鼻咽癌高危人群中鼻咽拭子EB病毒DNA定量检测及其在鼻咽癌筛查中的应用

发布时间：2017-09-18 13:30

  本文关键词：鼻咽癌高危人群中鼻咽拭子EB病毒DNA定量检测及其在鼻咽癌筛查中的应用

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【摘要】：背景与目的：在鼻咽癌的高发地区,几乎100%的低分化型鼻咽癌患者携带有EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)。目前,EBV相关抗体血清学检测己广泛应用于鼻咽癌的大规模人群筛查。对血清学筛查出抗体阳性的高危人群需要进行定期随访,随访的方法仍是以检测血清中EBV抗体及鼻咽镜检查为主,但此时检查方法的特异度已大幅降低,这些高危人群经过反复的检查,血清抗体一直处于阳性状态却无肿瘤的发生,即绝大多数的血清EBV抗体阳性的人群在随访过程中经受了不必要的抗体检测及鼻咽镜检查。因此寻找新的生物学标志物及方法来提高筛查诊断效率对鼻咽癌的筛查有较大的临床意义。本研究旨在通过采集鼻咽拭子的方法,检测鼻咽癌高危人群中鼻咽部EBV-DNA载量,并评价这一指标是否能提高随访方法的特异度,减少需要反复随访人群的数量。材料与方法：广西苍梧县作为国家癌症早诊早治示范基地项目点,在2006年1月至2013年6月实施了鼻咽癌早诊早治筛查项目,从苍梧县随机抽取3个镇(石桥、沙头、梨埠镇),30-59岁当地居民纳入筛查对象,筛查对象经过免疫酶法检测血清EB病毒抗体、临床检查(头、颈部、鼻咽部检查)初次筛查后,将EB病毒抗体阳性者定为鼻咽癌高危人群并纳入高危人群队列进行随访。在进行高危人群随访复查时,除采血进行免疫酶法检测血清VCA/IgA抗体滴度及临床检查外,同时收集到部分鼻咽癌高危人群鼻咽拭子样本。本研究通过提取鼻咽拭子样本中的DNA,采用实时荧光定量PCR方法(q-PCR)检测EB病毒DNA载量水平,分析鼻咽癌高危人群中血清VCA/IgA抗体滴度及鼻咽部EB病毒DNA载量分布情况,然后分析鼻咽拭子中EB病毒DNA载量与血清VCA/IgA抗体水平的关系,对鼻咽癌病例与高危人群的VCA/IgA与EBV-DNA载量水平进行比较。最后,比较不同截断值(cut-off value)下VCA/IgA与EBV-DNA载量的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值,制作受试工作者特征曲线(ROC曲线),通过计算曲线下面积(Area under the curve, AUC)评估和对比两个检测指标的诊断效能。结果：1.一般情况：总共22184人纳入初筛,筛查出1045例高危人群,鼻咽癌患者25例。高危人群随访中检出8例新发鼻咽癌病例。2. q-PCR定量结果显示,高危人群中89%(802/905)的鼻咽拭子中可检测出EBV-DNA( 0 copies/swab),中位拷贝数为(6.7 × 103 copies/swab)。在高危人群中复查VCA/IgA阳性率为94%(847/905),平均抗体滴度为1：10.7。3.在高危人群中,女性鼻咽部EBV-DNA载量为6.1×103 copies/swab,男性为2.9×103 copies/swab,两者差异具有统计学意义(Z=-3.257,P=0.001)：而VCA/IgA抗体水平在性别上差异无统计学意义(Z=-0.372,P=0.710)。该人群中高年龄组的鼻咽部EBV-DNA载量及VCA/IgA抗体滴度高于低年龄组,两者均有随着年龄的增长而升高的趋势,但无统计学上的关联(Spearman相关系数分别为0.139,P0.001；0.104,P0.001)。4.在高危人群中,多重线性回归分析显示,在调整性别、年龄和人类基因拷贝数之后,鼻咽部EBV-DNA水平随着血清VCA/IgA抗体滴度的增高而升高(Spearman相关系数为0.229,P0.001)。5.在高危人群队列的随访中,检出8例鼻咽癌病人,6例男性,2例女性,其中7例为临床早期病例。检测发现鼻咽癌病人的鼻咽部EBV载量和血清VCA/IgA抗体水平均显著高于未患病人群(EBV载量比较：z=-4.688,P0.001；VCA/IgA比较：Z=-4.097,P0.001)。鼻咽部EBV载量及VCMgA水平与病人的临床分期均未见有统计学关联(Spearman相关系数分别为0.385,P=0.346； 0.193,P=0.648)。6.以非患病组人群的EBV-DNA载量的均数加上2倍标准差得到EBV-DNA的最佳cut-off值(即4.7×105 copies/swab),此cut-off值下的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为87.5%,98.9%,41.2%,99.9%。相比之下,血清VCA/IgA抗体的最佳cut-off值(即1：20)为均数加上1倍标准差,相应的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为87.5%,75.0%,3.1%,99.9%。ROC曲线比较显示鼻咽部EBV-DNA的曲线下面积大于VCA/IgA (0.980 vs 0.895),在该高危人群中,有95%以上的个体低于EBV-DNA的最佳cut-off值,即超过95%的个体的EBV-DNA载量低于4.7 ×105 copies/swab被判为阴性,可以退出高危人群随访队列,减少了大量需要反复随访的高危人群数量。结论：1.在鼻咽癌高危人群中,鼻咽部EBV-DNA有较高的检出率。2.女性鼻咽部EBV-DNA载量高于男性,高龄组人群的EBV-DNA高于低年龄组人群,但与年龄均无统计学关联。3.鼻咽部EBV-DNA水平随着血清VCA/IgA抗体滴度的增高而升高。4.鼻咽癌病人的鼻咽部EBV载量和血清VCA/IgA抗体水平均显著高于未患病人群。5.在鼻咽癌高危人群中,以鼻咽部EBV-DNA载量为筛查指标的诊断效能高于血清VCA/IgA指标,能显著提高在高危人群中筛检鼻咽癌的筛查效率,减少需要反复随访人群的数量,更适合用于高危人群的随访筛查。
【关键词】：鼻咽癌 鼻咽拭子 肿瘤筛查 EB病毒 早期诊断
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 个人简历3-5
• 英汉缩略词对照表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-14
• 前言14-18
• 材料与方法18-29
• 结果29-39
• 讨论39-45
• 小结45-46
• 参考文献46-50
• 综述50-62
• 参考文献58-62
• 致谢62-64
• 攻读学位期间发表的学术论文64

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：875825