雷帕霉素在兔眼滤过性手术后的抗瘢痕作用

发布时间：2024-10-03 00:40

　　 目的研究雷帕霉素在兔眼滤过性手术后抗瘢痕形成的作用及其产生作用可能的原因。方法取健康成年的青紫兰兔96只,取每只兔左眼行小梁切除术,术后随机分为实验组及对照组,24只/组。术后将配制好的不同浓度雷帕霉素滴眼剂(1%、3%、5%)用于实验组,将药用蓖麻油滴眼剂用于实验对照组。4次/d。术后分别于第7、14、21、28天依照Krofeld分型法比较滤过泡的形态和功能。在术后第1、2、3、4周分别随机处死6只青紫蓝兔后,采用免疫组化法检测兔眼行小梁切除术区域的组织中增殖细胞核抗原(PCNA)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)因子局部表达情况,观察结果。体外原代培养兔眼结膜下成纤维细胞(RTFs),采用流式细胞技术检测经不同浓度雷帕霉素溶液(0、0.06、0.25、1、4 mg/L)作用后细胞的凋亡情况。结果在术后第1、2、3周可见各实验组功能性滤过泡形成率比对照组高(P<0.05),且功能性滤过泡的形成率呈雷帕霉素药物浓度依赖性增长;免疫组化法可见实验组PCNA标记阳性成纤维细胞数表达量比相应的对照组高,各实验组数目比相应的对照组少(P<0.05),且α-SMA阳性成纤维细胞的表...

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【部分图文】：

图1PCNA免疫组化结果

无菌条件下在完全培养基中加入组织，组织块在48h后就会出现贴壁，培养至4～7d时，在离组织不远的地方出现不规则生长的细胞。生长空间充足的情况下，细胞呈放射状生长，符合成纤维细胞形态表现。图2α-SMA免疫组化结果

图3RTFs的原代培养图

取对数生长期RTFs，用不同浓度的雷帕霉素溶液（0、0.06、0.25、1、4mg/L）作用相同时间后，采用流式细胞技术进行检测，发现各浓度下细胞均出现不同程度的凋亡，而且当浓度为0.25mg/L时细胞凋亡数目明显的增加，随着雷帕霉素的浓度增加，细胞凋亡数目增多，且具有浓度依....

图2α-SMA免疫组化结果

图1PCNA免疫组化结果2.3.1.2RTFs的免疫荧光鉴定

图4免疫荧光鉴定结果

本实验得出以下结论：（1）雷帕霉素可以抑制兔抗青光眼术后滤过区组织过度增生，保留功能性滤过泡，并延长其寿命；（2）雷帕霉素可以有效的诱导RTFs凋亡的发生，从而产生抑制青光眼术后滤过区成纤维细胞过度增殖的作用。目前，小梁切除术依然是在青光眼患者中实现目标眼压的最有效方式[30-3....

本文编号：4006551