谷氨酰胺对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制探讨

发布时间：2017-11-07 08:17

  本文关键词：谷氨酰胺对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制探讨

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【摘要】：目的谷氨酰胺是肠上皮细胞、巨噬细胞和淋巴细胞最易利用和最重要的能源物质,是抗氧化防御系统中谷胱甘肽和核苷酸等合成的前体。本研究旨在探讨谷氨酰胺预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的护作用及其对Nrf2/ARE信号通路的影响。方法将30只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组),缺血再灌注组(I/R组),谷氨酰胺预处理组(GLN组),每组10只,术前7天分别给予相应处理。GLN组给予GLN lg/kg/d连续灌胃7天。Sham组和I/R组以1g/kg/d NS灌胃7天。Sham组仅分离肠系膜上动脉(SMA)但不夹闭SMA根部。I/R组和GLN组均用无损伤血管央夹闭SMA根部,30min后松开血管夹建立缺血再灌注损伤模型。各组大鼠于建模后24 h采集静脉血和回肠标本。检测血清D-乳酸、内毒素、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平；HE染色法观察肠组织病理损伤情况；透射电镜观察细胞间的机械屏障的变化；免疫组织化学方法检测大鼠肠组织occludin、Nrf2、HO-1蛋白的表达；Western blot检测occludin蛋白的表达情况；荧光定量PCR方法检测Nrf2、HO-1的mRNA表达。结果(1)再灌注后,与Sham组相比,Ⅰ/R组肠粘膜上皮缺失,腺体水肿,间隙增宽,腺体排列紊乱,部分绒毛顶端出血。occludin蛋白水平明显下降；GLN组表现为肠黏膜腺体形态大致,绒毛上皮下间隙轻度扩大,腺体轻度水肿,固有层轻度水肿,occludin蛋白水平明显升高。Ⅰ/R组大鼠血浆D-乳酸、内毒素水平较Sham组均明显升高(P0.05),提示大鼠在肠缺血再灌注状态过程中降低肠黏膜屏障功能,提高肠黏膜通透性,并出现内毒素血症；而GLN组血浆D-乳酸、内毒素水平较对照组显著降低(P0.05),保护肠粘膜免受损伤,降低内毒素血症的发生及细菌移位。说明谷氨酰胺可以减轻Ⅱ/R造成的肠黏膜屏障功能损伤。(2)再灌注后,Ⅰ/R组血清中MDA水平高于假手术组和GLN组,血清中SOD及GSH-Px水平均低于Sham组和GLN组；而Ⅰ/R组及GLN组Nrf-2、HO-1蛋白含量及mRNA水平均明显高于Sham组。说明谷氨酰胺对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用可能是通过抑制氧化应激,激活Nrf2/ARE信号通路而实现的。结论(1)谷氨酰胺对大鼠肠缺血再灌注大鼠有保护作用,降低内毒素血症的发生及细菌移位。(2)谷氨酰胺通过激活Nrf2/ARE信号通路,进一步抗氧化应激,从而对大鼠肠缺血再灌注损伤起到保护作用。
【学位授予单位】：滨州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R574

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本文编号：1151583