二甲双胍通过上调SIRT3介导的自噬拮抗顺铂耳毒性的体外研究

发布时间：2024-05-18 00:19

　　目的:在体外实验中探明二甲双胍对顺铂耳毒性的保护作用,并从SIRT3-自噬信号的角度初步探明其可能的产生机制。方法:1、首先在HEI-OC1细胞中建立顺铂耳毒性的细胞模型。分组为对照组(C组)、顺铂组(CP组)、二甲双胍组(M组)、顺铂+二甲双胍组(CPM组)这四组。CP组给予顺铂处理24小时,CPM组在给予顺铂处理前给予二甲双胍预处理24h,M组仅给予二甲双胍作用24小时,C组不做处理,于造模终点收集细胞用于后续实验。提取细胞总蛋白应用Western Blot技术检测组间SIRT3蛋白表达水平的差异,采用PCR技术检测组间SIRT3 mRNA水平上的差异。用Western Blot和免疫荧光技术通过对组间自噬相关蛋白LC3II和P62的蛋白表达水平差异的检测,探明顺铂及二甲双胍对自噬的影响。我们进一步用流式细胞技术(FITC/PI检测法)来检测组间细胞的凋亡比例的差异。2、我们进一步应用干扰SIRT3的慢病毒转染HEI-OC1细胞,建立干扰SIRT3的细胞模型,并分为:对照组(C组)、顺铂组(CP组)、二甲双胍组(M组)、顺铂+二甲双胍组(CPM组)、干扰SIRT3组(sh-lv-S...

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Abstract
前言
材料和方法
实验结果
讨论
参考文献
综述 顺铂耳中毒损伤与自噬：现状与展望
    参考文献
致谢



本文编号：3976174