MiR-19b对过敏性结膜炎眼部炎症抑制作用的实验研究

发布时间：2025-03-19 01:06

　　目的 探究miR-19b和JAK/STAT3信号通路在由IgE介导的过敏性结膜炎模型中的表达变化;探究阻断JAK/STAT3信号通路后,在小鼠过敏性结膜炎的眼表炎症中的变化;探究miR-19b在TSLP介导的过敏性炎症及对JAK/STAT3信号通路的影响。方法1.选择BalB/c雌性小鼠30只,随机分为正常对照组(PBS)、过敏性结膜炎组(Allergic conjunctivitis,AC)、CYT387(JAK/STAT3通路阻断剂)注射过敏性结膜炎组(AC+CYT387)、miR-19b agomir注射过敏性结膜炎组(AC+miR-19b)、agomir阴性对照过敏性结膜炎组(AC+control miR),每组6只小鼠。2.采用结膜炎眼表临床评分的方法评估小鼠结膜炎的严重程度,采用HE染色的方法检测小鼠角结膜下炎性细胞及嗜酸性粒细胞的浸润情况,采用ELISA的方法检测小鼠血清IgE水平,免疫荧光双染的方法分别检测小鼠眼表TSLP和p-STAT3在结膜树突细胞中的表达情况,采用RT-qPCR的方法分别观察小鼠角膜、结膜、淋巴结组织中miRNA-19b、TSLP及IL-1、IL-5...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、树突细胞的通过JAK/STAT通路的磷酸化在过敏性结膜炎发病机制中的作用研究
    1.1 实验材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 实验仪器
        1.1.3 实验试剂
        1.1.4 溶液配制
    1.2 实验方法
        1.2.1 动物模型的建立和分组
        1.2.2 临床评分
        1.2.3 动物处理
        1.2.4 结膜、角膜、淋巴结组织取材
        1.2.5 眼球及淋巴结病理切片的制备
        1.2.6 HE染色
        1.2.7 免疫荧光双染
        1.2.8 ELISA法
        1.2.9 总RNA的提取
        1.2.10 RT-qPCR
        1.2.11 统计学方法
    1.3 结果
        1.3.1 小鼠临床评分结果
        1.3.2 小鼠眼球HE染色结果
        1.3.3 小鼠血清IgE表达水平
        1.3.4 小鼠眼球免疫荧光双染检测p-STAT3 在树突细胞中的表达
        1.3.5 小鼠眼球免疫荧光双染检测TSLP在树突细胞中的表达
        1.3.6 RT-qPCR检测小鼠结膜、角膜和淋巴结组织中miR-19b表达水平·
        1.3.7 RT-qPCR分别检测小鼠结膜、角膜和淋巴结组织中TSLP及下游促炎因子的表达水平
    1.4 讨论
        1.4.1 动物模型的建立
        1.4.2 过敏性结膜炎中血清IgE因子及阻断JAK/STAT后的变化
        1.4.3 过敏性结膜炎中炎症细胞,TSLP及相关炎症因子的变化
        1.4.4 miR-19b在过敏性结膜炎及阻断JAK/STAT通路后的变化
        1.4.5 JAK/STAT信号通路的磷酸化与树突细胞成熟活化
        1.4.6 树突细胞的成熟在过敏性结膜炎的机制
    1.5 小结
二、MiR-19b通过影响TSLP对 JAK/STAT通路的影响研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 动物模型的建立和分组
        2.2.2 临床评分
        2.2.3 动物处理
        2.2.4 结膜、角膜、淋巴结组织取材
        2.2.5 眼球及淋巴结病理切片的制备
        2.2.6 HE染色
        2.2.7 免疫荧光双染
        2.2.8 ELISA法
        2.2.9 总RNA的提取与RT-PCR
        2.2.10 统计学方法
    2.3 结果
        2.3.1 小鼠临床评分结果
        2.3.2 RT-qPCR检测小鼠结膜、角膜和淋巴结组织中mi R-19b表达水平
        2.3.3 小鼠眼球HE染色结果
        2.3.4 小鼠血清IgE表达水平
        2.3.5 小鼠眼球免疫荧光双染检测p-STAT3 在树突细胞中的表达
        2.3.6 小鼠眼球免疫荧光双染检测TSLP在树突细胞中的表达
        2.3.7 RT-qPCR分别检测小鼠结膜、角膜和淋巴结组织中TSLP及下游促炎因子的表达水平
    2.4 讨论
        2.4.1 动物模型的建立
        2.4.2 炎症细胞、血清IgE因子及相关炎症因子在miR-19b过表达后的变化
        2.4.3 miR-19b后对JAK/STAT通路磷酸化及树突细胞的影响机制
    2.5 小结
结论
参考文献
发表论文情况说明
综述 树突细胞在过敏性结膜炎中的作用和抗原提呈机制的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：4036456