大鼠非酒精性脂肪性肝病CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及其相关细胞因子（I

发布时间：2017-01-01 02:01

  本文关键词：大鼠非酒精性脂肪性肝病CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及其相关细胞因子（IL-10、TGF-β1）与胰岛素抵抗的相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

《福建医科大学》 2014年

大鼠非酒精性脂肪性肝病CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及其相关细胞因子（IL-10、TGF-β1）与胰岛素抵抗的相关性研究

陈惠弟  

【摘要】：目的 通过高脂饮食建立非酒精性脂肪性肝病（Non-alcoholic Fatty Liver Disease，NAFLD）大鼠模型，观察大鼠体重、肝湿重、肝指数、胰岛素抵抗（InsulinResistance，IR）、血脂、肝功能和Treg及其相关细胞因子（IL-10、TGF-β1）在NAFLD形成过程中的变化，分析各项指标与肝脏脂肪变性程度的相关性和Treg及其相关细胞因子（IL-10、TGF-β1）与IR程度之间的相关性。初步探讨Treg在NAFLD形成过程中的作用及可能的免疫学机制。 方法 采用同周龄的雄性SD大鼠48只，体重160士10g，按体重随机分为高脂组及对照组，每组24只。高脂组给予高脂饲料（88%普通饲料+2%胆固醇+10%猪油），同时对照组给予普通饲料。喂养至4、8、16w末时，分别从高脂组和对照组随机抽取8只大鼠进行实验，用全自动生化分析仪测定肝功能、血脂、FBS的水平；用化学发光免疫法测定FINS的水平，并计算FIRI；应用FCM测定大鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的比例。处死大鼠后取肝脏并称其重量，然后计算肝指数，同时观察肝脏的颜色、质地，取大小适中的肝组织用PBS冲洗后吸除水分，放入10%的中性甲醛溶液固定，用于HE染色；取少许肝组织用于Real-time PCR技术测定肝组织中Foxp3、IL-10和TGF-β1的表达。 结果 1高脂组大鼠体重、肝湿重及肝指数于4w末时均显著高于对照组（p分别为0.030，0.012，0.012），喂养至8w、16w末时差异更显著（p分别为0.002，0.005，0.008；0.001，0.001，0.001） 2高脂组大鼠血清ALT、AST、TC、TG在喂养过程中逐渐升高，4、8、16w末时均显著高于同期对照组（p分别为0.001，0.001，0.002，0.001；0.001，0.001，0.001，0.002；0.000，0.000，0.000，0.000） 3高脂组大鼠的FBS在喂养过程中无明显变化，且与同期对照组相比无显著差异（p值分别为0.621，0.282，0.195）；FINS和FIRI均在喂养过程中逐渐增高，4w末时两组比较无显著差异（p分别为0.572，0.474），8、16w末时均显著高于同期对照组（p分别为0.001，0.001；0.001，0.001） 4高脂组大鼠随着喂养时间的延长肝组织中Foxp3、IL-10的表达逐渐降低，均显著低于同期对照组（p分别为0.002，0.02；0.000，0.000；0.001，0.001）。4w末高脂组大鼠肝组织中的TGF-β1表达与对照组相比无明显差异（p=0.355），但随着喂养时间的延长，高脂组大鼠肝组织中的TGF-β1表达逐渐升高，8w、16w末均显著高于同期对照组（p分别为0.001，0.000） 5高脂组大鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞的百分比随喂养时间的延长逐渐下降，4w、8w、16w末时均显著低于同期对照组（p分别为0.003，0.001，0.000） 6高脂组大鼠4w末时已出现脂肪肝，其程度随喂养时间的延长逐渐加重，第8w末时达到中度脂肪肝，第16w末时发展为重度脂肪肝 7各项指标与肝脏脂肪变性程度的相关性研究显示，FBS与肝脏脂肪变性程度无明显相关性（r=0.489）；体重、肝湿重、肝指数、TC、TG、ALT、AST、FINS、FIRI及肝组织中的TGF-β1均与肝脏脂肪变性程度呈显著正相关（r分别为0.968、0.963、0.921、0.950、0.926、0.945、0.924、0.966、0.979、0.910），其中FIRI的相关性最大（r=0.979）；而外周血中Treg、肝组织中的Foxp3、IL-10及与肝脏脂肪变性程度呈负相关（r分别为-0.963，-0.914，-0.928），其中外周血中的Treg数量相关系数最大（r=-0.963） 8Treg与Foxp3、IL-10和TGF-β1的相关性研究结果显示：肝组织中的Foxp3、IL-10与Treg呈正相关（r分别为0.872，0.839）；而肝组织中TGF-β1与外周血中Treg呈负相关（r=-0.910） 9Treg及其相关因子（Foxp3、IL-10、TGF-β1）与胰岛素抵抗的相关性分析结果显示：肝组织中的TGF-β1与FIRI呈正相关（r=0.924），外周血中Treg、肝组织中Foxp3及IL-10分别与FIRI呈负相关（r分别为-0.935、-0.891、-0.936） 结论 1SD大鼠给予高脂饲料持续喂养8w可形成伴有IR的NAFLD 2Treg数量的减少可能导致肝组织免疫功能异常，，进而加重IR程度，这可能是导致NAFLD发生发展的关键因素 3Treg分泌的IL-10在NAFLD发展中起一定的保护作用，而TGF-β1可能起促进作用 4外周血Treg的检测对诊断NAFLD有一定的临床意义，通过调整Treg的数量可能阻止NAFLD的发生发展

【关键词】：
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R575.5
【目录】：

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  本文关键词：大鼠非酒精性脂肪性肝病CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及其相关细胞因子（IL-10、TGF-β1）与胰岛素抵抗的相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：230482