ω-3鱼油脂肪乳对肝细胞氧化损伤的修复作用及其机制

发布时间：2017-11-24 16:24

  本文关键词：ω-3鱼油脂肪乳对肝细胞氧化损伤的修复作用及其机制

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【摘要】：目的观察ω-3鱼油脂肪乳对肝细胞氧化损伤的修复作用,并探讨其机制。方法体外培养人肝细胞系HL7702细胞。取对数生长期的HL7702细胞分成对照组、模型组和观察组,每组9孔。对照组仅加培养基常规培养;模型组、观察组在培养基中加入500μmol/L过氧化氢(H_2O_2),培养1 h后观察组加入0.5%ω-3鱼油脂肪乳;另设空白对照组,只加培养基,无细胞。各组继续培养4 h后收集细胞,油红O染色观察各组细胞内脂滴变化,CCK-8法测算各组细胞存活率,DCFH-DA荧光探针法检测各组细胞内活性氧簇(ROS),比色法检测各组细胞培养上清液丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),COD-PAP单试剂比色法检测各组细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),硫代巴比妥酸法检测各组细胞内丙二醛(MDA),黄嘌呤氧化酶法检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD),实时荧光定量PCR法检测各组细胞中过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)αmRNA,Western blotting法检测各组细胞中肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)相对表达量。结果光镜下可见脂滴染为橘红色。对照组组HL7702肝细胞排列紧密,仅见少许橘红色脂滴。模型组肝细胞可见大量橘红色脂滴并伴有脂滴融合现象。观察组肝细胞可见较多橘红色脂滴,但与模型组比较显著减少。对照组、模型组、观察组细胞存活率分别为67.25%±4.68%、71.72%±2.47%、100%。观察组细胞存活率高于模型组(P0.05),但低于对照组(P0.05)。与对照组比较,模型组细胞内ROS增高(P0.05),细胞培养上清液ALT、AST增高(P均0.05),细胞内TG、TC、MDA增高(P均0.05),细胞内SOD降低(P0.05),PPARαmRNA降低(P0.05),L-FABP相对表达量降低(P0.05)。与模型组比较,观察组细胞内ROS降低(P0.05),细胞培养上清液ALT、AST均降低(P均0.05),细胞内TG、TC、MDA均降低(P均0.05),细胞内SOD活性增高(P0.05),PPARαmRNA增高(P0.05),L-FABP相对表达量增高(P0.05)。结论ω-3鱼油脂肪乳可修复人肝HL7702细胞氧化损伤,其机制可能与其上调LFABP/PPARα信号通路相关因子的表达、维持肝细胞脂质稳态有关。
【作者单位】： 贵州医科大学;
【基金】：贵州省国际科技合作计划项目(20137023)
【分类号】：R575
【正文快照】： 人机体内正常情况下活性氧的产生和清除处于动态平衡。当内源性或外源性的刺激破坏平衡后可致活性氧大量生成。当活性氧超过机体抗氧化系统清除能力时,会引起细胞DNA氧化损伤及细胞内蛋白质表达异常,并产生细胞毒效应,最终对机体造成不可逆的损伤[1,2]。肝脏细胞的氧化损伤在

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