我国标准三联方案对幽门螺杆菌根除疗效的Meta分析及新型抗菌药物TNP-2092抗幽门螺杆菌作用的体外研究

发布时间：2018-10-11 09:08

【摘要】：背景和目的:近年来随着抗生素的广泛使用,幽门螺杆菌(H.pylori)对抗生素的耐药率的上升,标准三联疗法的根除率逐年降低。虽然我国第四次H.pylori感染诊治共识推荐含铋剂四联方案代替标准三联方案作为H.pylori首选根除方案,但是缺乏高级别的循证医学证据支持。为此本文进行了标准三联方案在中国大陆用于根除H.pylori治疗的系统评价和meta分析,以期更全面的评价标准三联方案在中国大陆的疗效与安全性,同时为临床制定H.pylori根除方案提供高级别的循证医学证据。在我国共识推荐的6种常用抗菌药物中,甲硝唑,克拉霉素和左氧氟沙星耐药率高,四环素、阿莫西林和呋喃唑酮的耐药率较低,但是后3种抗菌药物中四环素和呋喃唑酮在有些地区不易获得,且四环素不能用于儿童,阿莫西林则被青霉素过敏所制约。以致在H.pylori高耐药地区可选用的抗生素非常有限。因此,研发新的抗H.pylori药物迫在眉睫。为此,本文研究了由利福霉素和喹诺酮两个药效团络合而成的新型的抗菌药物TNP-2092在体外的抗H.pylori作用,为其用于抗H.pylori治疗提供实验依据。方法:一、标准三联方案对H.pylori根除治疗的系统评价和meta分析:1.检索策略:对PubMed,Embase,the Cochrane Central Register of Controlled Trials,维普,中国知网数据库,中国生物医学文献数据库进行检索(截止到2013年11月),纳入对比了在中国内地使用标准三联方案和其他方案疗效的随机对照实验(RCT);检索词:英文数据库:“helicobacter pylori”,“amoxicillin”,“clarithromycin”,和“triple”。中文数据库:“幽门螺杆菌”,“阿莫西林”,“克拉霉素”以及“三联”。2.结局指标:标准三联组与对照组的根除率和不良发应发生率。3.统计分析:通过Comprehensive Meta-Analysis(2.0)软件进行meta分析。运用Mantel-Haenszel法进行效应量的合并。此外,根据年龄,疗程,对比组方案进行亚组分析。敏感性分析以及累积meta分析同样通过Comprehensive meta-analysis(2.0)软件完成。发表偏倚通过egger’stest,begg’stest和漏斗图进行评估。二、新型抗菌药物tnp-2092抗h.pylori作用的体外研究:1.tnp-2092体外药敏实验:选取100株临床分离菌株,采取琼脂稀释法测定tnp-2092的最小抑菌浓度(minimuminhibitoryconcentration,mic),并与tnp-2092所含的两个药效基团的抗菌药物左氧氟沙星、利福平,及当前常用的且h.pylori对其耐药率又相对较高的抗生素克拉霉素进行对比。2.tnp-2092的对于h.pylori的杀菌时间曲线配制含不同浓度tnp-2092(0,1/4mic,1/2mic,1mic,2mic,4mic,8mic,16mic,32mic,64mic)的布氏肉汤,取h.pylori标准菌株atcc43504加入上述布氏肉汤,于培养后0,0.5,1,3,5,7,9和24h取出接种于琼脂培养基,计算菌落数量,绘制时间杀菌曲线。3.不同ph值对tnp-2092杀菌活性的影响配置不同浓度tnp-2092(0,mic,2mic,和4mic)的布氏肉汤。并分别调整为不同ph值(7、6、5、4),取h.pylori标准菌株atcc43504加入上述布氏肉汤,于培养后0、2、4、6、8和24h取出接种于琼脂培养基,计算菌落数量,绘制杀菌曲线。4.h.pylori对tnp-2092耐药机制研究根据药敏结果,选取对tnp-2092耐药的菌株,dna测序分别检测左氧氟沙星的耐药基因gyra和利福平的耐药基因rpob的突变,初步分析h.pylori对其的耐药机制。结果:一、标准三联方案在中国大陆用于根除h.pylori治疗的系统评价和meta分1.49篇rcts,8332个研究对象被纳入。2.h.pylori根除率分析:(1)标准三联方案与二联方案相比无统计学差异(rr1.14,95%ci0.99-1.31);但是疗程为7d时三联方案要优于二联方案(rr=1.221;95%ci:1.084-1.374)。(2)标准三联方案与四联方案相比没有统计学差异(rr1.073,95%ci0.849-1.357);但疗程为7d和10d时四联方案要优于标准三联方案(rr=0.790;95%ci:0.718-0.868;rr=0.917;95%ci:0.839-1.002)。(3)标准三联方案和其它三联方案(RR 1.01,95%CI 0.936-1.089)相比没有统计学差异。(4)序贯方案要优于标准三联方案(RR 0.863,95%CI 0.824-0.904)。3.不良反应分析:不良反应发生率方面,标准三联方案和四联方案以及其他三联方案没有统计学差异,标准三联方案副作用发生率要高于序贯方案(RR=1.283;95%CI:1.066-1.544)。4、不同年代标准三联方案H.pylori根除率的变化:标准三联方案的根除率随着时间变化而逐年下降。2004年以前,标准三联根除率:88.54%;2005-2009年,标准三联根除率:77.66%;2010-2013年,标准三联根除率:71.13%。二、新型抗菌药物TNP-2092抗H.pylori作用的体外研究:1.TNP-2092体外药敏实验:100株H.pylori临床分离菌株对克拉霉素,左氧氟沙星,利福平和TNP-2092的耐药率分别是13%(13/100),18%(18/100),1%(1/100)和1%(1/100)。MIC测试结果显示TNP-2092的MIC范围为0.032-128 ug/ml,MIC50为0.125 ug/ml,MIC90为0.5 ug/ml。2.TNP-2092对H.pylori的杀菌时间曲线曲线的斜率随着TNP-2092浓度增大而增大。同时,在药物的浓度高于MIC时,作用时间越长存活菌落数目越少。3.不同pH值对TNP-2092杀菌活性的影响TNP-2092的杀菌活性随着pH值的下降而逐渐减弱。4.H.pylori对TNP-2092耐药机制研究利福平耐药基因rpoB相关位点碱基突变为同义突变;左氧氟沙星耐药基因gyrA其突变形式为259位点碱基缺失。结论:1.标准三联方案在中国大陆已不再适用H.pylori的根除治疗。并且其根除率随着时间逐渐下降。2.TNP-2092对于H.pylori具有很高的抑菌活性。3.TNP-2092的杀菌作用有着浓度依赖性和时间依赖性。此外,TNP-2092杀菌活性还受pH值影响,酸性可使其药效减低。4.Gyr A突变可能是导致H.pylori对TNP-2092耐药的原因之一。
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【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R573

【参考文献】