化浊解毒平溃煎对溃疡性结肠炎大鼠TNF

发布时间：2016-12-18 01:47

  本文关键词：化浊解毒平溃煎对溃疡性结肠炎大鼠TNF-α、GLN及MCP-1的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《河北医科大学》 2014年

化浊解毒平溃煎对溃疡性结肠炎大鼠TNF-α、GLN及MCP-1的影响

董笑一  

【摘要】：目的： 本实验通过观察对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）大鼠的一般状态、病理学改变、疾病活动指数（DAI）评分、血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、谷氨酰胺（GLN）含量以及结肠组织中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响，分析化浊解毒平溃煎治疗UC的作用机制，为临床应用提供实验依据。 方法： 将60只清洁级健康雄性Wistar大鼠（体重250g-300g），适应性喂养7天后随机分为空白对照组（CK）、模型组（MG）、美沙拉嗪组（MSG）、化浊解毒平溃煎高剂量组（HDG）、化浊解毒平溃煎中剂量组（MDG）、化浊解毒平溃煎低剂量组（LDG）。每组10只，给予正常饮食饮水。除空白对照组外，其余5组采用2，4，6,-三硝基苯磺酸(2，4，6–trini-trobenzeneesulfonic acid,TNBS)致敏和乙醇诱导的复合灌肠法制造大鼠实验性溃疡性结肠炎模型。造模后第3天，CK组大鼠正常喂养，MG组大鼠给予0.9%氯化钠溶液灌胃，MSG组大鼠采用美沙拉嗪混悬液灌胃，其余中药治疗组采用相应药物灌胃。连续治疗2周，观察大鼠在各个时期的精神状态、体重、饮食饮水、粪便性状等情况。治疗结束后，各组大鼠禁食不禁水24h，断头法处死并取血，用放射免疫法检测血清TNF-α含量，生化法测GLN的含量，免疫组化法测MCP-1的表达。采血后快速剖腹，取出结肠，取肉眼观察病变明显的部位切取少许肠组织，进行常规固定，石蜡包埋及连续4um做病理切片，一部分进行HE染色后在光镜下观察结肠组织病理学改变，另一部分按免疫组化说明书操作，半定量法测定MCP-1的表达。 结果： 1大鼠的一般情况观察 NG组大鼠精神佳，，毛色光泽，饮食进水正常，活动佳，二便可，体重逐渐增加。其余5组大鼠造模后出现精神萎靡不振，嗜蜷卧，进食量及活动量显著减少，喜扎堆，体毛凌乱无光泽,并出现稀便，垫料污秽。MG组大鼠随实验天数增加可见症状逐渐加重,严重的大鼠肛周肉眼观察可见血便，称体质量均有不同程度的减轻。其余4组治疗组大鼠经药物干预后，大鼠的精神、皮毛色泽、活动状态、体重等一般状况均有好转，其中HDG大鼠好转最快，一般状况接近NG；MDG与MSG略差，但仍高于LDG,且MDG与MSG之间无明显差别；LDG大鼠比MG大鼠一般状况略好。 2DAI评分 疾病活动指数评分方面，各治疗组HDG(0.402±0.286)、MDG(0.892±0.362)、MSG(0.903±0.297)、LDG(1.328±0.255)与MG(2.489±0.245)比较，差异具有统计学意义（P0.05），其中MSG与MDG之间比较，差异无统计学意义（P0.05）。详见Table.3。 3结肠粘膜肉眼与组织病理学观察 肉眼观察MG情况最差，HDG接近CK组,MDG与MSG略好，且MSG好于MDG，LDG略好于MG。 组织病理学观察：NG粘膜光滑色泽正常，为正常粘膜；MG大鼠粘膜退变坏死，大量炎细胞弥漫浸润，充血、水肿，溃疡形成明显，LDG组次之。HDG大鼠肠粘膜基本完整，接近NG，MDG大鼠肠粘膜次于HDG，MSG介于HDG与MDG之间，好于LDG。详见附图Fig.1-Fig.6。 4血清TNF-α检测结果 与MG（2.69±0.42）比较，各治疗组大鼠血清TNF-α含量的差异具有统计学意义（P0.05）。HDG（1.34±0.04）低于MDG（1.68±0.05），差异有统计学意义（P0.05），MDG（1.68±0.05）略高于MSG（1.52±0.06）,差异不具有统计学意义（P0.05）。 5血清GLN含量检测结果 与MG（1.65±0.24）比较，各治疗组大鼠血清GLN含量的差异具有统计学意义（P0.05）；其中MDG（2.37±0.09）比MSG（2.24±0.05）值略高，但两者之间差异不具有统计学意义（P0.05）。CK（3.21±0.29）与各治疗组之间差异具有统计学意义（P0.05）。 6结肠组织MCP-1表达检测结果 与MG（0.33±0.10）比较，各治疗组大鼠MCP-1表达的平均光密度值均有降低，差异具有统计学意义（P0.05）；HDG（0.13±0.01）分别与MDG（0.15±0.02）、MSG(0.17±0.01)、LDG（0.20±0.01）比较差异有统计学意义（P0.05）；MSG与MDG之间比较无统计学意义（P0.05），LDG与MDG比较，差异具有统计学意义（P0.05）。详见Table.2。 结论： 1化浊解毒平溃煎能有效地改善UC大鼠的一般状况，降低DAI评分，减轻病理损伤，而且其疗效与该方剂剂量存在一定的量-效关系。 2化浊解毒平溃煎治疗UC的作用机制可能是通过降低促炎因子TNF-α含量，下调MCP-1在结肠组织中的表达水平，同时提高血清中GLN含量，以达到抑制炎性细胞浸润，修复受损肠粘膜的作用，从而有效治疗UC。

【关键词】：
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R574.62
【目录】：

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