活血化瘀通络中药合方及拆方对糖尿病脂肪肝大鼠的治疗作用及对SOCS-3和SREBP-1c的影响

发布时间：2019-07-15 16:35

【摘要】：目的：随着肥胖与糖尿病发病率的增加，糖尿病脂肪肝的发病率也明显增加，若得不到有效治疗，可进一步发展为肝炎、肝硬化，甚至肝癌。肥胖伴发的胰岛素抵抗是糖尿病和脂肪肝形成的共同作用机制，胰岛素抵抗是指组织对胰岛素反应的敏感性降低。胰岛素抵抗在2型糖尿病的发病机制中发挥着重要作用，正常情况下,胰岛素一方面通过抑制肝脏葡萄糖的输出，另一方面通过促进葡萄糖进入肌肉组织使血浆葡萄糖维持在正常范围，，胰岛素抵抗时不能有效地抑制肝脏葡萄糖的输出和有效地促进葡萄糖进入肌肉组织,从而引起血糖升高导致2型糖尿病的发生；胰岛素抵抗在脂肪肝的发病机制中亦发挥着重要作用，一方面胰岛素抵抗促进了脂肪分解为游离脂肪酸,游离脂肪酸随血液进入肝脏,在肝细胞内合成脂肪；另一方面，胰岛素抵抗可抑制肝细胞内脂肪的分解代谢，引起肝细胞内脂肪积聚,从而导致脂肪肝的形成，因此改善胰岛素抵抗对糖尿病性脂肪肝有一定的治疗作用。近年来研究发现细胞因子信号转导抑制物-3(suppressors of cytokine signaling protein-3, SOCS-3)在胰岛素抵抗和非酒精性脂肪性肝病的发生发展中起着非常重要的作用，SOCS-3一方面通过抑制胰岛素信号传导，引起胰岛素抵抗，另一方面通过上调肝脏类固醇条件元件结合蛋白-1c(Sterol regulatory element binding protein-1cSREBP-1c)促进脂肪酸合成，导致脂质在肝脏沉积，形成脂肪肝。因此通过降低SOCS-3mRNA和SREBP-1cmRNA的表达能有效地治疗糖尿病性脂肪肝。本实验旨在观察活血化瘀通络中药合方及拆方对糖尿病大鼠脂肪肝SOCS-3mRNA和SREBP-1cmRNA表达的影响,探讨其抗糖尿病性脂肪肝的作用及可能机制，为临床应用活血化瘀通络中药治疗糖尿病性脂肪肝提供一定的理论依据。方法：将50只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药1组(活血组，丹参、川芎)、中药2组(通络组，水蛭、地龙)和中药3组(合方组，水蛭、地龙、丹参、川芎)，除正常组外，其余尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)25mg/kg,临用前STZ按1%比例以柠檬酸缓冲液(pH4,0.1mmol/L)稀释。于注射后72h及1wk时，尾静脉采血,若随机血糖大于或等于16.7mmol/L,确定为糖尿病造模成功。用基础饲料喂养2wk后,除正常组外,改为高脂饲料喂养。正常组和模型组予生理盐水灌胃,中药1、2、3组分别予活血中药(丹参、川芎),通络中药(水蛭、地龙),合方中药(水蛭、地龙、丹参、川芎)灌胃,中药购于河北省中医院中药房，剂型为袋装免煎剂，根据大鼠体重称取相应中药1.2g/(kg.d)，用2ml的沸水冲泡，凉至35℃左右灌胃;12wk后处死大鼠。苏木素伊红(HE)染色法观察大鼠肝组织的形态学改变；生化法测量甘油三脂（TG）、胆固醇（TC）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）；RT-PCR法检测肝组织SOCS-3mRNA和SREBP-1c mRNA的表达。结果: 1大鼠一般情况正常组大鼠营养状况良好，饮食正常，反应灵敏，体重呈持续性增加；其他各组大鼠营养情况差，饮食少，体形消瘦，反应迟钝，烦躁易激惹。 2各组大鼠肝组织病理形态改变正常组大鼠肝组织未发现脂肪变性；模型组2/3以上肝小叶的肝细胞都有脂肪变性，肝细胞肿大，充满大小不等的脂肪空泡(脂滴)，可见脂肪囊肿，伴有炎性细胞浸润，有的还伴有一定程度的肝纤维结缔组织增生；各药物干预组大鼠肝细胞内脂肪滴减少，脂肪囊肿消失，转为轻中度脂肪变性,脂肪变较模型组明显减轻；合方组较拆方组脂肪变减轻。 3各组大鼠肝组织TC、TG水平与正常组相比，模型组及各药物干预组大鼠血清TC、TG水平明显升高（P0.05)；与模型组相比，各药物干预组大鼠血清TC、TG水平有明显降低（P0.05)；中药各组间比较：中药3组TC、TG水平比中药1、2组低(P0.05)；中药2组的TC、TG水平比中药1组低，但无统计学意义（P0.05）。 4各组大鼠肝组织ALT、AST水平与正常组相比，模型组及各药物干预组大鼠血清ALT、AST水平明显升高（P0.05)；与模型组相比,各药物干预组大鼠血清ALT、AST水平有明显降低（P0.05)；中药各组间比较：与中药3组相比，中药1、2组大鼠血清ALT、AST水平明显升高(P0.05),中药1组、2组之间无显著性差异（P0.05）。 5各组大鼠肝组织SOCS-3和SREBP-1c表达与正常组相比,模型组和各药物干预组SOCS-3和SREBP-1c表达均明显增强(P0.05)；与模型组相比,各药物干预组SOCS-3和SREBP-1c表达均明显减弱(P0.05)；中药各组间比较：与中药3组相比,中药1、2组SOCS-3和SREBP-1c表达均明显增强(P0.05)，中药1组、2组之间无显著性差异（P0.05）。 SOCS-3mRNA和SREBP-1cmRNA表达水平Pearson相关分析结果：SOCS-3mRNA和SREBP-1cmRNA表达呈正相关(r=0.985, P0.05)。结论: 1活血化瘀通络中药合方及拆方能明显降低糖尿病性脂肪肝大鼠肝功能及血脂水平，显著改善大鼠肝脏脂肪变性，对糖尿病性脂肪肝有良好的治疗作用。 2活血化瘀通络中药合方及拆方对糖尿病脂肪肝的治疗作用可能与其降低SOCS-3mRNA和SREBP-1c mRNA的表达，进而改善胰岛素抵抗、抑制脂肪酸合成有关。 3活血化瘀与通络中药在治疗糖尿病性脂肪肝方面具有协同作用，两者同用可提高疗效。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R587.1;R575.5

【参考文献】