IL-33在TNBS诱导炎症性肠病中的免疫调节作用研究

发布时间：2019-09-24 13:17

【摘要】：炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)是一类慢性非特异性肠道炎症疾病,包括溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s Disease,CD),其临床症状主要表现为腹泻、腹痛和肠梗阻,并有恶变倾向,增加了大肠癌的发病风险。机体Th1/Th2型免疫失衡是炎症性肠病发病的重要免疫学因素,而维持肠黏膜免疫平衡成为IBD防治的新方法。本课题采用三硝基苯磺酸(trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)诱导Th1型免疫主导的小鼠炎症性肠病为模型,探讨白介素(IL)-33在炎症性肠病中的作用及潜在机制,为临床治疗炎症性肠病提供新的方法与思路。研究目的:1.明确IL-33在TNBS诱导Th1型细胞介导的炎症性肠病中的作用,探讨相关的免疫学机制;2.过继IL-33诱导的替代活化巨噬细胞(AAM),检测其在炎症性肠病中的作用及相关机制,为炎症性肠病防治提供新的理论知识和实验依据。研究方法:建立TNBS诱导的炎症性肠病模型,观察IL-33在炎症性肠病中的作用。依据组织病理学检查判断IL-33治疗效果,免疫荧光技术检测结肠损伤部位巨噬细胞表型的表达情况,实时定量PCR技术检测结肠损伤部位细胞因子以及巨噬细胞相关基因的表达水平。替代活化巨噬细胞过继至炎症性肠病小鼠,通过组织病理学检查、免疫荧光检测及RT-PCR等实验技术,观察替代活化巨噬细胞对炎症性肠病的治疗效果,同时过继绿色荧光蛋白(GFP)标记的F4/80+巨噬细胞,检测巨噬细胞在炎症性肠病小鼠结肠组织中的分布情况。研究结果:1.IL-33缓解TNBS诱导的炎症性肠病结肠病理损伤建立小鼠IBD模型,腹腔给予IL-33治疗后,临床病理表现如腹痛、腹泻、食欲不振等症状有明显的改善,炎症情况明显好转,组织病理损伤减轻;PCR结果显示小鼠结肠损伤部位促炎性细胞因子TNF-α表达降低;组织免疫荧光以及PCR结果显示结肠组织中M2型巨噬细胞特异标记基因Arg1、YM1表达升高。2.IL-33对巨噬细胞极化的影响在正常小鼠体内,IL-33腹腔注射可诱导巨噬细胞向M2型极化,并上调M2型相关分子表达;同时IL-33诱导体外腹腔巨噬细胞向M2型极化。3.替代活化巨噬细胞过继治疗缓解炎症性肠病病理损伤IL-33诱导的替代活化巨噬细胞过继治疗能明显抑制TNBS诱导的炎症性肠病进展,减轻结肠组织病理损伤程度,降低结肠损伤部位TNF-α表达,同时GFP标记的F4/80+巨噬细胞主要分布于结肠粘膜下层及固有层部位。结论:IL-33处理能明显缓解TNBS诱导的IBD病情进展,其免疫学机制可能与诱导替代活化巨噬细胞生成相关。
【图文】：

天体,体重,增长体,实验组

模型组小鼠在造模后的 24 h，体重出现明显降低，并且随着时间增长体重下显，第四天时达-24.79±1.29%。IL-33 治疗组小鼠体重也有降低，至第 2 天15.28±0.74%），，随后体重逐渐回升，从第 3 天至第 4 天，体重由-13.08±为-5.98±1.05%。对照组小鼠体重有轻微增加，但是无明显改变。各实验组变化统计结果见下表：.4 第 1-4 天各实验组小鼠体重变化百分率（与 TNBS 组相比较*P < 0.05，**P<0.01）Day 1 Day 2 Day 3 Day4-10.55±0.66 -17.62±2.35 -21.99±1.43 -24.79±L-33 -9.16±1.17 -15.28±0.74 -13.08±1.33* -5.98±1

小鼠,失去光泽,食欲,毛发

广东药科大学硕士研究生学位论文分病活动指数评分结果见图 2.2。乙醇空泽，活动正常，大便性状无变化。模型乱失去光泽，慵懒，活动明显减少，2-便；第 4 天，程度更加严重， DAI 评分为毛发失去光泽，活动不灵敏，食欲不好始有稀便，第 3 天稀便但是精神、食欲况开始改变，体重有明显回升，毛发也AI 评分为 4±0.57。IL-33 治疗组小鼠与差异，且差异具有统计学意义（*P<0.0
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R574

【参考文献】