从氧化应激反应研究血塞通对非酒精性脂肪肝的防治作用

发布时间：2017-11-25 12:02

  本文关键词：从氧化应激反应研究血塞通对非酒精性脂肪肝的防治作用

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【摘要】：目的：复制非酒精脂肪肝大鼠模型。探析非酒精性脂肪肝与氧化应激反应关系；探讨血塞通对非酒精性脂肪肝模型大鼠的防治作用。方法：1、动物分组：将40只雄性清洁级SD大鼠称重,按照体重大小编号,根据随机数字表将大鼠随机分为4组,每组10只。即正常组10只、模型组10只、维生素C组10只、血塞通组10只。2、模型制备：正常组以普通饲料喂养,其余三组以高脂饲料喂养(配方：88%普通饲料+10%猪油+2%胆固醇)。喂养从第1周开始持续到第12周末结束。3、分组给药：正常组和模型组均以0.9%生理盐水进行灌胃,维生素C组和血塞通组分别予以维生素C和血塞通灌胃。灌胃时间从第1周开始至第12周末结束。4、指标观察：各组大鼠每周称重一次;12周末处死大鼠后,分别检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肝组织总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。制作肝组织石蜡切片并进行HE染色。采用酶联免疫吸附法测定(ELISA法)检测各组大鼠肝组织中腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)含量；黄嘌呤氧化酶法测定各组大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)含量；实时荧光定量PCR(Quantitative real-time-PCR)检测各组大鼠肝组织中转化生长因子p1(TGF-β1)表达量。结果：1、正常组大鼠体重正常,毛色光亮,相对活泼。模型组大鼠体重增长明显,与正常组比,差异有统计学意义(p0.05)。2、肝组织HE染色：正常组肝细胞大小均匀,细胞核清晰呈圆形,肝索有规律的呈放射状排列；模型组可见肝细胞内有大量的脂肪空泡,胞浆疏松呈网状,部分胞浆几乎完全透明,肝索排列紊乱；血塞通组肝细胞中亦出现一定量的圆形脂滴空泡,但面积小于模型组。3、血清生化：与正常组比,模型组血清ALT、AST均升高,差异有统计学意义(p0.05),并且肝组织TC、TG均升高,差异有统计学意义(p0.05)；与模型组比,血塞通组血清ALT、AST均降低,差异有统计学意义(p0.05)并且肝组织TC、TG均降低,差异有统计学意义(p0.05)。4、肝组织中SOD活性含量：与正常组相比,模型组肝组织SOD活性含量降低,差异有统计学意义(p0.05)；与模型组比,血塞通组肝组织SOD活性含量升高,差异有统计学意义(p0.05)5、肝组织中ATP含量：与正常组相比较,模型组肝组织中ATP含量在显著降低,差异有统计学意义(p0.01)；与模型组比较,血塞通组肝组织中ATP含量显著升高,差异有统计学意义(p0.01)。6、肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA水平相对表达量：与正常组比,模型组肝组织TGF-β1相对表达量显著升高,差异有统计学意义(p0.05)：与模型组比,血塞通组肝组织TGF-β1相对表达量显著降低,差异有统计学意义(p0.05)。结论：1采用配方为88%普通饲料+10%猪油+2%胆固醇的高脂饲料可成功复制非酒精性脂肪肝大鼠模型。2非酒精性脂肪肝大鼠模型肝组织中SOD含量降低,表明在非酒精性脂肪肝的发生发展中存在氧化应激反应。3模型组肝组织中ATP含量降低,表明在非酒精性脂肪肝发生过程中出现线粒体损伤,而过量的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)会对线粒体造成损伤。血塞通组肝组织中ATP含量升高,表明血塞通可以改善氧化应激对线粒体的损伤。4肝组织中TGF-β1相对表达量在非酒精性脂肪肝大鼠模型中有所增加,表明TGF-β1对肝细胞造成损伤的途径可能是通过氧化应激反应,此结果尚需进一步验证。5血塞通可减轻高脂饲料诱导的非酒精性脂肪肝模型大鼠脂肪变性程度,降低TGF-β1的表达量,同时改善氧化应激及脂质过氧化,对非酒精性脂肪肝起到防治作用。
【学位授予单位】：云南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R575.5

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