间苯三酚对肝缺血再灌注损伤的作用及机制研究
发布时间：2019-08-08 11:32
【摘要】：目的 :研究间苯三酚(phloroglucinol,Phlo)在肝脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)中的作用。方法 :将40只C57BL/6小鼠随机分为假手术(sham)组、IR组、IR+Phlo组、IR+磷酸缓冲盐(phosphate buffer saline,PBS)组4组,每组10只。Sham组仅分离暴露门静脉,不夹闭。另3组建立小鼠部分肝缺血再灌注模型(70%)。利用小鼠正常巨噬细胞系RAW264.7,进行体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激,建立体外模型。通过血清丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天门冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)的水平和组织病理学评价肝脏损伤,利用实时荧光定量PCR检测肝内IL-1β和TNF-α的m RNA水平变化,细胞培养上清液IL-1β和TNF-α的水平由ELISA检测,RAW264.7细胞内p-p65蛋白表达情况经Western blot进行测定。结果 :IR+Phlo组小鼠肝损伤情况明显低于IR组与IR+PBS组(P0.01),肝内IL-1β和TNF-α的m RNA水平均降低(P0.05)。体外试验证实间苯三酚与RAW264.7共培养时,可减少其分泌的IL-1β和TNF-α(P0.05),细胞中NF-κB的活性也明显下降。结论:间苯三酚在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中具有保护作用,该作用部分是通过间苯三酚抑制巨噬细胞内NF-κB的活性实现。
【图文】：
昂笥诔上?仪上读龋1．3统计学方法以SPSS13．0统计学软件进行统计分析。结果以均数±标准差（x±s）示。用单因素方差分析进行统计学处理，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用One-wayANOVA和Newman-Kelus-test多重比较t检验分析。P≤0．05为差异有统计学意义。2结果2．1间苯三酚可减轻缺血再灌注造成的肝损伤血清ALT、AST水平是反映肝功能的有效指标。sham组小鼠肝功能无损害，IR组、IR＋PBS组和IR＋Phlo组的ALT、AST水平均较sham组升高，但IR＋Phlo组的ALT、AST明显比IR组和IR＋PBS组低（P＜0．01，图1），说明间苯三酚可以减轻IR造成的肝功能损伤。HE染色可见IR组肝叶组织结构较sham组出现明显改变，表现为肝窦堵塞，肝细胞肿胀、变性、坏死，炎症细胞浸润。IR＋Phlo组较IR组肝叶结构改变较小，肝细胞肿胀、变性程度较轻，炎症细胞浸润较少。IR＋PBS组与IR组改变相似（图2）。Suzuki’s评分同样提示IR组与IR＋PBS组肝损伤较重，IR＋Phlo组损伤较IR组明显减轻（P＜0．01，图3）。与IR组比较，*P＜0．01。图1血清ALT、AST水平Figure1SerumlevelsofALT，ASTsham150001000050000AST（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSsham150001000050000ALT（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSA：sham组；B：IR组；C：IR＋Phlo组；D：IR＋PBS组。图2肝组织HE染色（×200）Figure2Histopathologicalanalysisoflivers（×200）ABCDsham43210Suuzkis评分IR＋Phlo*IRIR＋PBS与IR组比较，*P＜0．01。图3Suzuki’s评分Figure3Suzuki’sscore2．2间苯三酚可减少肝内IL-1β和TNF-α的mR-NA水平肝内炎症介质IL-1β和TNF-α的mRNA水平显示?
2结果2．1间苯三酚可减轻缺血再灌注造成的肝损伤血清ALT、AST水平是反映肝功能的有效指标。sham组小鼠肝功能无损害，IR组、IR＋PBS组和IR＋Phlo组的ALT、AST水平均较sham组升高，但IR＋Phlo组的ALT、AST明显比IR组和IR＋PBS组低（P＜0．01，图1），说明间苯三酚可以减轻IR造成的肝功能损伤。HE染色可见IR组肝叶组织结构较sham组出现明显改变，表现为肝窦堵塞，肝细胞肿胀、变性、坏死，炎症细胞浸润。IR＋Phlo组较IR组肝叶结构改变较小，肝细胞肿胀、变性程度较轻，炎症细胞浸润较少。IR＋PBS组与IR组改变相似（图2）。Suzuki’s评分同样提示IR组与IR＋PBS组肝损伤较重，，IR＋Phlo组损伤较IR组明显减轻（P＜0．01，图3）。与IR组比较，*P＜0．01。图1血清ALT、AST水平Figure1SerumlevelsofALT，ASTsham150001000050000AST（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSsham150001000050000ALT（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSA：sham组；B：IR组；C：IR＋Phlo组；D：IR＋PBS组。图2肝组织HE染色（×200）Figure2Histopathologicalanalysisoflivers（×200）ABCDsham43210Suuzkis评分IR＋Phlo*IRIR＋PBS与IR组比较，*P＜0．01。图3Suzuki’s评分Figure3Suzuki’sscore2．2间苯三酚可减少肝内IL-1β和TNF-α的mR-NA水平肝内炎症介质IL-1β和TNF-α的mRNA水平显示（图4）：IR组较sham组均明显上升（P＜0．01），而IR＋Phlo组的水平较IR组明显下降（P＜0．05），IR＋PBS组水平较IR组几乎不变。2．3间苯三酚可减少RAW264．7分泌IL-1β和TNF-α的水平RAW264．7细胞受LPS刺激后（LPS组），IL-1β和TNF-α的分泌量较sham组明显上升（P＜0．0
【作者单位】： 南京医科大学附属常州第二人民医院普外科;
【分类号】：R575
【图文】：
昂笥诔上?仪上读龋1．3统计学方法以SPSS13．0统计学软件进行统计分析。结果以均数±标准差（x±s）示。用单因素方差分析进行统计学处理，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用One-wayANOVA和Newman-Kelus-test多重比较t检验分析。P≤0．05为差异有统计学意义。2结果2．1间苯三酚可减轻缺血再灌注造成的肝损伤血清ALT、AST水平是反映肝功能的有效指标。sham组小鼠肝功能无损害，IR组、IR＋PBS组和IR＋Phlo组的ALT、AST水平均较sham组升高，但IR＋Phlo组的ALT、AST明显比IR组和IR＋PBS组低（P＜0．01，图1），说明间苯三酚可以减轻IR造成的肝功能损伤。HE染色可见IR组肝叶组织结构较sham组出现明显改变，表现为肝窦堵塞，肝细胞肿胀、变性、坏死，炎症细胞浸润。IR＋Phlo组较IR组肝叶结构改变较小，肝细胞肿胀、变性程度较轻，炎症细胞浸润较少。IR＋PBS组与IR组改变相似（图2）。Suzuki’s评分同样提示IR组与IR＋PBS组肝损伤较重，IR＋Phlo组损伤较IR组明显减轻（P＜0．01，图3）。与IR组比较，*P＜0．01。图1血清ALT、AST水平Figure1SerumlevelsofALT，ASTsham150001000050000AST（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSsham150001000050000ALT（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSA：sham组；B：IR组；C：IR＋Phlo组；D：IR＋PBS组。图2肝组织HE染色（×200）Figure2Histopathologicalanalysisoflivers（×200）ABCDsham43210Suuzkis评分IR＋Phlo*IRIR＋PBS与IR组比较，*P＜0．01。图3Suzuki’s评分Figure3Suzuki’sscore2．2间苯三酚可减少肝内IL-1β和TNF-α的mR-NA水平肝内炎症介质IL-1β和TNF-α的mRNA水平显示?
2结果2．1间苯三酚可减轻缺血再灌注造成的肝损伤血清ALT、AST水平是反映肝功能的有效指标。sham组小鼠肝功能无损害，IR组、IR＋PBS组和IR＋Phlo组的ALT、AST水平均较sham组升高，但IR＋Phlo组的ALT、AST明显比IR组和IR＋PBS组低（P＜0．01，图1），说明间苯三酚可以减轻IR造成的肝功能损伤。HE染色可见IR组肝叶组织结构较sham组出现明显改变，表现为肝窦堵塞，肝细胞肿胀、变性、坏死，炎症细胞浸润。IR＋Phlo组较IR组肝叶结构改变较小，肝细胞肿胀、变性程度较轻，炎症细胞浸润较少。IR＋PBS组与IR组改变相似（图2）。Suzuki’s评分同样提示IR组与IR＋PBS组肝损伤较重，，IR＋Phlo组损伤较IR组明显减轻（P＜0．01，图3）。与IR组比较，*P＜0．01。图1血清ALT、AST水平Figure1SerumlevelsofALT，ASTsham150001000050000AST（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSsham150001000050000ALT（U／L）IR＋Phlo*IRIR＋PBSA：sham组；B：IR组；C：IR＋Phlo组；D：IR＋PBS组。图2肝组织HE染色（×200）Figure2Histopathologicalanalysisoflivers（×200）ABCDsham43210Suuzkis评分IR＋Phlo*IRIR＋PBS与IR组比较，*P＜0．01。图3Suzuki’s评分Figure3Suzuki’sscore2．2间苯三酚可减少肝内IL-1β和TNF-α的mR-NA水平肝内炎症介质IL-1β和TNF-α的mRNA水平显示（图4）：IR组较sham组均明显上升（P＜0．01），而IR＋Phlo组的水平较IR组明显下降（P＜0．05），IR＋PBS组水平较IR组几乎不变。2．3间苯三酚可减少RAW264．7分泌IL-1β和TNF-α的水平RAW264．7细胞受LPS刺激后（LPS组），IL-1β和TNF-α的分泌量较sham组明显上升（P＜0．0
【作者单位】： 南京医科大学附属常州第二人民医院普外科;
【分类号】：R575
【参考文献】
相关期刊论文 前2条
1 Koichi Ogawa;Tadashi Kondo;Takafumi Tamura;Hideki Matsumura;Kiyoshi Fukunaga;Tatsuya Oda;Nobuhiro Ohkohchi;;Influence of Kupffer cells and platelets on ischemia-reperfusion injury in mild steatotic liver[J];World Journal of Gastroenterology;2013年09期
2 Lin-Zhong Cui;Biao Wang;Li-Yan Chen;Jie Zhou;;The effect of ischemic precondition to IL-6 on rat liver ischemiareperfusion injury in transplantation[J];Asian Pacific Journal of Tropical Medicine;2013年05期
【共引文献】
相关期刊论文 前10条
1 张敉;吴亚男;尹华峰;张景R
本文编号：2524339
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