幽门螺旋杆菌CagA蛋白对胃黏膜上皮细胞内β-Catenin表达及磷酸化的影响

发布时间：2017-10-24 03:33

  本文关键词：幽门螺旋杆菌CagA蛋白对胃黏膜上皮细胞内β-Catenin表达及磷酸化的影响

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【摘要】：目的1.观察幽门螺旋杆菌感染对人胃黏膜上皮细胞内β-Catenin的表达及磷酸化的影响。2.明确CagA蛋白对人胃黏膜上皮细胞β-Catenin的表达及磷酸化的影响。3.探讨CagA蛋白诱导胃黏膜上皮细胞内β-Catenin表达增加的分子机制。方法1.收集胃窦黏膜活检标本80例,切片观察胃黏膜的病理变化;2.免疫组化染色观察胃黏膜组织中的HP感染状况:所有胃黏膜标本切取6um厚的组织切片,标本经脱蜡、水化后,采用HP特异抗体检测胃黏膜组织中HP的感染状况,根据有无HP感染,所有标本分为HP阳性组及HP阴性组。3.PCR扩增观察HP阳性胃黏膜组织中HP的CagA基因状态所有HP阳性的胃黏膜标本分别切取6-8张6um厚的组织切片,放入消毒的EP管中,采用Qiagen公司的试剂盒,从石蜡包埋组织中提取DNA,并以此DNA作为模板,采用CagA特异的引物扩增CagA基因,扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳分析。HP阳性胃黏膜又被进一步分为CagA阳性组与CagA阴性组。4.免疫组化染色观察胃黏膜上皮细胞中β-Catenin及p-β-Catenin的表达及分布,采用半定量及定量方法,分析不同CagA状态的HP感染对胃黏膜上皮细胞内β-Catenin的表达、分布及磷酸化的影响。5.采用细胞培养及基因转染实验探讨CagA蛋白诱导胃黏膜上皮细胞内β-Catenin的表达增高的分子机制。结果1.HP感染诱导人胃黏膜上皮细胞内β-Catenin的表达增高。2.HP感染诱导的胃黏膜上皮细胞内β-Catenin的表达增高与CagA基因的状态有关,CagA阳性的HP感染使胃黏膜上皮内β-Catenin的磷酸化减少。3.CagA蛋白可能通过抑制PAR1b/MARK2激酶活性,导致β-Catenin的磷酸化降低。结论1.幽门螺旋杆菌感染可诱导人胃黏膜上皮细胞内β-Catenin的表达增加。2.HP诱导的胃黏膜上皮细胞内β-Catenin的表达增高与CagA蛋白的状态密切相关,CagA蛋白抑制胃黏膜上皮细胞内β-Catenin的磷酸化。3.CagA蛋白可能是通过抑制PAR1/MARK2激酶的活性,导致胃黏膜上皮细胞内β-Catenin磷酸化水平降低。
【关键词】：幽门螺旋杆菌 CagA β-Catenin 磷酸化
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R573;R735.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 前言11-15
• 第一部分 幽门螺旋杆菌CagA蛋白对胃黏膜上皮中β -Catenin表达及磷酸化的影响15-27
• 材料与方法15-21
• 结果21-24
• 讨论24-27
• 第二部分 幽门螺旋杆菌CagA蛋白影响β-cat在胃癌AGS细胞系中表达的分子机制27-42
• 材料与方法27-38
• 结果38-40
• 讨论40-42
• 结论42-43
• 参考文献43-47
• 文献综述 CagA蛋白与β-Catenin的磷酸化47-53
• 参考文献50-53
• 致谢53-54
• 攻读学位期间发表的学术论文目录54

【参考文献】

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1 徐东娟;李国富;张红梅;吕怀盛;张宁妹;马莉琼;江海峰;张建中;;不同方法检测胃黏膜活检标本中幽门螺杆菌感染状况的价值[J];临床与实验病理学杂志;2014年06期

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本文编号：1086834