发布时间：2021-11-11 18:40
目的探讨微小RNA-124-3p（miR-124-3p）对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞增殖及凋亡的影响及其靶向调控Krüppel样因子6（Krüppel like factor 6,KLF6）的机制。方法按HLE-B3细胞处理方式的不同,将其分为HLE-B3组、HLE-B3+H2O2组、HLE-B3+H2O2+miR-NC组、HLE-B3+H2O2+miR-124-3p组、HLE-B3+H2O2+si-NC组、HLE-B3+H2O2+si-KLF6组、miR-124-3p+pcDNA3.1组、miR-124-3p+pcDNA3.1-KLF6组。利用MTT实验检测各组HLE-B3细胞增殖活性,流式细胞仪检测各组HLE-B3细胞凋亡。双荧光素酶报告基因实验验证miR-124-3p与KLF6的靶向关系。Western blot检测...
【文章来源】：眼科新进展. 2020,40(02)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
过表达miR-124-3p对H2O2诱导的细胞HLE-B3凋亡蛋白表达的影响
si-KLF6转染至HLE-B3细胞后用H2O2诱导处理结果显示,HLE-B3+H2O2+si-KLF6组HLE-B3细胞中KLF6蛋白表达水平较HLE-B3+H2O2+si-NC组显著降低(P<0.05),细胞增殖活性显著增强(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(均为P<0.05),P21、Bax蛋白表达水平均显著降低(均为P<0.05),见图2、表6、表7。表6 抑制KLF6的表达对H2O2诱导的细胞HLE-B3增殖、凋亡的影响 ( x ˉ ±s,n=30) 组别 A值 12 h 24 h 36 h HLE-B3组 1.57±0.15 1.02±0.10 0.77±0.07 HLE-B3+H2O2组 0.86±0.08a 0.45±0.04a 0.23±0.02a HLE-B3+H2O2+si-NC组 0.88±0.08 0.46±0.04 0.24±0.02 HLE-B3+H2O2+si-KLF6组 1.19±0.10b 0.70±0.07b 0.41±0.04b 注:与HLE-B3组比较,aP<0.05;与HLE-B3+H2O2+si-NC组比较,bP<0.05
表7 抑制KLF6的表达对H2O2诱导的细胞HLE-B3增殖、凋亡蛋白的表达及细胞凋亡率的影响 ( x ˉ ±s,n=30) 组别 KLF6蛋白 Cyclin D1蛋白 P21蛋白 Bax蛋白 Bcl-2蛋白 细胞凋亡率/% HLE-B3 0.15±0.01 0.97±0.09 0.16±0.01 0.24±0.02 0.87±0.09 7.36±0.74 HLE-B3+H2O2 0.66±0.06a 0.40±0.04a 0.81±0.08a 0.84±0.08a 0.27±0.03a 19.17±1.30a HLE-B3+H2O2+si-NC 0.64±0.06 0.39±0.04 0.79±0.07 0.86±0.08 0.29±0.03 19.29±1.33 HLE-B3+H2O2+si-KLF6 0.29±0.02a 0.74±0.07b 0.33±0.03b 0.51±0.05b 0.60±0.06b 11.46±1.02b 注:与HLE-B3组比较,aP<0.05;与HLE-B3+H H2O2+HLE-B3+H2O2+miR-NC组比较,bP<0.05表8 过表达KLF6环境下miR-124-3p对H2O2诱导的细胞HLE-B3增殖的影响 ( x ˉ ±s,n=36) 组别 细胞活性(A值) 12 h 24 h 36 h miR-NC组 0.88±0.08 0.46±0.04 0.24±0.03 miR-124-3p组 1.28±0.11a 0.75±0.07a 0.44±0.04a miR-124-3p+pcDNA3.1组 1.26±0.12 0.78±0.07 0.45±0.04 miR-124-3p+pcDNA3.1-KLF6组 1.10±0.11b 0.60±0.05b 0.35±0.03b 注:与miR-NC组比较,aP<0.05;与miR-124-3p+pcDNA3.1组比较,bP<0.05
【参考文献】：
期刊论文
[1]Krüppel样因子6经活化转录因子4通路对晶状体上皮细胞凋亡的调控作用[J]. 田芳,赵今稚,滕贺,黄亮瑜,刘勋,苏睿虹,高美子,张晓敏,李筱荣,东莉洁,张红. 中华实验眼科杂志. 2018 (03)
[2]枸杞多糖对H2O2诱导人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的保护作用[J]. 俞茜,季青山,孙思勤. 眼科新进展. 2016(06)
[3]MicroRNA在氧化应激诱导晶状体上皮细胞凋亡中作用的初步研究[J]. 柏凌,李鹏,陈凌,何玲,王峰. 国际眼科杂志. 2014(10)
[4]外源性细胞周期蛋白激酶抑制因子p21基因对人晶状体上皮细胞周期的影响[J]. 吴明星,李绍珍,曾骏文,刘奕志. 中华眼科杂志. 2003(04)
本文编号：3489326
【文章来源】：眼科新进展. 2020,40(02)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
过表达miR-124-3p对H2O2诱导的细胞HLE-B3凋亡蛋白表达的影响
si-KLF6转染至HLE-B3细胞后用H2O2诱导处理结果显示,HLE-B3+H2O2+si-KLF6组HLE-B3细胞中KLF6蛋白表达水平较HLE-B3+H2O2+si-NC组显著降低(P<0.05),细胞增殖活性显著增强(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(均为P<0.05),P21、Bax蛋白表达水平均显著降低(均为P<0.05),见图2、表6、表7。表6 抑制KLF6的表达对H2O2诱导的细胞HLE-B3增殖、凋亡的影响 ( x ˉ ±s,n=30) 组别 A值 12 h 24 h 36 h HLE-B3组 1.57±0.15 1.02±0.10 0.77±0.07 HLE-B3+H2O2组 0.86±0.08a 0.45±0.04a 0.23±0.02a HLE-B3+H2O2+si-NC组 0.88±0.08 0.46±0.04 0.24±0.02 HLE-B3+H2O2+si-KLF6组 1.19±0.10b 0.70±0.07b 0.41±0.04b 注:与HLE-B3组比较,aP<0.05;与HLE-B3+H2O2+si-NC组比较,bP<0.05
表7 抑制KLF6的表达对H2O2诱导的细胞HLE-B3增殖、凋亡蛋白的表达及细胞凋亡率的影响 ( x ˉ ±s,n=30) 组别 KLF6蛋白 Cyclin D1蛋白 P21蛋白 Bax蛋白 Bcl-2蛋白 细胞凋亡率/% HLE-B3 0.15±0.01 0.97±0.09 0.16±0.01 0.24±0.02 0.87±0.09 7.36±0.74 HLE-B3+H2O2 0.66±0.06a 0.40±0.04a 0.81±0.08a 0.84±0.08a 0.27±0.03a 19.17±1.30a HLE-B3+H2O2+si-NC 0.64±0.06 0.39±0.04 0.79±0.07 0.86±0.08 0.29±0.03 19.29±1.33 HLE-B3+H2O2+si-KLF6 0.29±0.02a 0.74±0.07b 0.33±0.03b 0.51±0.05b 0.60±0.06b 11.46±1.02b 注:与HLE-B3组比较,aP<0.05;与HLE-B3+H H2O2+HLE-B3+H2O2+miR-NC组比较,bP<0.05表8 过表达KLF6环境下miR-124-3p对H2O2诱导的细胞HLE-B3增殖的影响 ( x ˉ ±s,n=36) 组别 细胞活性(A值) 12 h 24 h 36 h miR-NC组 0.88±0.08 0.46±0.04 0.24±0.03 miR-124-3p组 1.28±0.11a 0.75±0.07a 0.44±0.04a miR-124-3p+pcDNA3.1组 1.26±0.12 0.78±0.07 0.45±0.04 miR-124-3p+pcDNA3.1-KLF6组 1.10±0.11b 0.60±0.05b 0.35±0.03b 注:与miR-NC组比较,aP<0.05;与miR-124-3p+pcDNA3.1组比较,bP<0.05
【参考文献】：
期刊论文
[1]Krüppel样因子6经活化转录因子4通路对晶状体上皮细胞凋亡的调控作用[J]. 田芳,赵今稚,滕贺,黄亮瑜,刘勋,苏睿虹,高美子,张晓敏,李筱荣,东莉洁,张红. 中华实验眼科杂志. 2018 (03)
[2]枸杞多糖对H2O2诱导人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的保护作用[J]. 俞茜,季青山,孙思勤. 眼科新进展. 2016(06)
[3]MicroRNA在氧化应激诱导晶状体上皮细胞凋亡中作用的初步研究[J]. 柏凌,李鹏,陈凌,何玲,王峰. 国际眼科杂志. 2014(10)
[4]外源性细胞周期蛋白激酶抑制因子p21基因对人晶状体上皮细胞周期的影响[J]. 吴明星,李绍珍,曾骏文,刘奕志. 中华眼科杂志. 2003(04)
本文编号：3489326
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