NLRC5对HepaG2.2.15细胞表面MHC-Ⅰ分子表达水平的调控研究

发布时间：2018-02-26 17:00

  本文关键词： 乙肝病毒 HepG2.2.15 NLRC5 主要组织相容性复合物1　出处：《泸州医学院》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：通过对核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族（Nucleotide-binding oligomerization domain receptors,NOD-like receptors, NLRs）中C5（Caspase recruitment domain5,CARD5）型受体在稳定转染HBV人肝癌细胞株（HepG2.2.15）中的表达调控，观察该细胞表面分子主要组织相容性复合体1（major histocompatibility complex1，MHC-I）的表达。方法：1.观察NLRC5和MHC-I在HepG2、HepG2.2.15细胞株的表达情况；通过质粒转染HepG2.2.15过表达NLRC5，，观察对MHC-I的表达调控。采用反转录聚合酶链锁反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）,免疫印迹试验（Western-blot）及流式细胞术检测NLRC5和MHC-Ⅰ的基因和蛋白表达水平。2.实验分组，按照细胞及干预因子不同分为7组： A组为仅培养HepaG2细胞（空白对照组）；B组为HepaG2+IFN-γ组；C组为仅培养HepaG2.2.15； D组为HepaG2.2.15+IFN-γ组； E组为HepaG2.2.15+pcDNA3.1-NLRC5；F组为HepaG2.2.15+pcDNA3.1；G组为HepaG2.2.15+pcDNA3.1-NLRC5+来霉素B（LMB）。结果：1. NLRC5和MHC-Ⅰ在HepaG2.2.15细胞中，其基因和蛋白水平表达较HepaG2明显降低（P0.05）；2.在HepaG2.2.15细胞中，转染质粒过表达NLRC5后，可上调MHC-Ⅰ的表达；3. IFN-γ可诱导NLRC5在HepG2、HepG2.2.15细胞株的表达。结论：1.HBV感染能够明显下调HepG2细胞NLRC5及MHC-Ⅰ表达；2.在HepG2.2.15细胞中，NLRC5可正调控MHC-Ⅰ的表达；3. IFN-γ可诱导NLRC5在HepG2、HepG2.2.15细胞株的表达。
[Abstract]:Aim: to regulate the expression of nucleotide-binding oligomerization domain receptor (NLRs) in nucleleotide-binding oligomerization domain receptor (NLRs) in stable transfection of HBV human hepatocellular carcinoma cell line HepG2.2.15. The expression of major histocompatibility complex1MHC-I) on the cell surface was observed. Methods: 1. The expression of NLRC5 and MHC-I in HepG2.2.15 cell line was observed. The expression and regulation of HepG2.2.15 were observed by plasmid transfection with HepG2.2.15. Reverse transcription-polymerase chain reactionation was used to detect the gene and protein expression levels of NLRC5 and MHC- 鈪

本文编号：1538882