应用肠神经消融术建立功能性便秘大鼠动物模型

发布时间：2017-11-25 10:03

  本文关键词：应用肠神经消融术建立功能性便秘大鼠动物模型

  更多相关文章： 慢传输型便秘 出口梗阻型便秘 混合型便秘 动物模型苯扎氯铵 肠神经系统

【摘要】：功能性便秘是一种临床常见的慢性疾病,病因未明,根据患者肠道动力、肛门直肠的功能状态改变可将其分为3型:结肠慢传输型、排便功能障碍型(出口梗阻型)以及混合型便秘。美国、西班牙等欧美国家总体发病率高达6%-28%,其中50%的患者为混合型便秘,即同时存在结肠运输功能减弱和直肠肛门功能障碍。目前,其发病病因、病理生理变化尚不完全明确,同时缺乏一种较为满意的动物模型以模拟其病理生理的改变。本研究拟利用肠神经节消融术建立慢传输型便秘模型以及同时存在结肠慢传输和出口梗阻情况的混合型便秘模型,共分为两部分。第一部分:应用肠神经消融术建立慢传输型便秘大鼠模型目的:通过部分消融结肠神经节创新建立一种大鼠慢传输型便秘模型。方法:选用S-D雌性大鼠,5-6周龄,随机分为正常对照组、假手术组、实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,正常对照组不做处理,假手术组及实验组大鼠在麻醉下,通过腹腔手术分别给予生理盐水及0.05%、0.1%、0.25%、0.5%苯扎氯铵溶液处理全结肠30min。术后2周开始记录各组大鼠相关指标,包括进食量、体重、24h排便粒数、24h粪便干重、胃肠传输时间,通过HE染色、免疫组化染色、Elisa、Western Blot等方法对结肠病理改变、肠道神经细胞、Cajal间质细胞、神经递质(5-HT)浓度及肠道细胞凋亡情况进行评价。结果:实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ与正常对照组、假手术组相比胃肠运输时间明显延长(P0.05),且与苯扎氯铵浓度正相关。HE及免疫组化染色出现肠道神经细胞、Cajal间质细胞减少,凋亡增加等不同程度病理改变,符合慢传输型便秘病理改变,实验组Ⅲ结肠5-HT浓度较其他各组显著降低(P0.01)。结论:本研究采用0.25%苯扎氯铵消融结肠神经节成功构建结肠慢传输型便秘动物模型,该模型制作简单、病理改变稳定且更符合慢传输型便秘的病理改变。第二部分:应用肠神经消融术建立混合型便秘大鼠模型目的:应用肠神经消融术部分消融结肠、直肠神经节建立一种既往无文献报道的混合型便秘大鼠模型。方法:选用S-D雌性大鼠,5-6周龄,随机分为假手术组、慢传输组、出口梗阻型组、混合型便秘组,在腹腔注射麻醉下,假手术组、慢传输型便秘组通过腹腔手术分别给予生理盐水、0.25%处理全结肠;出口梗阻组、混合型便秘组分别给予浓度为0.5%苯扎氯铵溶液处理直肠,1周后,混合型便秘组行开腹手术,给予浓度为0.25%苯扎氯铵处理全结肠。2周后检测各组大鼠进食、体重、排便重量、排便粒数、粪便干湿比、胃肠传输时间,并通过HE染色、免疫组化染色、Elisa及Western Blot等方法对结肠的组织病理改变进行评价。结果:混合型便秘组大鼠排便明显减少,结肠粪便潴留,呈巨结肠改变,结肠运输时间较假手术组明显延长,与假手术组存在显著差异(P0.05),且存在肠道神经细胞、Cajal间质细胞减少,凋亡增加,神经递质(5-HT)分泌减少(P0.05)。结论:本研究采用0.25%联合0.5%苯扎氯铵消融结肠及直肠神经节成功构建混合型便秘动物模型,该模型制作方法简单、病理改变稳定且较为符合混合型便秘的病理改变。
【学位授予单位】：南京大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R574.62;R-332

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