老年性聋小鼠内耳突触调控钾通道基因的筛选与鉴定

发布时间：2022-02-19 12:46

　　目的通过筛选内耳突触调控基因,探索老年性聋发生过程中突触损伤特点。方法利用转录组测序技术检测成年组（4周）和老年组（40周）C57BL/6J小鼠内耳基底膜,筛选差异表达基因（differentially expression genes, DEGs）。分析DEGs基因本体（GO）功能富集,京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集情况,并筛选突触调控差异基因,最后利用实时荧光定量PCR及免疫荧光染色验证结果。结果共筛选出3 267个DEGs,其中下调1 521个,上调1 746个（FC≥1.5,P<0.05）。功能富集显示,下调基因主要参与电压门控离子通道活性调控和突触调控,上调基因主要参与免疫调控。筛选出突触调控基因64个,其中6个钾通道基因Kcnq2,Kcnk3,Kcnmb4,Kcnk9,Kcnh5,Kcnc2富集度最高。qRT-PCR验证了6个调控突触的钾通道基因在不同年龄组内耳的差异表达;免疫荧光显示KCNQ2、KCNMB4在老年鼠内耳表达明显下降。结论筛选了老年性聋突触调控基因,其中6个钾通道基因表达明显下降,可能是导致老年性聋突触改变的重要因素。 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2020,42(08)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 实验试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 转录组测序
        1.2.2 GO数据库和KEGG数据库分析
        1.2.3 实时荧光定量PCR
        1.2.4 免疫荧光染色
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 内耳基底膜DEGs分析
    2.2 GO,KEGG分析揭示DEGs功能及通路
    2.3 突触调控基因
    2.4 qRT-PCR
    2.5 免疫荧光
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]老年性聋小鼠耳蜗带状突触损伤特点及机制研究[J]. 魏薇,杨丽辉,熊伟,柳柯,马秀岚,龚树生,杜政德.  中华耳科学杂志. 2019(02)
[2]年龄相关听力损失DBA/2J小鼠耳蜗毛细胞马达蛋白-prestin表达下调与耳聋的关系[J]. 李胜利,武坤毅,任晓勇.  中华耳科学杂志. 2018(04)
[3]C57BL/6J小鼠随年龄增长耳蜗内毛细胞带状突触数量变化的观察[J]. 李晓瑞,蒋兴旺,张延平.  听力学及言语疾病杂志. 2015(02)



本文编号：3632924