搭载klotho蛋白热敏型聚合凝胶在内镜下治疗胃溃疡

发布时间：2019-06-14 20:34

【摘要】：目的:1、探索klotho蛋白是否对GECs(胃上皮细胞)增殖率和迁移率有促进作用;2、制作一款包裹klotho蛋白能用于内镜下的热敏型聚合凝胶并对材料进行评估;3、通过动物实验验证聚合凝胶对胃溃疡的愈合是否有促进作用。方法:1、细胞增殖实验(EDU)和细胞迁移实验(Transell):将对数期生长的GECs分为klotho蛋白组和对照组,klotho蛋白组添加klotho,观察两组细胞增殖率和迁移率有无差异。2、聚合凝胶的制作及评估:以β-环糊精包裹klotho蛋白的制成纳米微球,用壳聚糖、F-127、甘油等材料制作成一种温度敏感性凝胶,纳米微球与凝胶混合均匀后通过扫描电镜观察,并测定生物材料中klotho蛋白的缓释速度。3、胃潴留实验:将8只C57小鼠分为2组,对照组和实验组,分别灌入含1%亚甲蓝的生理盐水、klotho蛋白凝胶,在0、30、60、120分钟后取胃,通过活体荧光成像系统检测荧光强度。4、动物实验:将60只SD大鼠随机分为生理盐水组,空白凝胶组,奥美拉唑组、klotho蛋白凝胶组4组。各组大鼠成模后每天分别用生理盐水、空白凝胶、奥美拉唑、Klotho蛋白凝胶灌胃1次治疗。在治疗的第1、3、7天每组随机处死5只大鼠取材,测量溃疡面积及新生毛细血管数量。溃疡标本切片后行HE染色、PAS染色、PNCA染色,观察各组组织学变化情况。结果:1、细胞实验:klotho蛋白组的增值率是对照组的2.3倍,细胞迁移数量是对照组的3.6倍。2、电镜观察结果:纳米微球直径在50-200nm之间,可见纳米微球匀称散布在klotho凝胶上面。3、胃潴留实验:klotho凝胶的荧光的强度在每个时间段都明显高于对照组。4、动物实验:klotho凝胶组愈合情况从肉眼观和组织学角度都要优于各个对照组。结论:1、证明了Klotho蛋白在酸性条件下能够促进GECs的增殖迁移。2、制备的包裹klotho蛋白凝胶能够成功用于内镜下并黏附在胃溃疡部位。3、证实了klotho蛋白凝胶能够成功地通过灌胃器导管作用于大鼠胃溃疡部位,修复溃疡组织。
[Abstract]:Aim: 1. To explore whether klotho protein can promote the proliferation and mobility of GECs (gastric epithelial cells); (2) to prepare a klotho protein coated klotho protein can be used in endoscopic thermal polymerization gel and evaluate the material; (3) to verify whether the polymeric gel can promote the healing of gastric ulcer through animal experiments. Methods: 1. Cell proliferation test (EDU) and cell migration test (Transell): divided logarithmic GECs into klotho protein group and control group. Klotho protein group added klotho, to observe whether there was any difference in cell proliferation and mobility between the two groups. 2. Preparation and evaluation of polymeric gel: nano-microspheres coated with 尾-cyclodextrin, chitosan, F 鈮，

本文编号：2499672