一种用于内耳siRNA转染的新型蛋白载体

发布时间：2024-01-21 11:41

　　目的通过体外实验与脂质载体LipoFiter^TM进行对比,验证小干扰RNA(siRNA)蛋白载体TAT-DRBD载体在耳蜗的转染效率及安全性。并在卡铂南美栗鼠内耳损害实验模型中,通过TAT-TRBD载体携带siRNA特异性下调铜转运蛋白Slc31a1基因的表达,验证对毛细胞的保护。方法离体条件下,应用TAT-DRBD携带Cy3标记的siRNA转染新生SD大鼠耳蜗基底膜,12小时后激光共聚焦显微镜观察; TAT-DRBD及LipoFiter^TM载体转染新生SD大鼠耳蜗基底膜48小时后计数毛细胞丢失及损伤情况。南美栗鼠在接受单次腹腔内卡铂注射前24小时左耳通过TAT-DRBD载体行Slc31a1基因特异性siRNA转染,右耳为对照,12天后处死并通过行全耳蜗基底膜铺片计数毛细胞丢失比例。结果在离体耳蜗器官型培养中,TAT-DRBD可高效转染Cy3标记的siRNA进入毛细胞,效率几达100%。新生SD大鼠耳蜗基底膜中段在加入脂质体LipoFiter^TM48小时后会导致严重的耳基底膜内、外毛细胞损害及纤毛排列紊乱;TAT-DRB...

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