SIRT3在脱氧胆酸诱导人正常结肠上皮NCM460细胞能量代谢损伤中的作用

发布时间：2019-10-17 12:26

【摘要】：目的:探讨脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)对人结肠上皮NCM460细胞能量代谢损伤的影响及可能机制。方法:培养人正常结肠上皮NCM460细胞,采用DCA(10μmol/L、30μmol/L和100μmol/L)作用5 d,或DCA(100μmol/L)作用3、5和7 d;DCA(100μmol/L)处理3 d后,用去乙酰化酶sirtuin 3(SIRT3)激动剂白藜芦醇(resveratrol,REV)处理细胞后继续培养至第7天。细胞腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)和乳酸生成量用试剂盒检测,Western blot检测细胞的SIRT3表达。结果:DCA能浓度和时间依赖性地抑制NCM460细胞生成ATP并促进乳酸生成,抑制SIRT3蛋白表达;白藜芦醇能逆转DCA对NCM460细胞的作用。结论:DCA对人结肠上皮NCM460细胞的能量代谢具有损伤作用,其损伤作用与SIRT3相关。
【图文】：

2DCA干预对NCM460细胞乳酸生成的影响以不同剂量的DCA处理正常的结肠上皮细胞NCM460，检测细胞乳酸的生成能力。结果显示与对照组相比，DCA能剂量依赖性地促进NCM460细胞生成乳酸，并在DCA浓度为100μmol/L时，合成乳酸能力最强(P＜0.01)。DCA(100μmol/L)分别处理NCM460细胞3d、5d和7d均能显著增加乳酸的合成，且具有时间依赖性(P＜0.01)，见图2。Figure2．Theeffectofdaeoxycholicacid(DCA)onthelacticacid(LD)productionofNCM460cells．DCAinhibitedtheLDproduc-tioninadose-dependentmanner(A)andatime-dependentmanner(B)．Mean±SEM．n=3．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vsDCA(0μmol/L)group．图2脱氧胆酸对NCM460细胞乳酸生成的影响3DCA干预对NCM460细胞SIＲT3蛋白表达的影响与对照组相比，DCA能剂量依赖性地抑制NCM460细胞SIＲT3蛋白的表达，且当DCA浓度达100μmol/L时，SIＲT3的蛋白表达水平最低(P＜0.01)。DCA(100μmol/L)分别处理NCM460细胞3d、5d和7d，SIＲT3的蛋白表达呈时间依赖性下降，且处理7d时表达水平最低(P＜0.01)，见图3。Figure3．Theeffectofdeoxycholicacid(DCA)ontheproteinexpressionofSIＲT3intheNCM460cells．DCAinhibitedtheproteinexpressionofSIＲT3inadose-dependentmanner(A)andatime-dependentmanner(B)．Mean±SEM．n=3．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vsDCA(0μmol/L)group．图3脱氧胆酸对NCM460细胞中SIＲT3蛋白表达的影响4白藜芦醇干预对DCA处理后的NCM460细胞能量代谢的影响为了进一步探讨SIＲT3在DCA损伤中的作用，本实验应用sirtuin家族激动剂白藜芦醇进行反证。·1496·

2DCA干预对NCM460细胞乳酸生成的影响以不同剂量的DCA处理正常的结肠上皮细胞NCM460，，检测细胞乳酸的生成能力。结果显示与对照组相比，DCA能剂量依赖性地促进NCM460细胞生成乳酸，并在DCA浓度为100μmol/L时，合成乳酸能力最强(P＜0.01)。DCA(100μmol/L)分别处理NCM460细胞3d、5d和7d均能显著增加乳酸的合成，且具有时间依赖性(P＜0.01)，见图2。Figure2．Theeffectofdaeoxycholicacid(DCA)onthelacticacid(LD)productionofNCM460cells．DCAinhibitedtheLDproduc-tioninadose-dependentmanner(A)andatime-dependentmanner(B)．Mean±SEM．n=3．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vsDCA(0μmol/L)group．图2脱氧胆酸对NCM460细胞乳酸生成的影响3DCA干预对NCM460细胞SIＲT3蛋白表达的影响与对照组相比，DCA能剂量依赖性地抑制NCM460细胞SIＲT3蛋白的表达，且当DCA浓度达100μmol/L时，SIＲT3的蛋白表达水平最低(P＜0.01)。DCA(100μmol/L)分别处理NCM460细胞3d、5d和7d，SIＲT3的蛋白表达呈时间依赖性下降，且处理7d时表达水平最低(P＜0.01)，见图3。Figure3．Theeffectofdeoxycholicacid(DCA)ontheproteinexpressionofSIＲT3intheNCM460cells．DCAinhibitedtheproteinexpressionofSIＲT3inadose-dependentmanner(A)andatime-dependentmanner(B)．Mean±SEM．n=3．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vsDCA(0μmol/L)group．图3脱氧胆酸对NCM460细胞中SIＲT3蛋白表达的影响4白藜芦醇干预对DCA处理后的NCM460细胞能量代谢的影响为了进一步探讨SIＲT3在DCA损伤中的作用，本实验应用sirtuin家族激动剂白藜芦醇进行反证。·1496·
【作者单位】： 武汉科技大学医学院药学系;
【基金】：武汉科技大学大学生科技创新基金(No.15ZRA167)
【分类号】：R57

【参考文献】

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本文编号：2550561