肝硬化患者腹水病原菌分布及快速诊断的临床应用研究

发布时间：2018-10-24 08:35

【摘要】：目的了解我院2004-2015年间肝硬化患者腹水病原菌分布及耐药情况,为临床治疗肝硬化患者自发性腹膜炎合理选用抗菌药物提供依据,并为后续快速诊断方法的建立提供病原学参考。应用PCR方法检测腹水中细菌16s rDNA基因,初步探讨其在辅助诊断肝硬化患者腹水病原菌感染中的临床应用价值。材料与方法资料来源既往12年间我院住院肝硬化患者基本临床资料与腹水培养的病原菌及其耐药性结果来源于我院检验管理系统数据库。138例临床肝硬化失代偿期患者腹水临床资料及腹水标本留取于2015年01月至2016年01月我院感染病科住院患者。方法收集2004年1月1日至2015年12月31日我院住院肝硬化患者腹水培养的病原菌及其耐药性结果,按时间先后顺序,分为A组、B组两组进行回顾性分析。以细菌16s rDNA基因为靶序列,在保守区和特异区分别选取特异性序列合成引物,建立腹水病原菌快速诊断方法。使用建立的方法,检测138例我院临床肝硬化失代偿期患者腹水中的细菌DNA,并将其结果与传统方法进行比较。计量资料采用均数±标准差表示,两组间计数资料采用x2检验,双侧P0.05认为差异有统计学意义。结果12年间腹水送检培养4308例次,阳性219例次(剔除重复菌株),阳性率5.08%。219例次阳性腹水中,混合感染23例次,共培养出242株细菌,其中革兰阳性(G+)菌91株(37.60%),革兰阴性(G-)菌139株(57.44%),真菌12株(4.96%)。B组G+菌所占比例明显高于A组,G-菌低于A组,B组中,大肠埃希菌比例较A组有所下降,凝固酶阴性葡萄球菌较A组升高,A、B组真菌培养阳性率无明显差异。凝固酶阴性的葡萄球菌对β-内酰胺类抗菌药物有很高的耐药率,产β-内酰胺酶检出率达79.6%,而对万古霉素、利奈唑胺有较高的敏感性;未检出对万古霉素和利奈唑胺耐药的肠球菌,但肠球菌对其他常见G+常用抗菌药物耐药率较高。头孢菌素类抗菌药物对大肠埃希菌疗效较差,哌拉西林他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦等β-内酰胺酶抑制剂类对大肠埃希菌敏感性较好。其中,产广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌检出率为7.89%,对碳青霉烯类抗菌药物敏感性较高。肺炎克雷伯杆菌对青霉素类、头孢菌素类耐药率均较高,对哌拉西林他唑巴坦耐药率为16.24%,对碳青霉烯类抗菌药物敏感性较好。腹水中检出的最常见真菌为白色念珠菌,其他检出率较低的真菌(如:光滑念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌)在腹水培养中也可被发现。未发现对常用抗真菌药耐药的菌株。将腹水培养阳性作为诊断SBP的金标准,PCR法有100%的灵敏度,37%的特异度,阳性预测值为21%,阴性预测值100%,二者差异有统计学意义(x2=10.948,P0.01)。将腹水细菌培养阳性,或(和)腹水PMN≥250×106/L(且排除继发性腹膜炎),作为诊断SBP金标准,PCR法灵敏度为100%,特异度为36%,阳性预测值为29%,阴性预测值100%,二者差异有统计学意义(x2=14.338,P0.01)。将腹水细菌培养阳性,或(和)腹水PMN≥250×106/L,结合患者临床表现,将腹膜刺激征阳性和正规抗感染治疗有效者纳入诊断SBP金标准,此时PCR法灵敏度为100%,特异度为61%,阳性预测值为75%,阴性预测值为100%,二者差异有统计学意义(x2=62.858,P0.01)。结论肠杆菌科细菌仍然是引起肝硬化失代偿期腹水细菌感染的最主要病原菌,大肠埃希菌位列第一,耐药性有增加的趋势。在肝硬化失代偿期腹水细菌感染中,革兰阳性菌所占比例逐年增加,需引起足够重视。由真菌引起的腹水细菌感染,在肝硬化失代偿期患者中所占比例趋于稳定状态,腹水中真菌检出率最高的是白色念珠菌,真菌对临床常用抗真菌药物均很敏感,未检出耐药菌株。传统的腹水培养及腹水细胞学在诊断肝硬化失代偿期的患者SBP感染中,灵敏度低,容易造成漏诊。16s rDNA在诊断SBP感染中有较高的灵敏度和特异度,可成为值得探索的方式。结合腹水培养、腹水细胞学、16s rDNA及临床症状能明显的提高SBP诊断的灵敏度及特异度。
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【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R575.2

【参考文献】