腹泻主导型肠易激综合征患者的肠道菌群研究

发布时间：2017-11-05 14:27

  本文关键词：腹泻主导型肠易激综合征患者的肠道菌群研究

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【摘要】：第一部分腹泻主导型肠易激综合征患者的肠道菌群研究背景及目的肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)是一种以腹部不适、腹痛、排便习惯改变及大便性状改变为临床表现的功能性胃肠病。其病因尚不明确,该病的发病因素可能与肠道菌群改变相关。根据临床症状不同,IBS被分为腹泻主导型(IBS-D),便秘主导型(IBS-C),便秘腹泻交替型(IBS-M)[1],其中IBS-D和肠道菌群的关系据研究报道尤为密切。本实验通过Miseq高通量测序联合16s rDNA实时荧光定量PCR法(QPCR)分析IBS-D患者与正常人群粪便中的肠道菌群分布差异,以期发现对肠易激综合征诊断治疗有指导意义的特定菌群。探究肠道菌群与IBS-D患者症状严重程度及生活质量的关系。方法在通过浙江大学医学院附属邵逸夫医院伦理委员会批准以及患者知情同意的情况下入组邵逸夫医院就诊的患者,选取40例经罗马Ⅲ诊断标准诊断为IBS-D的患者,同时入组20例健康人组成健康对照组,IBS-D患者入组时填写IBS症状等级评分量表及SF-36生活质量量表。提取IBS-D患者及正常人粪便中的16SrDNA,随机各取3例样本进行基于Illumina Miseq平台的高通量测序,根据测序结果及既往研究选取特定细菌引物通过16S rDNA实时荧光定量PCR法进一步检测及验证,分析IBS-D组与正常组粪便中的菌群分布差异。比较患者症状严重程度、生活质量与特定肠道菌群含量的相关性。结果1)高通量测序结果显示,IBS-D患者的平均细菌密度低于健康对照组。IBS-D患者与正常人群对比,肠道中普雷沃氏菌属所占的百分比明显高于正常对照组,分别为69.77%及8.21%(P0.05)；而拟杆菌属所占的百分比明显低于正常对照组,分别为4.92%及60.62%(P0.05),其余菌属分布差异无统计学意义。2)16S rDNA荧光定量PCR结果显示IBS-D患者中拟杆菌属、双歧杆菌属、乳酸杆菌属数量减少及普雷沃氏菌属和大肠杆菌数量增加有统计学意义(P0.05),最显著的是,普雷沃氏菌属在中国IBS-D患者中较正常人群增加超过100倍(P0.05)。3)普雷沃氏菌属、拟杆菌属、双歧杆菌属、乳酸杆菌属及大肠杆菌含量与IBS-D患者症状严重程度及生活质量无显著相关性。结论IBS-D患者肠道内普雷沃氏菌属和大肠杆菌数量显著增加,拟杆菌属、双歧杆菌属、乳酸杆菌属数量显著减少。首次发现了中国IBS-D患者粪便中的优势菌属为普雷沃氏菌属,其在IBS的发病机制和诊治中可能发挥重要作用。第二部分感染后肠易激综合征小鼠模型建立及菌群分析背景及目的部分IBS患者症状出现于急性肠道感染之后,因此提出感染后肠易激综合征(post-infectious irritable bowel syndrome,PI-IBS)的概念,本实验使用旋毛虫肠道急性感染后小鼠肠易激综合征模型,通过QPCR的方法对其肠道菌群进行分析,进一步验证肠道菌群在IBS致病中的作用。方法构建PI-IBS小鼠模型,评估其内脏高敏感性及肠道炎症状况,通过QPCR法对肠道内特定细菌含量进行检测,分析其与健康对照小鼠分布差异。结果PI-IBS小鼠内脏敏感性较正常小鼠增高(P0.05),QPCR结果显示PI-IBS小鼠肠道内普雷沃氏菌属增加(P0.05),而双歧杆菌属、乳酸杆菌属、拟杆菌属、大肠杆菌数量与正常对照组无统计学差异。结论PI-IBS小鼠肠道内中普雷沃氏菌属增加,其余菌属无变化,其在IBS致病中的作用值得深入探究。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R574

【参考文献】

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1 李晓青;常敏;许东;方秀才;;中国肠易激综合征流行病学调查现状分析[J];胃肠病学和肝病学杂志;2013年08期

2 王红妹,李鲁,沈毅;中文版SF-36量表用于杭州市区居民生命质量研究[J];中华预防医学杂志;2001年06期

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本文编号：1144597