维生素B6滴眼液对PM 2.5 诱导小鼠干眼的疗效初步研究

发布时间：2023-12-12 18:56

　　目的:探讨维生素B6(VitB6)滴眼液对大气颗粒物(PM_2.5)诱导的小鼠干眼(DED)的治疗效果。方法:选用60只6⁸周龄的雄性Balb/c小鼠,随机选取10只作为正常对照组,其余50只使用5mg/mL PM2.5滴眼液在标准环境下诱导干眼(右眼,4次/日,连续14天)。通过Schirmer I试验(SIT)、泪膜破裂时(TBUT)检测、角膜荧光素染色(FL)、虎红染色(RB)、丽丝胺绿染色(LG)及炎症指数评分这些相应指标,并对比正常小鼠相应的眼表数据来评判造模效果。造模14天,筛选符合干眼标准的小鼠,随机分为4组:A组,干眼模型组;B、C、D三组分别为PBS治疗组、0.02%VitB6治疗组、0.05%VitB6治疗组。每日4次,连续14天。在治疗前及治疗第7、14天依次进行上述泪液分泌量检测、泪膜功能检测、活体染色、炎症指数评分以及角膜共聚焦显微镜检查。治疗第14天,摘除小鼠眼球、眼睑、角膜组织,行苏木精-伊红染色(HE)、过碘酸-希夫染色(PAS)、TUNEL染色、免疫荧光染色及Western Blot检测。结果:治疗前,各组的小...

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【学位级别】：硕士

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摘要
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第1章 引言
    1.1 概述
第2章 实验材料与方法
    2.1 实验动物
        2.1.1 实验动物及饲养环境
        2.1.2 实验动物模型制作
        2.1.3 实验动物分组
    2.2 PM_2.5的准备
    2.3 实验试剂及制备
        2.3.1 实验试剂
        2.3.2 常用实验试剂的制备
    2.4 实验仪器
    2.5 实验方法
        2.5.1 泪液分泌量检测
        2.5.2 泪膜破裂时间检测
        2.5.3 荧光素染色
        2.5.4 丽丝胺绿染色和虎红染色
        2.5.5 炎症指数评分
        2.5.6 共聚焦显微镜检查
        2.5.7 眼部组织取材法
        2.5.8 石蜡切片&HE染色
        2.5.9 石蜡切片&PAS染色
        2.5.10 角膜组织TUNEL染色
        2.5.11 冰冻切片&免疫荧光染色
        2.5.12 免疫印迹试验(Western Blot)
    2.6 统计学分析
第3章 实验结果
    3.1 VitB6对泪膜的稳定性及角膜上皮的影响
    3.2 VitB6在角膜神经损伤中的作用
    3.3 VitB6治疗后角结膜HE染色情况
    3.4 VitB6对角膜上皮细胞凋亡的影响
    3.5 VitB6对结膜杯状细胞数量的影响
    3.6 VitB6对角膜鳞状上皮化生的影响
    3.7 WB检测VitB6对角膜炎症因子NF-κB p65、p-NF-κB p65 的影响
第4章 讨论
第5章 结论与展望
致谢
参考文献
附录
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3873446