非酒精性脂肪肝横断面调查及清热祛湿化瘀法干预的脂肪因子机制

发布时间：2018-06-24 21:30

本文选题：非酒精性脂肪肝 + 清热祛湿化瘀法　；参考：《北京中医药大学》2014年博士论文

【摘要】：非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是环境、遗传及代谢应激性肝损伤临床综合征,包括非酒精性单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)、非酒精性脂肪性肝硬化及相关肝癌。随着人们膳食结构和生活方式改变,NAFLD发病率逐年增高而成为全球性公共卫生问题。中医药治疗NAFLD具有整体与个体化疗效优势,中西医结合论治则能实现优势互补。本研究通过对NAFLD中西医临床论治与脂肪因子机制进展整理总结,探讨NAFLD肝纤维化中医理论源流与多维度辨治,基于对清热埅湿化瘀法立方的四合汤拆方组分行系统评价与Meta分析,整合文献综述、理论探讨、循证医学、临证经验基础上,采用流行病学调查NAFLD中医病-体-证规律,并应用清热祛湿化瘀法干预NAFLD大鼠探讨其疗效的脂肪因子机制,从而促进中医药防治NAFLD。目的：研究NAFLD中医病-体-证规律及清热祛湿化瘀法干预的脂肪因子机制。方法：通过国内外文献分析,综述NAFLD中西医临床论治与脂肪因子机制最新进展;通过理论溯源,探讨NAFLD肝纤维化中医理论源流与多维度辨治途径;通过系统评价与Meta分析,对清热祛湿化瘀法立方的四合汤拆方组分行循证评价;采用横断面流行病学调查方法,研究NAFLD患者中医病-体-证规律;通过高脂饲料喂养复制NAFLD大鼠模型,应用清热祛湿化瘀法干预,探讨其疗效的脂肪因子机制。结果： 1、NAFLD中医论治包括中医内治、外治以及名老中医独到经验等方面,注重辨证与综合论治;西医治疗并无直接针对性药物,而旨在注重预防,中西医结合可优势互补,促进构筑NAFLD三级预防体系。 2、肝纤维化是NAFLD重要病理过程,先秦时期可从腹部疾病管窥肝纤维化的中医雏形认识,秦汉时期对肝纤维化经典阐析包括病名、病位、病因、病机、治则等,魏晋隋唐以降流派争鸣,至此肝纤维化中医理论体系初步疏通,将促进中医药防治NAFLD。中医可从多维度对NAFLD进行有效辨治,包括辨因、辨机、辨性、辨症、辨病、辨体、辨证论治,从而拓宽辨治体系,发挥以中医思维主导的疗效优势。 3、对清热祛湿化瘀法立方的四合汤拆方组分行系统评价与Meta分析,纳入随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)的方法学质量均属于高偏倚风险,均未报告主要终点,而仅报告次要终点。其中柴胡疏肝散纳入10个RCT合计802例NAFLD受试者,对次要终点行Meta分析结果显示：含柴疏肝散组治疗后TC、LDL、HOMA-IR、 ALT、AST、GGT、TBiL、ALP、HA、LN、PCⅢ、PCIV、肝脏B超积分改善效果及总有效率、胁胀改善率、腹胀改善率优于对照组。茵陈蒿汤纳入14个RCT合计1214例NAFLD受试者,对次要终点行Meta分析结果显示：含茵陈蒿汤加减组治疗后ALT、AST、GGT、TG、TC、LDL、证候积分改善效果及总有效率、证候有效率、B超有效率优于对照组。甘草有效组分纳入28个RCT合计2260例NAFLD受试者,对次要终点行Meta分析结果显示：含甘草有效组分组治疗后AST、ALT、GGT、TBiL、TBA、 TG、TC、FBG、2hPG、HOMA-IR、CRP、TNF-α改善效果及总有效率、症状改善率、B超改善率优于对照组。 4、流行病学调查共纳入98例NAFLD患者,分析显示年龄平均(60.9±14.7)岁,病程平均(2.7±3.0)年,BMI平均为(24.5±3.5)Kg/m2。肝脏B超分级属于轻度占79.6%,中度占14.3%,重度占6.1%;其中伴有高血压占43.9%,冠心病占22.4%,糖尿病占19.4%,血脂异常占18.4%,脑血管病占17.3%。患者肝功、血脂、凝血、炎症指标整体水平基本属于正常范围内。体质判别属于痰湿质占34.7%,湿热质占16.3%,血瘀质占16.3%,气郁质占10.2%,阳虚质占6.1%,平和质占6.1%,气虚质、湿热质+血瘀质各占3.1%,痰湿质+气郁质、气虚质+血瘀质、气虚质+阴虚质、阴虚质各占1.0%。辨证属于痰湿内阻证占31.6%,湿热蕴结证占23.5%,痰瘀互结证占20.4%,湿浊内停证占13.3%,肝郁气滞证占8.2%,肝郁脾虚证占3.1%。 5、(1) NAFLD造模至第6周对照组和模型组大鼠每周体重变化相比较,除第2周外差异基本上无统计学意义(P0.05);干预期间各组大鼠每周体重变化相比较,差异均无统计学意义(P0.05)。于第9周随机选取各组2-3只大鼠,观察比较舌象,显示正常大鼠舌润红,模型组大鼠舌质红兼有瘀斑及舌体胖大,中药低剂量组大鼠舌质红兼有瘀点,中药中剂量组大鼠舌质暗红,中药高剂量组大鼠舌质暗淡。中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组.模型组大鼠肝脏湿重和肝指数与正常对照组比较差异均具有显著的统计学意义(P0.01),中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、模型组之间大鼠肝脏湿重和肝指数比较差异无统计学意义(P0.05)。各组大鼠肾周和附睾脂肪重量及体脂比比较差异均无统计学意义(P0.05),各组大鼠Lee's指数差异无统计学意义(P0.05)。肉眼观察肝脏形态显示,模型组肝脏形态明显增大,重量显著增加,呈苍白色,包膜紧张,表面粗糙,油腻感,边缘圆钝,质地软,与周围组织显著粘连,肾周和附睾周围含有大量脂肪组织;四合汤干预组可使肝脏形态明显改善,以中药中剂量组改善效果为佳。HE染色结果显示,模型组肝脏组织重度脂肪变性积聚,肝索结构紊乱,肝细胞气球样变,肿胀变形,胞浆见大量脂滴,胞核偏位,大量炎性细胞聚集,小叶内见坏死灶；四合汤干预组可使肝脏HE病理明显改善,以中药高剂量组改善效果为佳。Masson染色结果显示,模型组可见汇管区、汇管区周围、窦周纤维化,纤维间隔内纤维组织增生明显,有炎细胞浸润,但未形成假小叶;四合汤干预组可使肝脏Masson病理明显改善,以中药高剂量组改善效果为佳。油红O染色结果显示,模型组肝组织见片状红色区域,肝细胞内大量脂滴,肝小叶内含脂滴细胞数／总细胞数约为70-90%;四合汤干预组可使肝脏油红O病理明显改善,以中药高剂量组改善效果为佳。(2)清热祛湿化瘀法干预NAFLD大鼠,结果显示中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠、正常对照组之间大鼠血清ALT、AST肝功比较,差异均无统计学意义(P0.05)。中药低剂量组大鼠血清HDL与正常对照组比较,中药中剂量组、中药高剂量组大鼠血清LDL与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05);中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠、正常对照组之间大鼠血清TC、TG比较,差异均无统计学意义(P0.05)。中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠、正常对照组之间大鼠血清FBG、ISI比较,差异无统计学意义(P0.05)。各组FINS、IRI差异均无统计学意义(P0.05),但经平均秩次分析提示FINS水平由高到低依次为中药高剂量组、中药低剂量组、中药中剂量组、正常对照组、模型组。中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠、正常对照组之间大鼠血清AFP、C-P比较,差异均无统计学意义(P0.05)。 (3)模型组、中药中剂量组、中药低剂量组大鼠肝脏AdipoR2表达均较正常对照组低,中药高剂量组大鼠肝脏AdipoR2表达较模型组高,中药高剂量组大鼠肝脏AdipoR2表达较中药低剂量组高,中药高剂量组大鼠肝脏AdipoR2表达较中药中剂量组高,比较差异均有统计学意义(P0.05或0.01)。模型组、中药中剂量组、中药低剂量组大鼠肝脏AdipoR2/β-actin比值均较正常对照组低,中药高剂量组大鼠肝脏AdipoR2/β-actin比值较模型组高,中药高剂量组大鼠肝脏AdipoR2/β-actin比值较中药低剂量组高,中药高剂量组大鼠肝脏AdipoR2/β-actin比值较中药中剂量组高,比较差异均有统计学意义(P0.05或0.01)。模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组大鼠肝脏AdipoR1表达均较正常对照组低,中药中剂量组大鼠肝脏AdipoR1表达较模型组高比较差异均有统计学意义(P0.05)。模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组大鼠肝脏AdipoR1/β-actin比值均较正常对照组低,中药中剂量组大鼠肝脏AdipoR1/β-actin比值较模型组高,比较差异均有统计学意义(P0.05)。 (4)中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组NAFLD大鼠肝脏Visfatin浓度均较正常对照组高,中药中剂量组大鼠肝脏Visfatin浓度较模型组高,比较差异均有统计学意义(P0.05)。中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠肝脏APN浓度均较正常对照组高,中药低剂量组大鼠肝脏APN浓度较模型组低,中药高剂量组大鼠肝脏APN浓度较模型组高,中药高剂量组、中药中剂量组大鼠肝脏APN浓度均较中药低剂量组高,中药高剂量组大鼠肝脏APN浓度较中药中剂量组高,比较差异均有统计学意义(P0.01或0.05)。中药高剂量组、中药中剂量组、模型组大鼠肝脏LEP浓度均较正常对照组高,中药低剂量组大鼠肝脏LEP浓度较模型组低,中药高剂量组、中药中剂量组大鼠肝脏LEP浓度均较中药低剂量组高,中药高剂量组大鼠肝脏LEP浓度较中药中剂量组高,比较差异均有统计学意义(P0.01或0.05)。中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组大鼠肝脏Resistin浓度均较正常对照组高,中药高剂量组、中药中剂量组大鼠肝脏Resistin浓度均较模型组高,中药高剂量组大鼠肝脏Resistin较中药低剂量组高,中药高剂量组大鼠肝脏Resistin浓度较中药中剂量组高,比较差异均有统计学意义(P0.01或0.05)。模型组大鼠肝脏TNF-α浓度较正常对照组高,中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组大鼠肝脏TNF-α浓度均较模型组低,比较差异均有统计学意义(P0.01)。中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠肝脏IL-6浓度均较正常对照组高,中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组大鼠肝脏IL-6浓度均较模型组低,比较差异均有统计学意义(P0.01)。中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠肝脏PCⅢ浓度均较正常对照组高,中药低剂量组大鼠肝脏PCⅢ浓度较模型组低,中药高剂量组大鼠肝脏PCⅢ浓度较模型组高,中药中剂量组、中药高剂量组大鼠肝脏PCⅢ浓度均较中药低剂量组高,中药高剂量组大鼠肝脏PCⅢ浓度较中药中剂量组高,比较差异均有统计学意义(P0.01)。中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠肝脏CIV浓度均较正常对照组高,中药高剂量组大鼠肝脏CIV浓度较中药中剂量组、中药低剂量组、模型组高,比较差异均有统计学意义(P0.01或0.05)。中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组大鼠肝脏HA浓度均较正常对照组高,中药高剂量组大鼠肝脏HA浓度较中药中剂量组、中药低剂量组、模型组高,比较差异均有统计学意义(P0.01)。中药高剂量组大鼠肝脏LN浓度较正常对照组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组高,比较差异均有统计学意义(P0.01)。结论： 1、通过综述、理论探讨、系统评价与Meta分析,认为NAFLD的有效防治需要整合中医、西医以及循证证据等,实现中西医结合优势互补以防治NAFLD。 2、通过对NAFLD患者中医病症、体质、证候等方面进行横断面调查,大部分NAFLD患者肝功、血脂、生化、血常规等中医微观病证信息大致未见显著异常,提示尚无特异性指标针对NAFLD患者进行充分评价;综合NAFLD患者体质、证候调查结果表明本病以湿、热、痰、瘀四大证素为主,具体表现在痰湿质、湿热质、血瘀质三种体质及其兼夹体质,以及痰湿内阻证、湿热蕴结证、痰瘀互结证、湿浊内停证四类证型。 3、通过NAFLD大鼠模型,中药组给予清热埅湿化瘀法所立的四合汤分为中药低、中、高剂量组干预,与生理盐水干预的正常对照组、模型组相比较,结果提示NAFLD大鼠造模成功,四合汤干预NAFLD大鼠可有效改善肝脏病理形态,以中药高剂量组改善效果为佳;四合汤对大鼠NAFLD的治疗作用主要通过影响血清HDL, LDL实现,而对ALT、AST、TC、TG、FBG、IRI、ISI、AFF、C-P未有明显影响;NAFLD肝脏脂联素受体AdipoR2mRNA, AdipoRI mRNA表达均下降,四合汤可通过提高AdipoR2mRNA、AdipoR1mRNA表达以改善NAFLD其中以中药高剂量组提高AdipoR2mRNA表达和中药中剂量组提高AdipoR1mRNA表达效果为佳;NAFLD能诱使肝脏APN、 LEP、TNF-α、IL-6表达,四合汤干预能下调NAFLD大鼠肝脏TNF-α、IL-6表达,并能上调NAFLD大鼠肝脏Visfatin、APN、LEP、Resistin表达,其中以高剂量组上调肝脏APN、LEP、Resistin表达效果尤为显著,而中剂量组上调肝脏Visfatin表达效果尤为显著,低剂量组则可下调肝脏APN、LEP表达,故四合汤具有多靶点调控脂肪因子而改善NAFLD作用。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R575.5

【参考文献】