PMX205干预视网膜神经节细胞兴奋性损伤的研究

发布时间：2017-06-24 05:03

  本文关键词：PMX205干预视网膜神经节细胞兴奋性损伤的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨补体系统活化产物C5a及其受体拮抗剂PMX205在NMDA(N-methyl-D-aspartate,N-甲基-D-天门冬氨酸)介导的视网膜神经节细胞(RGCs)兴奋性损伤模型中的作用。方法:健康成年清洁级SD大鼠65只,随机分为空白对照组(5只)、PBS组(玻璃体腔注射PBS 20只)、NMDA组(玻璃体腔注射NMDA 20只)、PMX205+NMDA组(腹腔注射PMX205+玻璃体腔注射NMDA20只)。每组再随机分为四小组,分别于玻璃体腔NMDA注射后1h,12h,24h,48h处死。HE染色法观察各组视网膜组织形态学变化,ELISA检测视网膜组织中补体成分C5a的含量变化,Real-time PCR检测Brn3a的m RNA表达变化评估RGCs的损伤程度。结果:1.空白对照眼视网膜各层组织染色均匀、细胞结构清晰、形态规整,RGCs呈圆形或椭圆形、单层排列。玻璃体腔注射NMDA后1h,RGCs水肿、核膜间距加宽、排列紊乱,随造模时间的延长,RGCs数目明显减少,内丛状层变薄。与NMDA组中相同处理时间组比较,PMX205+NMDA组RGCs排列相对规整、未见明显丢失,内丛状层较厚。2.ELISA结果:视网膜组织中C5a含量在NMDA组处理1h即升高,12h继续上升,24h达高峰,48h下降,NMDA组中除处理1h组与空白对照组比较差异无统计学意义(p=0.06)外,其余处理时间组与空白对照组比较差异均具有统计学意义(p0.05),PBS组中各处理时间组视网膜组织C5a含量分别与空白对照组比较,差异均无统计学意义(p0.05)。3.实时定量PCR检测Brn3a m RNA结果:NMDA组与空白对照组比较,随处理时间的延长,视网膜组织中Brn3a m RNA表达量呈进行性下降,且NMDA组中各处理时间组Brn3a m RNA表达量分别与空白对照组比较,差异均具有显著统计学意义(p0.01)。与NMDA组的相同处理时间组比较,PMX205+NMDA组视网膜组织Brn3a m RNA表达水平均较高,NMDA组和PMX205+NMDA组中除处理1h组相比较,差异无统计学意义(p=0.07)外,其余3个处理时间组分别对应比较,差异均具有显著的统计学意义(p0.01)。PMX205+NMDA组不同处理时间眼Brn3a m RNA的表达量分别与空白对照眼比较,差异均具有统计学意义(p0.01)。结论:补体系统活化成分C5a可能参与了NMDA介导的视网膜神经节细胞兴奋性损伤过程,而其特异性受体拮抗剂PMX205可在一定程度上阻断此过程,起到神经保护作用。
【关键词】：N-甲基-D-天门冬氨酸 兴奋性损伤 视网膜神经节细胞 C5a PMX205
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R775
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-5
• 引言5-6
• 第一章 材料与方法6-15
• 1.1 实验材料6-7
• 1.2 实验方法7-13
• 1.3 统计学分析13-15
• 第二章 结果15-18
• 2.1 视网膜组织HE染色15
• 2.2 ELISA检测视网膜组织中C5a含量结果15-16
• 2.3 RT-PCR检测视网膜组织Brn3amRNA的表达结果16-18
• 第三章 讨论18-23
• 结论23-24
• 参考文献24-28
• 附图28-30
• 综述30-41
• 参考文献37-41
• 攻读学位期间的研究成果41-42
• 致谢42-43

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本文编号：477132