10基因干预对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的作用研究

发布时间：2016-12-06 16:26

  本文关键词：IL-10基因干预对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

《福建医科大学》 2013年

IL-10基因干预对CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的作用研究

郭杞兰  

【摘要】：目的: 1.构建CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型，观察肝窦毛细血管化的形成过程。 2.探讨IL-10基因干预对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的影响。 方法: 1.选用56只清洁级雄性SD大鼠，完全随机分为正常对照组（N组），肝纤维化模型组（M组），N组大鼠腹腔注射生理盐水2ml/kg，M组大鼠腹腔注射50%CCl4-蓖麻油混合液2ml/kg，均每周2次，共8周；分别于造模第3天、1周、2周、4周、6周、8周处死大鼠，收集肝组织和血清备用。HE染色、Masson染色观察肝组织炎症及纤维化程度，放射免疫法检测血清中HA的含量，透射电镜观察肝窦窦壁结构，S-P免疫组织化学检测各组大鼠肝脏CD31、LN、Col-IV的表达。 2．选用30只清洁级雄性SD大鼠,完全随机分为正常对照组（N组），肝纤维化模型组（M组），rIL-10质粒治疗组（I组），空质粒对照组（P组），造模方法同前（N组：生理盐水，M、I、P组：50%CCl4-蓖麻油混合液）；从第5周开始，N组和M组大鼠尾静脉注射林格氏液作为试剂对照，I组大鼠尾静脉注射pcDNA3-rIL-10质粒，P组大鼠尾静脉注射pcDNA3.0空质粒，均每周一次。所有大鼠于实验第8周末处死，收集肝组织和血清备用。生化检测血清ALT和AST的含量，HE染色、Masson染色观察肝组织炎症及纤维化程度，放射免疫法检测血清中肝纤维化相关指标（HA、LN、PCIII、Col-IV）的含量，透射电镜观察肝窦窦壁结构，S-P免疫组织化学检测各组大鼠肝脏CD31、LN、Col-IV的表达。 结果: 1.肝脏病理组织学证实CCL4诱导的大鼠肝纤维化模型构建成功，肝纤维化早期炎症细胞浸润、肝细胞变性坏死明显，中后期以胶原沉积、纤维间隔形成为主，仍见肝细胞变性坏死，炎症浸润不明显。 2.透射电镜及免疫组化结果表明，在肝纤维化过程中，肝窦毛细血管化是逐渐形成的，LSECs失窗孔明显早于纤维间隔的形成，而肝窦内皮下基底膜出现在纤维间隔形成以后。 3.经过IL-10基因干预后，与M组和P组比较，I组大鼠肝细胞变性坏死程度减轻，中央静脉周围炎症细胞浸润减少，胶原纤维沉积明显下降。I组血清ALT、AST、HA、LN、PCIII、Col-IV水平显著降低（P0.05），Masson染色显示肝组织胶原纤维沉积明显减少（P0.05）；透射电镜显示I组肝组织内胶原纤维沉积较前减少，，变薄，有窗孔视野多见，BM变得不连续、不明显，甚至部分视野可见窗孔，未见BM；免疫组化结果显示肝组织中CD31、LN、Col-IV表达显著降低（P0.05）。 结论:rIL-10基因干预能显著改善肝组织的炎症及纤维化程度，部分逆转肝窦毛细血管化的形成，IL-10抗肝纤维化作用与其能逆转、拮抗肝窦毛细血管化这一途径有关。

【关键词】：
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R575.2
【目录】：

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