白藜芦醇对碘酸钠诱导后人视网膜色素上皮细胞凋亡的抑制作用

发布时间：2021-11-21 02:00

　　目的研究白藜芦醇（resveratrol,RES）对碘酸钠诱导的人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial,RPE）细胞凋亡的抑制作用及机制,探索该药是否可用于干性年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration,AMD）的治疗。方法通过碘酸钠诱导的RPE细胞模拟干性AMD。RPE细胞传代培养分为空白对照组、碘酸钠损伤组、RES+碘酸钠损伤组,并观察各组细胞形态。MTT法检测RES对RPE细胞最佳保护作用的浓度以及最佳浓度下对不同浓度碘酸钠损伤的RPE细胞的保护作用。Western blot检测各组细胞的凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达情况。Hosste33342及流式细胞术检测各组细胞的凋亡总量变化以及凋亡种类之间的差别。结果 5μmol·L^-1 RES对RPE细胞有较强的保护作用且此浓度下对不同损伤程度的RPE细胞都有较强的保护作用。RES+碘酸钠损伤组Bax蛋白的相对表达量（0.45±0.07）明显低于碘酸钠损伤组（0.90±0.09）,差异有统计学意义（P<0.05）,与空白对照组（0.... 

【文章来源】：眼科新进展. 2019,39(06)北大核心

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【部分图文】：

光学显微镜下检测培养24h后的ＲPE细胞状态

嬲??仕笮危?鲋衬芰η?ＲES+NaIO3组细胞形态良好、长势均匀、细胞略有形变、生长速度尚可、细胞间偶见细胞碎片;NaIO3组有大量细胞死亡，细胞量少，形态欠佳、分布呈团簇状，细胞透光度增加。图1光学显微镜下检测培养24h后的ＲPE细胞状态。A:Control组;B:ＲES+NaIO3组;C:NaIO3组。比例尺:100μm2．2MTT检测最佳药物浓度MTT检测结果经单因素方差分析发现，在ＲES浓度为5μmol·L－1时细胞生存率最高，且与其他浓度下细胞生存率差异均有统计学意义(均为P＜0．05，见图2)，此时药物对细胞无不良影响、没有明显的细胞毒性，可以排除药物的不良干扰因素。通过ＲES对各组细胞不同程度损伤的保护效果分析发现，无论是轻度损伤还是重度损伤，ＲES对PＲE细胞皆有很强的保护作用，且对中度损伤效果最佳。ＲES+NaIO3组细胞生存率均明显优于NaIO3各浓度组，差异均有统计学意义(均为P＜0．05)。2．3Westernblot检测结果Westernblot法检测各组相关蛋白的表达情况，结果见图3。NaIO3组较图2ＲES浓度为5μmol·L－1时，各NaIO3组ＲPE细胞的生存率Control组凋亡蛋白Bax的表达量显著上升(P＜0.05)，Bcl-2的表达量显著下降(P＜0．05)，细胞损伤严重。ＲES+NaIO3组相关蛋白表达量与Control组差异无统计学意义(P＞0.05)，与NaIO3组有明显差别，其中ＲES+NaIO3组Bax蛋白的表达量明显低于NaIO3组，Bcl-2蛋白的表达量较NaIO3组明显下降。且两组蛋白之间表达差异均有统计学意义(均为P＜0．05)。图3Westernblot法检测各组Bax(A)和Bcl-2蛋白(B)的表达量以及各组灰度值的比

Westernblot法检测各组Bax(A)

【参考文献】：
期刊论文
[1]白藜芦醇在年龄相关性眼病中的研究进展[J]. 李晔,李丽萍,赖玉清,张旭.  国际眼科杂志. 2017(11)
[2]干性年龄相关性黄斑变性的发病机制研究进展[J]. 张古沐阳,陈有信.  中华眼科杂志. 2014 (06)
[3]热量限制与白藜芦醇抗衰老的研究进展[J]. 郭燕世.  生理科学进展. 2011(03)
[4]培养人视网膜色素上皮细胞脂褐素形成对胞内钙离子和细胞活力的影响[J]. 张乐,惠延年,马丽娜,王静波,刘晓娟,王雨生.  国际眼科杂志. 2007(02)



本文编号：3508533