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IRF-7在急性HBV感染小鼠模型肝脏中的表达变化分析

发布时间:2018-12-29 16:10
【摘要】:目的本文拟通过构建急性乙型肝炎病毒(HBV)感染小鼠模型,观察干扰素调节因子-7(IRF-7)的mRNA及蛋白表达水平在急性HBV感染小鼠模型中的变化,以期探讨IRF-7在HBV急性感染清除机制中的作用。方法用高压水动力法经小鼠尾静脉注射HBV基因组1.3倍体真核表达质粒(pcDNA3.1-HBV1.3)构建急性乙型肝炎病毒感染小鼠模型,用RT-PCR和Western blot检测正常组(NC组)、模型组(pHBV组)及空载体组(pcDNA组)小鼠肝脏中IRF-7的mRNA和蛋白表达水平。结果 pHBV组在6 h即可检测到肝脏内HBsAg及HBcAg阳性,抗原表达在12 h达峰值,至第5天逐渐消失。pHBV组肝脏组织中IRF-7 mRNA和蛋白表达在6 h均显著上调(P0.05),12 h达最高,随后下降,48 h恢复至正常水平。而pcDNA组与正常组的IRF-7表达在各时间点均无显著变化。结论成功构建了急性HBV感染小鼠模型,该模型肝脏组织IRF-7 mRNA及蛋白水平变化与肝脏内HBV抗原表达变化趋势一致,提示肝脏内IRF-7可能参与了HBV的急性感染清除过程。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of interferon regulatory factor-7 (IRF-7) mRNA and protein in acute hepatitis B virus (HBV) infected mice by constructing a mouse model of acute hepatitis B virus (HBV) infection, and to observe the changes of the expression level of interferon regulatory factor 7 (IRF-7) in acute HBV infected mice. To explore the role of IRF-7 in the clearance mechanism of acute HBV infection. Methods A mouse model of acute hepatitis B virus infection was established by injecting HBV genome 1.3 ploidy eukaryotic expression plasmid (pcDNA3.1-HBV1.3) into mouse tail vein by high pressure hydrodynamic method. RT-PCR and Western blot were used to detect normal group (NC group). The expression of mRNA and protein of IRF-7 in the liver of model group (pHBV group) and empty carrier group (pcDNA group). Results the expression of HBsAg and HBcAg was detected in the liver of pHBV group at 6 h, and the expression of antigen reached its peak at 12 h, and gradually disappeared on the 5th day. The expression of IRF-7 mRNA and protein in liver tissue of pHBV group was significantly up-regulated at 6 h (P0.05), and reached the highest level at 12 h. Then it decreased and returned to normal level at 48 h. The expression of IRF-7 in pcDNA group and normal group showed no significant change at all time points. Conclusion the mouse model of acute HBV infection was successfully constructed. The changes of IRF-7 mRNA and protein levels in liver tissue were consistent with the change trend of HBV antigen expression in the liver, suggesting that IRF-7 in liver might be involved in the process of acute infection clearance of HBV.
【作者单位】: 重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学省部共建教育部重点实验室;重庆医科大学附属第二医院检验科;
【基金】:国家自然科学基金(30901264) 重庆市科委自然科学基金(2009BB5264) 重庆市卫生局医学科研计划(2011-2-152)
【分类号】:R512.62

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