c-met慢病毒载体的构建及稳定转染骨髓间充质干细胞

发布时间：2019-04-17 06:02

【摘要】：构建肝细胞生长因子受体(c-met)慢病毒载体,并稳定转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)。将c-met连接到慢病毒载体GV358上,重组获得慢病毒载体GV358-c-met。再将该重组体与病毒辅助质粒共转染293T细胞,包装生产慢病毒并测定其滴度为2×10~8TU/ml。将此慢病毒转染BMSCs,经嘌呤霉素筛药后,荧光显微镜下检测荧光阳性率达100%,且Western blot证实该细胞株表达c-met蛋白。成功构建了c-met慢病毒载体,并建立了稳定表达c-met的BMSCs。
[Abstract]:Construction of hepatocyte growth factor receptor (c-met) lentivirus vector and stable transfection of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). The c-met was ligated into the lentivirus vector GV358, and the lentivirus vector GV358-c-met. was obtained by recombination. The recombinant plasmid was co-transfected into 293T cells to produce lentivirus and its titer was determined to be 2 脳 10 脳 10 ~ 8 TU / ml. After the lentivirus was transfected into BMSCs, by puromycin screening, the fluorescence positive rate was 100% under fluorescence microscope, and the expression of c-met protein was confirmed by Western blot. C-met lentiviral vector was successfully constructed and BMSCs. expressing c-met stably was established.
【作者单位】： 安徽医科大学附属省立医院感染科;南京医科大学第一附属医院儿科;南京医科大学第一附属医院感染科;
【基金】：国家自然科学基金(编号:81271713) 吉利德肝病科学研究项目-亚洲
【分类号】：Q78;R575.3

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本文编号：2459155