自噬相关蛋白LC3和Beclin1在肝纤维化大鼠中的表达及蓝莓的作用
本文关键词:自噬相关蛋白LC3和Beclin1在肝纤维化大鼠中的表达及蓝莓的作用
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【摘要】:目的:观察微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein l light chain 3,LC3)和Beclin1在免疫性肝纤维化大鼠肝组织中的表达以及蓝莓对其作用。方法:60只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、蓝莓原浆高剂量组、蓝莓原浆中剂量组、蓝莓原浆低剂量组及复方鳖甲软肝片组。除正常对照组以外,其余各组大鼠于每周二、周五予无菌猪血清腹腔注射复制大鼠免疫性肝纤维化模型。造模同时各蓝莓组分别给予不同浓度蓝莓原浆(1.0ml/100g、0.5ml/100g、0.25ml/100g)灌胃,复方鳖甲软肝片组予复方鳖甲软肝片灌胃(0.054g/100g),1次/天,共12周。12周末处死大鼠,测定血清ALT、AST、ROS的含量,行肝组织病理学检查(HE和Masson染色);采用免疫组织化学法、Western blot法检测肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的蛋白水平;Western blot法检测肝组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)的蛋白水平;RT-PCR法检测肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的mRNA水平。结果:各组大鼠血清ALT、AST水平差异无统计学意义(F=9.134和3.497,均P0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠出现明显肝纤维化(Hc=43.952,P0.05),血清ROS水平显著升高(F=985.510,P0.01),肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的mRNA及蛋白表达、ColⅠ的蛋白表达明显增高(F=121.430,117.756,43.710,54.005,49.530,均P0.01)。与模型组比较,蓝莓原浆高、中剂量组肝纤维化程度明显减轻(Hc=43.952,P0.05),胶原表达减少;血清ROS水平明显下降(F=985.510,P0.01),肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的mRNA、蛋白表达及ColⅠ的蛋白表达明显降低(F=121.430,117.756,43.710,54.005,49.530,均P0.01)。结论:1.在猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化中血清ROS含量增加,肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1基因及蛋白水平升高,提示自噬可能促进了免疫性肝纤维化的发生;2.蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化的干预作用可能与降低血清ROS水平,下调肝组织LC3和Beclin1的基因及蛋白表达,进而抑制自噬有关。
【关键词】:蓝莓 肝纤维化 自噬 LC3-Ⅱ Beclin1
【学位授予单位】:贵州医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R575.2
【目录】:
- 中文摘要5-6
- 英文摘要6-9
- 英文缩略词表9-10
- 引言10-12
- 材料与方法12-24
- 结果24-33
- 讨论33-37
- 结论37-38
- 参考文献38-42
- 综述42-52
- 参考文献48-52
- 作者简历52-53
- 致谢53-54
- 学位论文数据集54
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,本文编号:1003088
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