自身免疫性肝炎小鼠IL-17和Foxp3的表达及其意义

发布时间：2018-06-11 21:33

  本文选题：自身免疫性肝炎 + IL-17　； 参考：《天津医科大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的： 观察自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)小鼠白介素-17(interleukin-17,IL-17)和叉头状转录因子3(forkhead transcription factor, Foxp3)在肝脏及肠道的表达情况,并在此基础上探讨AIH小鼠肝脏与肠道免疫损伤的关系以及辅助性T细胞17型(T help cell17, Th17)和CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory CD4+CD25+T cells, Tregs)在AIH发生发展中的作用。 方法： 1.造模雌性Balb/c小鼠6-7周龄,共12只,随机分为实验组(6只)与对照组(6只)。实验组小鼠经尾静脉注射刀豆蛋白A (Con A)12.5mg/kg,每周一次,连续注射4周；对照组不作处理,两组饲养环境相同。 2.4周后处死小鼠并取其肝脏及小肠组织标本速冻,采用RT-PCR方法检测IL-17及Foxp3在肝脏及小肠的表达情况；取肝脏及小肠组织经10%甲醛固定,常规包埋、切片后行苏木精-伊红(HE)染色病理检查及免疫组织化学染色检测IL-17、Foxp3表达情况。 3.比较分析实验组及对照组肝脏及小肠组织IL-17、Foxp3表达情况,对比两组小鼠肝脏及小肠炎症情况,探讨IL-17和Foxp3在AIH发病过程中的作用。 4.所有资料应用SPSS18.0统计软件进行统计学分析,以P0.05为差异有统计学意义。 结果： 1.成功建立小鼠AIH实验动物模型。实验组小鼠肝脏HE染色显示肝脏组织的炎症反应主要表现为大量的淋巴细胞以及少量的中性粒细胞的浸润,肝小叶结构明显破坏,出现肝细胞水肿、气球样变、点状坏死甚至碎片状坏死等表现；而对照组肝组织结构基本正常。 2. RT-PCR结果显示,实验组小鼠肝组织中IL-17mRNA基因的表达明显高于对照组(3.79±0.90VS1.00±0.00),差异有统计学意义(P0.05)；实验组小鼠肝组织中的Foxp3mRNA基因的表达明显低于对照组(0.13±0.03VS1.00±0.00),差异有统计学意义(P0.05)； 3. RT-PCR结果显示,实验组小鼠小肠组织中IL-17mRNA基因的表达明显高于对照组(4.32±1.00VS1.00±0.00),差异有统计学意义(P0.05)；实验组小鼠小肠组织中的Foxp3mRNA基因的表达明显低于对照组(0.21±0.13VS1.00±0.00),差异有统计学意义(P0.05)。 4.病理组织切片HE染色发现,实验组小肠组织病理评分为中重度炎症表现,对照组为无到轻度炎症表现。 5.免疫组织化学染色显示,实验组小鼠肝组织及小肠组织中IL-17的表达明显上调,而对照组肝组织及小肠组织中没有或仅有少量IL-17表达(肝中评分4.83±1.17VS0.33±0.52；小肠中评分6.83±1.17VS0.67±0.52)；对照组小鼠肝组织及小肠组织中可见散在分布的Foxp3表达,而实验组小鼠肝组织及小肠组织中虽有大量淋巴细胞浸润,但表达的Foxp3明显少于对照组,且染色变浅(肝中评分0.50±0.84VS1.83±0.75；小肠中评分1.17±0.75VS5.17±1.47)。 6.相关性分析结果显示：肝组织和小肠组织中IL-17mRNA表达呈正相关(r=0.903,P0.05)；肝组织和小肠组织中Foxp3mRNA表达呈正相关(r=0.973,P0.05)。 结论： 1.AIH小鼠肝组织中IL-17表达显著升高,提示Th17上调；AIH小鼠肝组织中Foxp3表达显著降低,提示Tregs下调。 2.AIH小鼠小肠组织中IL-17表达显著升高,提示Th17上调；AIH小鼠小肠组织中Foxp3表达显著降低,提示Tregs下调。 3.AIH小鼠肝组织和小肠组织Th17上调趋势一致,AIH小鼠肝组织和小肠组织Tregs下调趋势一致,提示肝脏免疫损伤和肠道免疫损伤之间存在某种关系,但具体机制未明,有待进一步研究。 4.Th17和Tregs表达失衡可能是肝脏和肠道免疫炎症损伤的重要因素,在AIH的发生发展过程中具有重要作用,重建这一平衡可能延缓AIH的进展。
[Abstract]:Objective:
To observe the expression of interleukin -17 (interleukin-17, IL-17) and fork head transcription factor 3 (forkhead transcription factor, Foxp3) in the liver and intestines of autoimmune hepatitis (AIH) mice, and to explore the relationship between liver and intestinal immune damage in AIH mice and the auxiliary T cells type 17. 17, Th17) and CD4+CD25+ regulatory T cells (regulatory CD4+CD25+T cells, Tregs) play an important role in the development of AIH.
Method锛，

本文编号：2006767