22介导的STAT3信号通路对小鼠急性重症胰腺炎的保护作用研究

发布时间：2016-11-11 10:49

  本文关键词：IL-22介导的STAT3信号通路对小鼠急性重症胰腺炎的保护作用研究，，由笔耕文化传播整理发布。

《山东大学》 2015年

IL-22介导的STAT3信号通路对小鼠急性重症胰腺炎的保护作用研究

白金霞  

【摘要】：目的急性重症胰腺炎(acute severe pancreatitis, SAP)是临床常见急危重症之一,以病情进展快、并发症多、病死率高为特点。因其确切发病机制尚不明确,目前治疗方案多为对症处理,缺乏特异性的治疗。IL-22作为一种保护因子,在多种原因引起的肝脏、肺脏、肠道损伤等动物模型中,发挥着组织修复,维持内环境稳态的重要作用。本实验拟采用腹腔注射大剂量左旋精氨酸的方法制备小鼠SAP模型,并通过给予外源性重组IL-22,对其在小鼠SAP中的作用及机制进行初步探讨。方法60只雄性Balb/c小鼠随机分成正常对照组(NaCl组)、急性重症胰腺炎组(SAP组)、PBS治疗组(PBS组)和rIL-22治疗组(rIL-22组)。NaCl组(10只)：注射等量0.9% NaCl; SAP组(30只)：采用8%左旋精氨酸(pH=7.0)按4 g/kg体质量分2次腹腔注射；PBS组(10只)：在左旋精氨酸造模前后应用PBS(200 ng/次×5次)在相应时间点进行腹腔注射；rIL-22组(10只)：在左旋精氨酸造模前后应用rIL-22(200 ng/次×5次)在相应时间点进行腹腔注射。光镜下观察各组胰腺组织病理学改变,检测各组血清淀粉酶变化。Real-time PCR法检测各组胰腺组织中Reg3β、Reg3γ、Bcl-2、Bcl-xL和IL-22RA1 mRNA表达水平的变化。Western blotting方法检测各组胰腺组织STAT3和P-STAT3蛋白的表达情况。并统计PBS组和rlL-22组的死亡率。结果1.各组胰腺组织病理学改变NaCl组胰腺组织结构清晰,细胞形态完整,无炎症细胞浸润；SAP组,24 h可见胰腺间质水肿,少量炎症细胞浸润,胰腺小叶呈小片状破坏,腺泡细胞坏死多发生在小叶边缘,到72h时仅见少数正常胰腺小叶呈孤岛状分布,大部分腺泡细胞被破坏,出现大片坏死区,大量炎症细胞浸润；rIL-22组小鼠胰腺水肿、坏死、炎症细胞浸润均较PBS组明显减轻。2.各组小鼠血清淀粉酶活性的变化NaCl组小鼠血清淀粉酶在正常范围；SAP组小鼠血清淀粉酶活性随时间推移呈现先升高后降低的趋势。rlL-22组小鼠血清淀粉酶较PBS组显著下降(P0.05)。3.治疗组死亡率PBS组小鼠,死亡率达30%；rlL-22组小鼠无死亡(P0.05)。4.胰腺组织Reg3β、Reg3γ、Bcl-2、Bcl-xL、IL-22RA1 mRNA表达的变化SAP组各时间点Reg3p和Reg3γ、Bcl-2和Bcl-xLmRNA的表达水平均低于NaCl组,并随时间延长,表达量逐渐下降。IL-22RA1 mRNA的表达在各时间点均较NaCl组升高。与PBS组相比,rlL-22组胰腺组织各基因的表达水平明显升高(P0.05)。5.胰腺组织磷酸化STAT3以及总STAT3表达水平变化与PBS组相比,IL-22组胰腺组织磷酸化STAT3呈高表达。两组总STAT3表达水平无明显差异。但磷酸化STAT3与总STAT3的比值有统计学差异(P0.05)。结论1.大剂量左旋精氨酸成功诱导了小鼠SAP模型。2.外源性重组IL-22通过激活STAT3信号通路增加抗菌肽和抗凋亡基因的表达,减轻左旋精氨酸诱导的小鼠SAP。

【关键词】：
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R576
【目录】：

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本文编号：170708