20s蛋白酶体在年龄相关性白内障晶状体前囊膜及核中表达的初步研究
本文关键词:20s蛋白酶体在年龄相关性白内障晶状体前囊膜及核中表达的初步研究,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:通过检测随着晶状体核硬度改变20s蛋白酶体(20s proteasome)在晶状体前囊膜及核中的表达水平,探讨20s蛋白酶体降解凋亡因子及氧化蛋白的作用与ARC发病的相关性。方法:选取2014年1月-2014年7月在皖南医学院附属弋矶山医院眼科病房中确诊为年龄相关性白内障患者,除外伴眼部其他疾病及全身性疾病。收集行小切口白内障囊外摘除术中的白内障晶状体核30例,根据核硬度分为A(Ⅱ级软核)、B(Ⅲ级中等硬度核)、C(Ⅳ级硬核、Ⅴ级极硬核)三组,比较晶状体核三组间性别、年龄、眼别、发病时间等一般临床资料无差异后,应用蛋白免疫印迹(Western-blot)法检测20s proteasome在三组ARC晶状体核中的含量;收集行小切口白内障囊外摘除术中的白内障晶状体前囊膜30例,根据核硬度分为A(Ⅱ级软核)、B(Ⅳ级硬核、Ⅴ级极硬核)两组,比较晶状体前囊膜两组间性别、年龄、眼别、发病时间等一般临床资料无差异后,应用蛋白免疫印迹(western-blot)法检测20s proteasome在两组ARC晶状体前囊膜中的含量;应用SPSS17.0统计学软件对所得数据行统计学分析。结果:性别、年龄、眼别、发病时间在晶状体核各组间差异无统计学意义(P0.05);性别、年龄、眼别、发病时间在晶状体前囊膜各组间差异无统计学意义(P0.05);应用Western-blot法检测20s proteasome含量在晶状体核各组间差异显著,具有统计学意义(P0.01);晶状体两组前囊膜样本中可见20s proteasome在软核中含量明显高于硬核、极硬核。结论:ARC患者晶状体核及前囊膜中20s蛋白酶体含量随着晶状体混浊度及核硬度的加深而降低。而20s蛋白酶体是体内降解凋亡因子及氧化损伤蛋白的重要酶体,它的减少关系到晶状体蛋白的异常改变,提示20s蛋白酶体含量的改变与年龄相关性白内障的发生发展密切相关。
【关键词】:年龄相关性白内障 20s蛋白酶体 蛋白免疫印迹法
【学位授予单位】:皖南医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R776.1
【目录】:
- 摘要8-10
- ABSTRACT10-12
- 前言12-17
- 实验材料与方法17-28
- 1 实验材料17-20
- 1.1 实验对象17
- 1.2 实验主要仪器17-18
- 1.3 实验主要药物与试剂18-19
- 1.4 主要试剂的配制19-20
- 2 实验方法20-28
- 2.1 一般临床资料分析20
- 2.2 western-blot实验检测年龄相关性白内障患者晶状体核中20s蛋白酶体的表达20-26
- 2.2.1 患者晶状体核标本的收集20-21
- 2.2.2 患者晶状体核标本中总蛋白的提取21
- 2.2.3 患者晶状体核标本中总蛋白浓度测定21-23
- 2.2.4 western-blot实验步骤及Bandscan灰度值测定23-26
- 2.3 western blot实验检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜中 20s白酶体的表达26-27
- 2.3.1 患者晶状体前囊膜的收集、总蛋白提取及浓度测定26-27
- 2.3.2 western-blot实验步骤及Bandscan灰度值测定27
- 2.4 统计分析27-28
- 结果28-34
- 1 年龄相关性白内障患者晶状体核的相关研究结果28-30
- 1.1 临床资料对比28-29
- 1.2 western-blot法检测 20s蛋白酶体在三组晶状体核中的表达29-30
- 1.2.1 对A、B、C三组进行显色照片照相结果29
- 1.2.2 对各组晶状体核中蛋白样品进行Bandscan灰度值测定29-30
- 2 年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜的相关研究结果30-34
- 2.1 临床资料对比30-31
- 2.2 western-blot法检测 20s蛋白酶体在两组晶状体前囊膜中的表达31-34
- 2.2.1 对A、B两组进行显色照片照相结果31-32
- 2.2.2 对两组晶状体前囊膜中蛋白样品进行Bandscan灰度值测定32-34
- 讨论34-40
- 结论40-41
- 参考文献41-46
- 综述46-55
- 参考文献53-55
- 作者简介及读研期间主要科研成果55-56
- 致谢56
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