腺病毒构建过表达睫状神经营养因子对骨髓间充质干细胞的影响

发布时间：2022-12-18 10:44

　　目的:构建过表达睫状神经营养因子（CNTF）的腺病毒,利用腺病毒载体转染骨髓间充质干细胞,使其在体外持续高效表达CNTF,为视网膜病变的体外研究提供新途径。方法:构建空载GFP-腺病毒及CNTF-腺病毒,取第3代BMSCs用于转染实验,分为3组:空白对照组（未转染腺病毒组）、阴性对照组（GFP-腺病毒转染组）和实验组（CNTF-腺病毒转染组）。ELISA测转染后1、2、3d各组上清液的CNTF蛋白分泌量。结果:成功构建空载GFP-腺病毒及CNTF-腺病毒,实验组的CNTF表达量明显高于空白对照组和阴性对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:利用腺病毒载体可使BMSCs在体外持续高效表达CNTF。 

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
0引言
1材料和方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1大鼠骨髓间充质干细胞的培养及传代
        1.2.2腺病毒包装和扩增及纯化
        1.2.3腺病毒感染BMSCs
        1.2.4 ELISA检测细胞上清液中CNTF分泌水平
2结果
    2.1合成的目的基因序列
    2.2含有CNTF的pHBAd-MCMV-GFP载体酶切回收结果
    2.3合成的序列载体用BamH I和EcoR I双酶切获得CNTF片段并且酶切完成后胶回收
    2.4 CNTF单克隆PCR鉴定结果
    2.5 pHBAd-MCMV-GFP- CNTF重组载体测序结果
    2.6各组在不同时间点上清液的CNTF蛋白浓度
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Current focus of stem cell application in retinal repair[J]. Maria L Alonso-Alonso,Girish Kumar Srivastava.  World Journal of Stem Cells. 2015(03)
[2]睫状神经营养因子基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞的构建[J]. 武晶晶,华宁,东莉洁,李筱荣.  中华实验眼科杂志. 2014 (05)
[3]WJSC 6th Anniversary Special Issues（2）:Mesenchymal stem cells Progress of mesenchymal stem cell therapy for neural and retinal diseases[J]. Tsz Kin Ng,Veronica R Fortino,Daniel Pelaez,Herman S Cheung.  World Journal of Stem Cells. 2014(02)



本文编号：3721909