S58通过激活PI3k/Akt/Nrf2信号通路抑制兔青光眼滤过性手术术后纤维化
发布时间：2022-01-05 12:25
背景:青光眼滤过性手术（Glaucoma filtration surgery,GFS）是目前临床治疗青光眼眼压（intraocular pressure,IOP）控制不佳的有效方法,但术后结膜囊瘢痕的发生常导致手术失败。尽管,临床上5-氟脲嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）、丝裂霉素C（mitomycin C,MMC）能提高了滤过性手术的成功率,但仍存在一些严重并发症,例如滤过泡的渗漏、术后浅前房以及角膜毒性等。因此,寻求一种有效且安全的抗瘢痕药物仍是目前研究的重点。有文献指出氧化与抗氧化平衡通过不同的途径调节TGF-bs诱导的纤维化,并表明氧化应激的增加对纤维化疾病的发展至关重要。因此,针对TGF-bs诱导的和ROS依赖的细胞氧化应激反应,可能为纤维化疾病的治疗提供新的方法。在前期研究中,本课题组利用指数式富集的配基系统进化（Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX）技术,筛选并优化出具有靶向TbR II、无毒性、易化学修饰的核酸适配子S58。S58阻抑TGF-b2与其受体结合是否能够...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
核酸适配子S靶向R的验证
重庆医科大学硕士研究生学位论文18与S之间的结合。C和DR和S交互区域，构造叠加RGF和S晶体结构。Figure1.DeterminationoftheinteractionbetweenTRIIandS58.A.HydrophobicsurfacepropertybetweenTRIIandS58.B.BindingsequencebetweenTRIIandS58.C,D.TheTRIIandS58interactionregions.1.3.2S58通过靶向R减少纤维化通过免疫荧光和流式细胞仪检测技术发现，FITC-S58孵育后的HConFs比PBS处理的细胞有更强的绿色荧光信号，表明S58可以与HConFs表面的受体蛋白结合（图2A，B）。此外，通过转染有意或无意siRNA-TRII处理HConFs使用S58（20nm）和TGF-2（4ng/ml）72小时后。WB结果显示siRNA-TRII预处理后，逆转S58降低ɑ-SMA，TRII和p-samd2/3蛋白含量作用。因此,S58通过向TRII减少HConFs纤维化（如图2C，D所示）。图2.S58通过靶向TRII减少纤维化。A.流式细胞仪技术检测FITC-S58靶向TRII作用。B.免疫荧光染色S58靶向TRII受体（细胞核染色蓝、FITC-S58染色绿）。C.HConFs
重庆医科大学硕士研究生学位论文27表达在时间和剂量上呈依赖性（图3D，G和I）。然而，MMP-2和MMP-9基因表达在1h-5h达到高峰后下降（图3I）。抗氧化应激相关基因水平随TGF-2-诱导HConFs的时间增加而不断降低（图3H）。图3.TGF-2增加HConFs氧化应激和诱导纤维化。A.线粒体ROS和B.表示TGF-2处理的细胞内ROS变化。C.细胞内抗氧化蛋白SOD1/2，CAT，γ-GCS和D.在不同TGF-2浓度预处理24小时后纤维蛋白α-SMA、纤连蛋白、波形蛋白和collagen-1表达变化。E.不同浓度TGF-2预处理HConFs24小时后，免疫荧光染色图像显示α-SMA水平（核=蓝色，α-SMA=绿色）。F.SOD1/2，γ-GCS水平和抗氧化蛋白的水平。G.纤维蛋白质α-SMA，纤连蛋白和
【参考文献】：
期刊论文
[1]青光安缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化TGF-β/Smad信号传导通路相关蛋白的影响[J]. 欧阳云,彭俊,黄学思,李苑碧,陈晓柳,吴权龙,李文娟,谭涵宇,彭清华. 中华中医药杂志. 2019(09)
[2]葡萄膜巩膜途径降眼压机制治疗青光眼的研究进展[J]. 张勇,朱小敏,谢琳. 国际眼科杂志. 2019(07)
[3]加味桑白皮汤对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕形成的影响研究[J]. 张劲,朱剑. 现代中西医结合杂志. 2019(12)
[4]氯化锂对人眼Tenon囊成纤维细胞TGF-β及CTGF的影响[J]. 卢素素,刘姗姗,范晓军,孙晓祥,卞江华,王继兵. 国际眼科杂志. 2017(09)
[5]青蒿琥酯对人Tenon囊成纤维细胞增殖与凋亡的影响[J]. 陈静,陈艺,邹秀兰,邹玉平. 眼科新进展. 2017(06)
[6]苦参碱对兔眼小梁切除术后滤过泡瘢痕的影响[J]. 饶婷,章余兰. 眼科新进展. 2017(05)
[7]大鼠球结膜滤过泡模型中转化生长因子β1及转化生长因子β2动态表达的实验研究[J]. 王玲,杨丽萍,刘梦迎,王大博. 中国眼耳鼻喉科杂志. 2016(05)
[8]Rho/ROCK通路抑制剂在青光眼中的研究进展[J]. 何理烨,梁亮. 海南医学. 2016(13)
[9]丝裂霉素在小梁切除术中的用量观察[J]. 李玉茹,刘晓瑞,林娜. 中国社区医师. 2016(18)
[10]兔眼小梁切除术后滤过泡组织Fas mRNA的表达[J]. 彭红娟,黎宗汉,郑彪,方林彬,柯毅. 眼科新进展. 2016(02)
博士论文
[1]CLC-2氯离子通道在TGF-β1诱导的HconF细胞纤维化中的作用研究[D]. 孙丽霞.吉林大学 2016
[2]ALK5在青光眼滤过术后滤过道瘢痕化中的调控作用[D]. 张家莹.复旦大学 2012
[3]嵌合式丝裂霉素壳聚糖海绵抗青光眼术后瘢痕化的研究[D]. 李由.南方医科大学 2012
硕士论文
[1]Lin28B、CyclinD1在TNF-α诱导的鼠Tenon’s囊成纤维细胞增殖中的作用机制的研究[D]. 向燕茹.青岛大学 2017
[2]康柏西普对兔眼小梁切除术后滤过通道瘢痕形成的影响[D]. 戴梦娇.西南医科大学 2017
[3]CTGF对犬眼小梁切除术后滤过泡瘢痕形成的影响及MMC在术中有效量的初探[D]. 郑之琬.西南大学 2016
[4]人眼tenon’s囊成纤维细胞的原代培养方法及P53基因在tenon’s囊成纤维细胞中表达的研究[D]. 陈珺.安徽医科大学 2016
[5]TGFβ3对人Tenon’s囊成纤维细胞以及细胞外基质的影响[D]. 王芳.天津医科大学 2014
[6]PEG-PCL-PEG（PECE）水凝胶在抑制青光眼滤过术后瘢痕化中的作用研究[D]. 彭日波.泸州医学院 2014
[7]青光安有效组份对兔小梁切除术后滤过道基质金属蛋白酶表达的影响[D]. 李文娟.湖南中医药大学 2013
[8]白藜芦醇对人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的影响[D]. 金隽漪.华中科技大学 2013
[9]羟基喜树碱对人眼Tenon’s成纤维细胞凋亡及其机制的研究[D]. 汤伟.南京医科大学 2012
[10]叶黄素对人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖及凋亡的影响[D]. 张明月.华中科技大学 2012
本文编号：3570344
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
核酸适配子S靶向R的验证
重庆医科大学硕士研究生学位论文18与S之间的结合。C和DR和S交互区域，构造叠加RGF和S晶体结构。Figure1.DeterminationoftheinteractionbetweenTRIIandS58.A.HydrophobicsurfacepropertybetweenTRIIandS58.B.BindingsequencebetweenTRIIandS58.C,D.TheTRIIandS58interactionregions.1.3.2S58通过靶向R减少纤维化通过免疫荧光和流式细胞仪检测技术发现，FITC-S58孵育后的HConFs比PBS处理的细胞有更强的绿色荧光信号，表明S58可以与HConFs表面的受体蛋白结合（图2A，B）。此外，通过转染有意或无意siRNA-TRII处理HConFs使用S58（20nm）和TGF-2（4ng/ml）72小时后。WB结果显示siRNA-TRII预处理后，逆转S58降低ɑ-SMA，TRII和p-samd2/3蛋白含量作用。因此,S58通过向TRII减少HConFs纤维化（如图2C，D所示）。图2.S58通过靶向TRII减少纤维化。A.流式细胞仪技术检测FITC-S58靶向TRII作用。B.免疫荧光染色S58靶向TRII受体（细胞核染色蓝、FITC-S58染色绿）。C.HConFs
重庆医科大学硕士研究生学位论文27表达在时间和剂量上呈依赖性（图3D，G和I）。然而，MMP-2和MMP-9基因表达在1h-5h达到高峰后下降（图3I）。抗氧化应激相关基因水平随TGF-2-诱导HConFs的时间增加而不断降低（图3H）。图3.TGF-2增加HConFs氧化应激和诱导纤维化。A.线粒体ROS和B.表示TGF-2处理的细胞内ROS变化。C.细胞内抗氧化蛋白SOD1/2，CAT，γ-GCS和D.在不同TGF-2浓度预处理24小时后纤维蛋白α-SMA、纤连蛋白、波形蛋白和collagen-1表达变化。E.不同浓度TGF-2预处理HConFs24小时后，免疫荧光染色图像显示α-SMA水平（核=蓝色，α-SMA=绿色）。F.SOD1/2，γ-GCS水平和抗氧化蛋白的水平。G.纤维蛋白质α-SMA，纤连蛋白和
【参考文献】：
期刊论文
[1]青光安缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化TGF-β/Smad信号传导通路相关蛋白的影响[J]. 欧阳云,彭俊,黄学思,李苑碧,陈晓柳,吴权龙,李文娟,谭涵宇,彭清华. 中华中医药杂志. 2019(09)
[2]葡萄膜巩膜途径降眼压机制治疗青光眼的研究进展[J]. 张勇,朱小敏,谢琳. 国际眼科杂志. 2019(07)
[3]加味桑白皮汤对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕形成的影响研究[J]. 张劲,朱剑. 现代中西医结合杂志. 2019(12)
[4]氯化锂对人眼Tenon囊成纤维细胞TGF-β及CTGF的影响[J]. 卢素素,刘姗姗,范晓军,孙晓祥,卞江华,王继兵. 国际眼科杂志. 2017(09)
[5]青蒿琥酯对人Tenon囊成纤维细胞增殖与凋亡的影响[J]. 陈静,陈艺,邹秀兰,邹玉平. 眼科新进展. 2017(06)
[6]苦参碱对兔眼小梁切除术后滤过泡瘢痕的影响[J]. 饶婷,章余兰. 眼科新进展. 2017(05)
[7]大鼠球结膜滤过泡模型中转化生长因子β1及转化生长因子β2动态表达的实验研究[J]. 王玲,杨丽萍,刘梦迎,王大博. 中国眼耳鼻喉科杂志. 2016(05)
[8]Rho/ROCK通路抑制剂在青光眼中的研究进展[J]. 何理烨,梁亮. 海南医学. 2016(13)
[9]丝裂霉素在小梁切除术中的用量观察[J]. 李玉茹,刘晓瑞,林娜. 中国社区医师. 2016(18)
[10]兔眼小梁切除术后滤过泡组织Fas mRNA的表达[J]. 彭红娟,黎宗汉,郑彪,方林彬,柯毅. 眼科新进展. 2016(02)
博士论文
[1]CLC-2氯离子通道在TGF-β1诱导的HconF细胞纤维化中的作用研究[D]. 孙丽霞.吉林大学 2016
[2]ALK5在青光眼滤过术后滤过道瘢痕化中的调控作用[D]. 张家莹.复旦大学 2012
[3]嵌合式丝裂霉素壳聚糖海绵抗青光眼术后瘢痕化的研究[D]. 李由.南方医科大学 2012
硕士论文
[1]Lin28B、CyclinD1在TNF-α诱导的鼠Tenon’s囊成纤维细胞增殖中的作用机制的研究[D]. 向燕茹.青岛大学 2017
[2]康柏西普对兔眼小梁切除术后滤过通道瘢痕形成的影响[D]. 戴梦娇.西南医科大学 2017
[3]CTGF对犬眼小梁切除术后滤过泡瘢痕形成的影响及MMC在术中有效量的初探[D]. 郑之琬.西南大学 2016
[4]人眼tenon’s囊成纤维细胞的原代培养方法及P53基因在tenon’s囊成纤维细胞中表达的研究[D]. 陈珺.安徽医科大学 2016
[5]TGFβ3对人Tenon’s囊成纤维细胞以及细胞外基质的影响[D]. 王芳.天津医科大学 2014
[6]PEG-PCL-PEG（PECE）水凝胶在抑制青光眼滤过术后瘢痕化中的作用研究[D]. 彭日波.泸州医学院 2014
[7]青光安有效组份对兔小梁切除术后滤过道基质金属蛋白酶表达的影响[D]. 李文娟.湖南中医药大学 2013
[8]白藜芦醇对人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的影响[D]. 金隽漪.华中科技大学 2013
[9]羟基喜树碱对人眼Tenon’s成纤维细胞凋亡及其机制的研究[D]. 汤伟.南京医科大学 2012
[10]叶黄素对人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖及凋亡的影响[D]. 张明月.华中科技大学 2012
本文编号：3570344
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